水中克菌丹、灭菌丹及其代谢产物检测方案(液质联用仪)

ApplicationnNNo.C212News http：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2020年6月400-650-0439 LC/MS 使用APCI-LCMSTM-8060分析水中的克菌丹、灭菌丹及其代谢产物 前言 克菌丹和灭菌丹是带有邻苯二甲酰亚胺环的农药，被广泛用作杀菌剂。灭菌丹尽管未被分类为毒性最高的农药，但是一种使用最为广泛的农药之一，特别是用在了葡萄田及小麦、蕃茄等的作物中。 克菌丹中根据指令2007/5/EC，被收录到指令91/414/EEC的附录1中的活性物质 (https：//eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=celex：32007L0005)。该化合物对人体造成影响的每日容许摄入量(ADI)被设置为0.01-0.1 mg/kg/day。 克菌丹和灭菌丹及其代谢产物邻苯二甲酰亚胺和四氢邻苯二甲酰亚胺具有水生生物毒性。在本文中，对饮用水及地表水中的克菌丹、灭菌丹及其代谢产物进行了定量分析。介绍使用具有APCI离子源的LC-MS/MS 进行快速、高灵敏度分析的方法。样品可直接分析，不需要进行预处理，6分钟就可以完成一次分析。 D.Toino 方法 克菌丹和邻苯二甲酰亚胺是从和光纯药株式会社采购的，灭菌丹是从 Riedel-de Haen公司采购的，四氢邻苯二甲酰亚胺是从东京化成工业株式会社采购的。检测仪器使用的是本公司的UHPLC NexeraTM X2 和安装了 APCI离子源的三重四极杆质谱仪LCMSTM-8060联用系统。使用流动注射分析(FIA)对各组分进行 MRM 优化。同时，通过对接口参数的优化，改善了电离和去溶剂化，提高了灵敏度。 在本方法中，使用含0.1%醋酸的水溶液制备了样品。通过添加酸，使各组分稳定、测定得到良好的峰形。本次未使用内标物质，但使用内标物质对校正质谱仪中可能出现的基质效应是有效的。在京都采集的自来水和河水中添加标准样品溶液，进行了定量分析。 HPLC 及质谱仪的分析条件分别如表1和表2所示。 表1HPLC分析条件 [LC] 系统 ： NexeraMUHPLC 系统 色谱柱 ： Shim-pack ScepterTM C18 (30 mm×2.0 mm I.D.， 1.9um) 温度 ：40℃ 进样量 ：计300 uL(100pL×3次) 流动相 ：水+10mM醋酸铵甲醇 流量 ： 200 uL/min 分析时间 ：6 min [MS] 系统 ： LCMS-8060 离子源 ：大气压化学离子化(APCI) 雾化气流速 ： 3L/min 干燥气流速 ： 3 L/min 脱溶剂温度 ：150℃ 加热块温度 ：300℃ 离子源温度 ： 400℃ 结果和考察 使用通过0.1%醋酸水制备的标准样品溶液，在9至900pg/mL 的范围内绘制了标准曲线。为确认是否可以对不同水样品进行定量，我们制备了在蒸馏水、自来水和河水中添加标准样品溶液的样品进行测试，结果显示重复性良好。 标准曲线数据 图1所示为标准曲线。上述标准曲线的相关系数为0.99以上，校准点的准确性为80-120%。各组分在9 pg/mL 下均可检出，判断定量下限 (LOQ) 为 27 pg/mL。 重复性 在蒸馏水、自来水、河水中添加标准样品溶液，使之分别达到27、45、63 pg/mL， 对制备的样品进行分析，确认了其重复性(n=3)。根据分析河水得到的LOQ， MRM 色谱图和重复性结果分别如图2和表3所示。含 LOQ在内的所有浓度下的 RSD% 均小于12%，取得了良好的结果。 面积 面积 6.000e6邻苯二甲酰亚胺安 ：四氢邻苯二甲酰亚胺 1y=-0.8122137x2+7175.940x+ 1171.300 3.750e5 浓度(ppm) 图1校准曲线 a) b) c) d) Q150.10>96.00(-) 3.69e3 Q146.10(-) 3.66e4 图2河水MRM色谱图(浓度： 27 pg/mL) a)灭菌丹 b)四氢邻苯二甲酰亚胺 c)克菌丹 d)邻苯二甲酰亚胺 化合物 溶液 蒸馏水 自来水 河水 27 pg/mL 11 10 8 克菌丹 45 pg/mL 7 2 5 63 pg/mL 3 4 10 27 pg/mL 4 4 8 四氢邻苯 45 pg/mL 10 6 2 二甲酰亚胺 63 pg/mL 6 1 1 灭菌丹 27 pg/mL 9 11 3 45 pg/mL 3 2 2 63 pg/mL 2 1 4 27 pg/mL 3 4 3 邻苯二甲酰亚胺 45 pg/mL 2 5 3 63 pg/mL 1 6 7 准确度 在自来水和河水中添加标准溶液，使用本方法进行准确度评估的结果如表4所示。 所有组分在各种水样品是均表现出75-120%的准确度。 本次是使用外标法进行了定量，但通过使用对基质效应进行校正的内标物质，可以改善准确度。 浓度pg/ 蒸馏水 自来水 河水 蒸馏水 自来水 河水 准确度 准确度 准确度 准确度 准确度 准确度 mL (%) (%) (%) (%) (%) (%) 9 108 118 115 99 92 76 18 82 92 92 97 75 79 27 106 85 103 101 91 87 45 101 107 90 106 92 77 63 106 93 91 102 79 86 90 96 84 97 101 80 86 135 102 77 76 97 84 76 180 102 85 76 99 91 76 450 104 107 75 101 96 88 900 97 108 89 100 91 84 ( LCMS、Nexera 及 Shim-pack Scepter 是岛津制作所株式会社在日本和其他国家的商标。 此外，本文中出现的公司名称和产品名称是各公司的商标及注册商标。 ) 本文中可能对“TM”和“Q”进行了省略。 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ( 免责声明： ) ( *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ) 克菌丹和灭菌丹是带有邻苯二甲酰亚胺环的农药，被广泛用作杀菌剂。灭菌丹尽管未被分类为毒性最高的农药，但是一种使用最为广泛的农药之一，特别是用在了葡萄田及小麦、蕃茄等的作物中。     克菌丹和灭菌丹及其代谢产物邻苯二甲酰亚胺和四氢邻苯二甲酰亚胺具有水生生物毒性。在本文中，对饮用水及地表水中的克菌丹、灭菌丹及其代谢产物进行了定量分析。介绍使用具有APCI离子源的LC-MS/MS进行快速、高灵敏度分析的方法。样品可直接分析，不需要进行预处理，6分钟就可以完成一次分析