黄芪中黄芪甲苷检测方案(液相色谱仪)

浙江福立分析仪器股份有限公司应用中心FULI 蒸发光散射检测器分析方案 ----黄芪中黄芪甲苷的测定 黄芪中黄芪甲苷的测定分析报告 一、执行标准 《中国药典2020版第一部》 二、方法概述 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水(36：64)为流动相，蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。 三、试剂及材料 3.1试剂 3.1.1实验室用水，为新制备的不含有机物的去离子水或蒸馏水。 3.1.2乙腈，色谱纯。 3.1.3甲醇，色谱纯。 3.1.4浓氨水，分析纯。 3.1.5黄芪甲苷，中国药品生物制品检定所。 3.1.6黄芪：市售。 3.2试剂制备 3.2.1黄芪甲苷对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加80%甲醇制成每1ml含黄芪甲苷 0.5mg 的溶液，即得。 3.2.2供试品溶液的制备：取黄芪粉末(过四号筛)约1g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含4%浓氨试液的80%甲醇溶液(取浓氨试液4mL， 加80%甲醇至100mL，摇匀)50mL，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用含4%浓氨试液的 80%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 25mL，蒸干，残渣用80%甲醇溶解，转移至5mL；量瓶中，加80%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 四、使用仪器设备 4.1高效液相色谱仪：福立LC5090高效液相色谱仪(搭载蒸发光散射检测器)。 4.2色谱柱 Sunniest C18(250*4.6 id mm， 5 um) 4.3水浴锅 4.4分析天平：精度为0.0001g 4.5其它实验室常用仪器设备 五、测定 5.1黄芪甲苷对照品溶液典型谱图及结果(进样量10uL) 分析结果表 峰序 组分名 保留时间 峰高 峰面积 minl uV uV*min 1 黄芪甲苷 12.755 46028 10380 系统评价表 木长：250mm 死时间： 峰序 组分名 保留时间 半高峰宽 容量 理论 分离度 拖尾 min min| 因子 塔板 因子 1 黄芪甲苷 12.755 0.20621 0.0000 21194 0.000 0.936 5.2 黄芪甲苷对照品溶液重复性谱图及结果(进样量10uL) 峰序 组分 保留时间 平均值 保留时间 RSD 面积平均值 面积RSD 峰高 平均值 峰高 RSD [min] [%] lluV*min| [%] [uV] [%] 1 黄芪甲苷 12.768 0.165 10452 0.765 45448 1.674 5.3标准曲线 标准曲线绘制：分别进样对照溶液2uL、10pL， 进行HPLC分析，然后以峰面积为纵坐标，以含量为横坐标，绘制标准曲线。 校正因子： f0=-4.67372， f1=0.60048 相关系数： r^2= 1.00000 5.4样品典型谱图及两针分析结果 分析结果表 峰序 组分名 保留时间 峰高 峰面积 含量minl [uV] |uV*min [%] 1 黄芪甲苷 12.757 12015 2730 0.2453 分析结果表 峰序 组分名 保留时间 峰高 峰面积 含量 |minl uV」 luV*min| % 1 黄芪甲苷 12.775 12072 2692 0.2432 2692 0.2432 由以上实验结果可知，黄芪中黄芪甲苷的平均含量为 0.244%。根据药典规定，黄芪中含黄芪甲苷不得少于 0.080%。测试结果合格。 六、结论 选用福立 LC5090 高效液相色谱仪(蒸发光散射检测器)测定黄芪中的黄芪甲苷，黄芪甲苷峰塔板数为21194，含黄芪甲苷0.244%，完全可以达到中国药典的要求。 黄芪为常见中药材，具有悠久的药用历史。药典中规定药用黄芪有豆科植物蒙古黄芪和膜荚黄芪的干燥根。黄芪常用作补气益生的药材，黄芪有效成分较为复杂，主要为黄芪皂苷、黄芪多糖等组分。研究表明黄芪有助于改善心血管疾病、具有调节血压、增强人体活动机能，提高抗病、排毒、生肌等功效。黄芪甲苷：生理活性最强，研究表明黄芪甲苷有增强机体免疫功能、强心降压、降血糖、利尿、抗衰老、抗疲劳等作用，同时黄芪甲苷的含量也是评价黄芪主要质量标准之一。运用福立LC5090高效液相色谱仪，搭载蒸发光散射检测器，参考《中国药典2020版第一部》黄芪甲苷的高效液相色谱法进行黄芪中黄芪甲苷含量测定。部分测定结果如下：黄芪甲苷对照品谱图及数据表（进样量10μL）黄芪样品中黄芪甲苷谱图