谷物中农药残留检测方案(液质联用仪)

SSL-CA20-533Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-553 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.- Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cnTel： 86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn 超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法同时测定谷物中331种农药及其代谢物残留量 LCMSMS-553 摘要：使用岛津超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪 LCMS-8045 建立了谷物中331种农药及其代谢物同时测定的方法。使用基质加标样品进行了方法的线性考察和低中高三个浓度水平的加标回收率考察。结果显示，该方法线性范围宽，标准曲线相关系数均大于0.995，低、中、高三个浓度水平下331种农药及其代谢物回收率在60%~120%之间，6针重复进样峰面积精密度在0.3%~15%之间，均可满足日常检验需求。该方法完全满足国标 GB 23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法》，供相关人员参考。 关键词：超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪3331种农药及其代谢物植物源性食品 粮食是人们生活的必须食品，其安全性与人们的身体健康息息相关。粮谷在种植过程中，通常需要使用杀虫剂、杀菌剂、除草剂等农药来保证其质量和产量。不合理的使用农药会造成农药超标，危害人们的健康。因此，各个国家都设置了严格的农药残留限量标准。2021年3月3日，由国家卫生健康委、农业农村部、市场监管总局三部门联合发布了 GB 2763-2021《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》等5个国家标准，其中包括 GB 23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法》检测标准。GB 23200.121-2021标准适用于植物源性食品中331种农药及其44个代谢物(共计 375种组分)残留量的测定，将于2021年9月正式实施。新标准延续了 GB 23200.113-2018《植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定气相色谱-质谱联用法》标准中的 QuEChERS 前处理方法，一个样占使用同一个前处理方法即可同时用于 GC-MS/MS 和LC-MS/MS检测，大大简化了前处理过程，缩短时间，提高了分析效率。 本文使用岛津超高效液相色谱仪 LC-40 和三重四极杆质谱 LCMS-8045 联用，参考国标前处理方法，建立了谷物基质中331种农药及其代谢物残留量的液相色谱-串联质谱的同时分析方法，完全满足国标GB23200.121-2021测定需求。 实验部分 1.1仪器 本实验采用岛津Nexera LC-40 与三重四极杆质谱仪 LCMS-8045联用系统。具体配置为： 系统控制器： CBM-40A自动进样器： SIL-40CXR输液泵： LC-40B XR柱温箱： CTO-40S质谱检测器： LCMS-8045 ( 色谱工作站： Lab S olutions Ver.5.99 ) 1.2分析条件 液相色谱条件： 色谱柱： Shim-pack GIST 50 mm×2.1 mm l.D.， 2 um； P/N：227-30001-02；岛津(上海)实验器材有限公司 流动相：A相为2mmol/L甲酸铵-0.01%甲酸水溶液； B相为2mmol/L甲酸铵-0.01%甲酸甲醇 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量：2uL SIL预处理：同时注入10 uL 水 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为3%，时间程序见表1。 表1梯度洗脱时间程序 时间(min) 泵A浓度 泵B浓度 1.00 97 3 1.50 85 15 2.50 50 50 18.00 30 70 23.00 2 98 27.00 2 98 27.10 97 3 30.00 97 3 质谱条件： 离子源：ESI(±) DL温度：150℃ 雾化气流速：3.0 L/min 加热模块温度：400℃ 加热气流速：：10.0 L/min 接口温度：300℃ 干燥气流速：10.0 L/min 扫描模式：多反应监测(MRM) 1.3标准品及样品制备 混合标准储备溶液(20mg/L)：购于岛津(上海)实验器材有限公司 (P/N：380-03635))，为 ABCD 四组。避光-18℃及以下条件保存，有效期12个月。 混合标准溶液 (5mg/L)：分别吸取等体积 ABCD 四组标准储备液混合均匀，得到5 mg/L 混合标准溶液，避光-18℃及以下条件保存，有效期1个月。 基质匹配标准工作曲线：选择谷物空白样品按照国标方法进行前处理，得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为0.002、0.005、0.01、0.02、0.05、0.1和0.2mg/L的基质匹配标准工作溶液，供液相色谱-质谱联用仪测定。以农药定量用子离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。 样品制备：参照国标规定，对谷物样品进行前处理。前处理流程图如下： 图1 前处理流程图 结果讨论 2.1标准溶液 MRM 色谱图 图2大米基质中331种农药及其代谢物MRM 色谱图(加标浓度 0.01 mg/L) 2.2线性测定结果 对基质匹配标准品按1.2中的分析条件进行分析，外标法制作标准曲曲。部分农药标准曲线结果见表3，331种农药及其代谢物标准曲线线性相关系数均大于0.995，曲线各浓度点准确度在80%~120%之间，满足方法学验证要求。 表3大米基质标准曲线参数(部分农药) 名称 线性方程 相关系数 准确度(%) 线性范围(mg/kg) 氧乐果 Y=(89449.38)X+(620993.2) 0.9959 97.4~103.5 0.002~0.2 3-羟基克百威 Y=(16263.66)X+(86508.4) 0.9998 90.3~107.3 0.002~0.2 内吸磷-S-砜 Y=(48692.81X+(185253.0) 0.9989 90.1~108.1 0.002~0.2 三环唑 Y=(93061.77)X+(366643.8) 0.9987 95.5~106.9 0.002~0.2 涕灭威 Y=(24879.17)X+(30711.29) 0.9999 90.5~105.4 0.002~0.2 甲磺隆 Y=(291180.3)X+(750525.1) 0.9997 98.6~101.3 0.002~0.2 马拉硫磷 Y=(187959.0)X+(465786.4) 0.9997 92.5~105.4 0.002~0.2 扑草净 Y=(81622.25)X+(94407.38) 0.9999 95.6~102.8 0.002~0.2 阿维菌素 Y=(4195.589)X+(13885.20) 0.9989 90.4~103.5 0.002~0.2 Area Area Area Conc.() Conc. () Conc. ( 图44大米基质加标校准曲线(部分农药) 注：根据出峰时间早晚，目目物极性大小，ESI 正负模式不同，选取了9种农药展示。 2.3回收率及精密度测定结果 在大米空白样品中加入农药混标，添加量为0.01、0.02和 0.05 mg/kg三个浓度水平，按照1.3样品前处理流程分别平行处理6份后上机，考察回收率和精密度结果。三个浓度水平下的回收率及峰面积精密度(n=6)结果见图5。结果显示，331种农药及其代谢物回收率在 60%~120%之间，峰面积精密度在0.5%~15%之间，LCMS-8045 测定331种农药及其代谢物精密度良好。 ●Recovery●RSD 回收率 大米基质 0.05 mg/kg 加标(n=6) Recovery RSD 图5大米基质中331种农药及代谢物加标回收率和精密度结果 结论 使用岛津液相色谱仪 LC-40与三重四极杆质谱仪 LCMS-8045 联用建立了谷物基质中331种农药及其代谢物同时测定的方法。结果表明，该方法操作简单、分析速度快、重现性好、准确度高，完全满足国标GB23200.121-2021农残检测需求，可供相关人员参考。 岛津应用云 使用岛津超高效液相色谱-三重四极杆质谱仪LCMS-8045建立了水果基质中331种农药及其代谢物同时测定的方法。使用基质加标样品进行了方法的线性考察和低中高三个浓度水平的加标回收率考察。结果显示，该方法线性范围宽，标准曲线相关系数均大于0.995，低、中、高三个浓度水平下331种农药及其代谢物回收率在60%~120%之间，6针重复进样峰面积精密度在0.5%~15%之间，均可满足日常检验需求。该方法完全满足国标GB   23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法》，供相关人员参考。