植物油中331种农药及其代谢残留量检测方案(液质联用仪)

SSL-CA20-532Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-552 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn 超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法测定植物油中331种农药及其代谢物残留量 LCMSMS-552 要：本文使用岛津超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪建立了植物油中331种农药及其代谢物同时测定的方法。实验结果表明， 0.002~0.2 mg/L浓度范围内，标准曲线相关系数均大于0.99，曲线各浓度点准确度在82.8%~115.9%之间。0.01、0.1和0.5 mg/kg 三个不同浓度加标回收率在 62.4%~118.7%之间，平行三份样品的相对标准偏差 (RSD%)在1.5%~12.3%之间。该方法完全满足国标 GB 23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法》，供相关人员参考。 关键词：超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪植物油331 种农药及其代谢物 植物油是人类膳食中油脂的主要来源，其质量安全与人类的生命健康息息相关，因此加强植物油中有毒有害物质的检测至关重要。近些年，国家陆续发布了涉及植物油质量控制的多项国家标准。其中，2021年3月，国家卫生健康委员会、农业农村部、国家市场监督管理总局三部门联合发布了 GB 2763-2021《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》、GB23200.121-2021《植物源性食品中331种农药及其代 谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法》等食品安全国家标准。GB 23200.121-2021适用的植物源性食品包括食用菌、水果、蔬菜、糖料、粮食、油料作物、茶叶、坚果和香辛料、植物油类10大类农产品，是国内首个单针测定农药残留品种最多的 LC-MS/MS国标。 本文采用岛津三重四极杆液质联用仪，参考国家标准，建立了植物油中331种农药及其代谢物残留量的分析方法，供相关检测人员参考。 实验部分 1.1仪器 系统控制器：CBM-20A 脱气机： DGU-20A 输液泵：LC-30AD×2 自动进样器： SIL-30AC 柱温箱：CTO-30A 色谱工作站： LabSolutions Ver. 5.98 质谱检测器： LCMS-8050 1.2分析条件 液相色谱条件： 色谱柱：专用柱 流动相：A相为2mmol/L甲酸铵-0.01%甲酸水溶液； B相为2 mmol/L 甲酸铵 -0.01%甲酸甲醇 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样量：2uL 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为3%，时间程序见表1。 表1 梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 1.00 泵 B.Conc 3 1.50 泵 B.Conc 15 2.50 泵 B.Conc 50 18.00 泵 B.Conc 70 23.00 泵 B.Conc 98 27.00 泵 B.Conc 98 27.10 泵 B.Conc 3 30.00 控制器 Stop 质谱条件： 离子源：ESI(±) DL温度：150℃ 雾化气流速：3.0L/min 加热模块温度：400℃ 加热气流速：10.0L/min 接口温度：300℃ 干燥噪流速：10.0L/min 扫描模式：多反应监测(MRM) 1.3标准品及样品制备 标准储备溶液(20mg/L)：购于岛津(上海)实验器材有限公司 (P/N：380-03635)，分为 ABCD 四组。避光-18℃及以下条件保存，有效期12个月。 混合标准溶液(5mg/L)：：取相同体积的 ABCD 四组标准储备液混合均匀，得到5 mg/L 混合标准溶液，避光-18℃及以下条件保存，有效期1个月。 基质匹配标准工作曲线：选择植物油空白样品按照国标方法进行前处理，得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为 0.002、0.005、0.01、0.02、0.05、0.1和0.2mg/L的基质匹配标准工作溶液，供液相色谱-质谱联用仪测定。以农药定量用子离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。 样品制备：称取2g试样(精确至0.01g)于50mL塑料离心管中，加入5 mL 水。加入 10 mL 乙腈及1颗陶瓷均质子，剧烈振荡1 min， 加入4g无水硫酸镁、、1g氯化钠、1g柠檬酸钠二水合物、0.5 g柠檬酸二钠盐倍半水合物，剧烈振荡1 min 后4200 r/min 离心 5 min。定量吸取上清液至内含除水剂和净化材料的塑料离心管中(每毫升提取液使用 150 mg 无水硫酸镁、50 mg C18 和 50 mg PSA)，涡旋混匀1 min。4200 r/min 离心5 min，上取上清液过微孔滤膜，用于测定。 结果讨论 2.1色谱图 图1 植物油基质中331种农药及其代谢物 MRM 色谱图(加标浓度0.002 mg/L) Q203.10>129.10(+) 2.12e4 Q240.10>148.00 (+) 3.81e4 Q224.10>127.05 (+) 5.19e4.RT=3.685 ，RT=3.770 .RT=4.020100.00- 100.00- 100.00-%- %·0.00--..... 0.00- 0.00- T!!!3.4 3.6 3.8 4.0 3.4 3.6 3.8 4.0 3.8 4.0 4.2RT (min) RT (min) RT (min)呋虫胺 涕灭威砜 久效磷Q238.10>163.10(+) 1.16e4Q256.00>140.00(+) 9.42e4 Q314.90>98.95(+) 4.06e4RT=4.460 RT=5.115 RT=6.397100.00- 100.00 - 100.00-%- %- %0.00-m.下. 0.00-二 0.004.2 4.4 4.6 4.8 4.8 5.0 5.2 5.4 6.2 6.4 6.6RT (min) RT (min) RT (min)3-羟基克百威 硫环磷 马拉氧磷Q311.00>158.00(+) 9.68e4 Q528.80>148.00 (+) 2.02e4 Q304.10>217.10 (+) 7.72e4RT=15.057 RT=15.298 /RT=15.649100.00- 100.00- 100.00-% %· %0.00 0.00- 0.0015.0 15.0 15.5 15.5RT (min) RT (min) RT (min)除虫脲 噻氟菌胺 苯线磷Q306.10>201.10(+) 1.79e4 Q322.10>96.05(+ 7.24e4 Q282.20>212.05 (+) 3.53e4RT=21.744~ RT=21.925 RT=22.166100.00- 100.00- 100.00-%- %0.00· 0.00- 0.0021.5 22.0 21.5 22.0 22.0RT (min) RT (min) RT (min)噻嗪酮 吡丙醚 二甲戊灵 图22音部分农药色谱图(0.002mg/L) 2.2标准曲线结果 按照1.3配制基质匹配标准工作溶液，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制外标工作曲线。由于篇幅有限，部分农药标准曲线结果见表2及图3，331种农药及其代谢物在标准曲线浓度范围内线性相关系数均大于0.99，曲线各浓度点准确度在82.8%~115.9%之间。 表2 部分农药标准曲线结果 No. 名称 线性方程 相关系数 准确度(%) 霜霉威 Y=105646.3X-98579.79 0.9968 91.1~106.2 2 杀虫脒 Y=25084.07X+2157.708 0.9995 94.5~104.7 3 百治磷 Y=71782.38X-2034.750 0.9994 90.8~107.5 4 烯丙苯噻唑 Y=19776.16X+2124.949 0.9998 95.9~108.3 5 敌敌畏 Y=34440.05X+4325.827 0.9997 92.0~107.4 6 甲磺草胺 Y=2805.942X+629.3510 0.9993 93.4~106.1 ( 西草净 Y=149488.7X+10870.26 0.9997 91.5~103.0 8 二嗪磷 Y=109642.2X+6736.371 0.9996 95.5~107.9 9 氟苯脲 Y=11981.90X-2618.960 0.9978 91.2~106.1 10 丁香菌酯 Y=134893.1X+36508.07 0.9996 92.7~109.2 Area Area Area 7.0e6-：敌敌畏 甲磺草胺 y=34440.05x+4325.827 -y=2805.942x+629.3510 0.0e0 0.0e0 0 100 0 100 Conc.(ng/mL) Conc.(ng/mL) 图3部分农药标准曲线 2.3加标回收率及重复性考察 取植物油空白基质，按照1.3前处理方法，对植物油样品进行低、中、高三个浓度水平加标回收率考察。每个浓度平行制备三份样品，进行重复性考察。低、中、高三个加标浓度分别为 0.01、0.1和0.5 mg/kg。三水平加标回收率及重复性结果见表3. 表3 部分农药回收率结果((n=3) 0.5 mg/kg 37 环嗪酮 90.1 3.0 93.7 2.8 97.5 2.5 38 马拉氧磷 79.4 2.6 88.7 4.1 84.2 2.0 39 杀扑磷 84.6 3.3 91.0 3.0 87.8 2.4 40 氟吗啉 78.4 5.2 82.5 6.8 85.3 4.9 41 苯锈啶 103.6 6.3 106.8 5.0 97.5 2.2 42 烯草酮亚砜 89.0 4.9 101.4 7.2 94.7 4.1 43 保棉磷 88.2 6.4 85.3 4.9 89.8 5.7 44 甜菜宁 106.5 3.4 99.4 2.8 103.1 3.5 45 异噁草酮 86.4 2.5 82.0 3.1 91.6 3.7 46 亚胺硫磷 83.7 4.1 94.6 5.7 90.3 2.6 47 氯虫苯甲酰胺 95.1 1.3 92.7 3.5 102.8 1.6 48 苄嘧磺隆 94.0 2.6 87.4 2.4 91.5 6.3 49 氟硅唑 88.9 3.5 103.7 3.5 92.3 2.9 50 苯氧威 75.8 3.3 77.6 4.3 80.1 4.0 51 苯线磷 84.8 5.0 87.9 7.5 88.3 3.8 52 对硫磷 96.2 4.6 105.7 8.2 112.6 7.1 53 嘧菌环胺 93.3 2.4 96.5 4.9 90.0 3.4 54 稻瘟酰胺 106.1 3.8 110.1 2.0 104.6 5.5 55 喹硫磷 72.0 1.9 83.1 4.7 85.5 2.7 56 醚菌胺 89.7 2.2 91.0 3.3 88.3 1.8 57 氟虫腈 82.6 5.6 85.3 2.6 90.1 58 氟硅唑 74.6 3.3 78.5 1.8 83.2 59 丙草胺 95.8 3.8 94.3 5.9 92.6 5.3 60 烯草酮 84.0 4.0 82.5 4.9 89.8 7.9 61 氟铃脲 90.4 2.9 89.3 3.7 92.5 4.6 62 烯菌胺 93.3 4.6 91.7 3.4 94.0 5.2 63 乙羧氟草醚 82.1 6.2 80.5 5.3 86.9 4.1 结论 本文使用岛津超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪建立了植物油中331种农药及其代谢物测定的方法。实验结果表明，331种农药及其代谢物在标准曲线浓度范围内线性相关系数均大于0.99，曲线各浓度点准确度在82.8%~115.9%之间；0.01、0.1和0.5 mg/kg 三个不同浓度加标回收率在 62.4%~118.7% 之间，，-平行三份样品的相对标准偏差 (RSD%) 在1.5%~12.3%之间。该方法灵敏，准确，稳定，适用于植物油中331种农药及其代谢物的检测。 岛津应用云 本文使用岛津超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪建立了植物油中331种农药及其代谢物测定的方法。实验结果表明，331种农药及其代谢物在标准曲线浓度范围内线性相关系数均大于0.99，曲线各浓度点准确度在82.8%~115.9%之间；0.01、0.1和0.5   mg/kg三个不同浓度加标回收率在62.4%~118.7%之间，平行三份样品的相对标准偏差(RSD%)在1.5%~12.3%之间。