薏苡仁中甘油三油酸酯检测方案(液相色谱仪)

浙江福立分析仪器股份有限公司应用中心 薏苡仁中甘油三油酸酯的测定分析报告 一、执行标准 2020版《中国药典》一部 二、方法概述 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-二氯甲烷(65：35)为流动相，蒸发光散射检测器检测。理论板数按甘油三油酸酯峰计算应不低于 5000. 三、试剂及材料 3.1试剂 3.1.1实验室用水，为新制备的不含有机物的去离子水或蒸馏水。 3.1.2乙腈，色谱纯。 3.1.3；二氯甲烷，色谱纯。 3.1.4甘油三油酸酯，中国药品生物制品检定所。 3.1.5薏苡仁，市售。 3.2试剂制备 3.2.1甘油三油酸酯对照品溶液的制备：取甘油三油酸酯对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含甘油三油酸酯 0.14 mg的溶液，，1即得。 3.2.2供试品溶液的制备：取薏苡仁粉末(过三号筛)约0.6 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相50mL，称定重量，超声处理(功率300W，频率50kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 四、使用仪器设备 4.1高效液相色谱仪：福立 LC5090 高高液相色谱仪，配备 LC5090 在线脱气机、LC5090 二元高压输液泵、LC5090 自动进样器、LC5090 柱温箱、LC5090 蒸发光散射检测器。 4.2色谱柱 Sunniest C18 (150*4.6 id mm， 5 um) 4.3超声波清洗器 4.4分析天平：精度为 0.0001g 4.5其它实验室常用仪器设备 五、测定 5.1甘油三油酸酯对照品溶液典型谱图及结果(进样量10uL) 分析结果表 峰序 组分名 保留时间 峰高 fuyi 峰面积minl luV*min] 1 甘油三油酸酯 13.585 5867 1332 5867 1332 系统评价表 柱长：150mm 死时间： 峰序 组分 保留时间 [min] 半高峰宽min] 因子 理论塔板 分离度 拖尾因子 1 甘油三油酸酯 13.585 0.21310 0.0000 22515 0.000 1.070 5.2甘油三油酸酯对照品溶液重复性谱图及结果(进样量10uL) 峰序 组分名 保留时间 保留时间 面积 面积 峰高 峰高 平均值 RSD 平均值 RSD 平均值 RSD minl [%] luV*min| [%] [uV] [%] 甘油三油酸酯 13.581 0.145 1339 1.238 5849 2.372 5.3标准曲线 标准曲线绘制：分别进样对照溶液 5pL、10pL， 进行 HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以含量为横坐标，绘制标准曲线。 组分[甘油三油酸酯]：曲线方程： 1g(Wi) =-3.94159 + 0.394893*1g(Ai) lg(Wi)[lg(mg)] 5.4品品典型谱图、系统评价及两针分析结果 系统评价表 柱长：150mm 死时间： 峰序 组分名 保留时间 半高峰宽 容量 理论 分离度 拖尾 lmin minl 因子 塔板 因子 1 8.983 0.14861 0.0000 20243 0.000 1.039 2 9.409 0.14773 0.0473 22471 1.694 1.069 3 10.998 0.19164 0.2243 18246 5.526 1.119 4 11.559 0.20197 0.2867 18145 1.681 0.996 5 甘油三油酸酯 13.625 0.21674 0.5167 21893 5.822 1.121 6 14.356 0.22229 0.5981 23108 1.966 1.073 分析结果表 峰序 组分名 保留时间 峰高 峰面积 含量 min| luV」 luV*min %] 1 8.983 3630 575 0.0000 2 9.409 439 67 0.0000 3 10.998 2915 597 0.0000 4 11.559 1368 285 0.0000 5 甘油三油酸酯 13.625 1896 441 1.0486 6 14.356 747 184 0.0000 分析结果表 峰序 组分名 保留时间 峰高 峰面积 含量 |min| uVi luV*minl % 1 8.996 3569 582 0.0000 2 9.409 407 68 0.0000 3 11.087 3194 624 0.0000 4 11.570 1437 282 0.0000 5 甘油三油酸酯 13.669 1810 446 1.0532 6 14.381 743 178 0.0000 总计： 11160 2180 1.0532 由以上实验结果可知，薏苡仁中甘油三油酸酯的平均含量为 1.0509%。根据药典规定，薏苡仁中含甘油三油酸酯不得少于0.50%。测试结果合格。 六、结论 选用福立 LC5090 高效液相色谱仪(蒸发光散射检测器)测定薏苡仁中的甘油三油酸酯，甘油三油酸酯峰理论塔板数高于20000，含甘油三油三酯 1.0509%，完全可以达到中国药典的要求。 仪器配置:高效液相色谱仪：福立LC5090高效液相色谱仪搭载蒸发光散射检测器。色谱柱Sunniest C18 (150*4.6 id mm, 5 μm)超声波清洗器分析天平：精度为0.0001g其它实验室常用仪器设备典型谱图：甘油三油酸酯对照品溶液典型谱图及结果（进样量10uL）样品典型谱图