食品中氟烯草酸的测定检测方案(凝胶色谱仪)

食品中氟烯草酸的测定 GB23200.62-2016 适用范围 适用于食品中氟烯草酸的测定。（本实验样品苹果、猪肉、牛奶） 参考标准《GB 23200.62-2016 食品安全国家标准 食品中氟烯草酸残留量的测定 气相色谱-质谱法》 溶液的配置 标准贮备液：精密称取氟烯草酸标准品1mg，于10mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度，配置成浓度为0.1mg/mL的标准贮备液，于4℃避光保存。 标准工作液：移取标准品溶液（0.1mg/mL）0.1mL，用丙酮稀释至10mL，配置成1µg/mL的标准贮备液2，于4℃避光保存。 乙酸乙酯-环己烷（1:1）：将乙酸乙酯和环己烷等体积混合均匀，备用。 乙腈饱和正己烷、正己烷饱和乙腈：量取等体积的乙腈与正己烷，剧烈摇晃后静置分层，下层为正己烷饱和乙腈，上层为乙腈饱和正己烷。 氯化钠溶液（200g/L)）：称取10g氯化钠，定容至50mL。 提取步骤 苹果： 称取10g样品于50mL离心管中，加入10g无水硫酸钠，加入20mL乙酸乙酯，用均质器均质2min（15000 r/min），超声10min，离心5min（6000 r/min），上层有机相通过无水硫酸钠柱过滤入鸡心瓶中，残渣中用20mL乙酸乙酯重复提取一次，离心过滤后，合并二次提取液，置于45℃水浴中旋转蒸发至近干，用乙酸乙酯-环己烷（1:1）复溶并定容至10mL，待GPC净化。 猪肉： ①称取10g样品于50mL离心管中，加入10g氯化钠，再加入20mL乙腈，加入两颗均质子，涡旋，超声10min，离心5min（6000 r/min），上层有机相通过无水硫酸钠柱过滤入分液漏斗中，残渣中用20mL乙腈重复提取一次，离心过滤后，合并二次提取液于分液漏斗中； ②往分液漏斗中加入40mL乙腈饱和正己烷，剧烈震荡，静置分层，移取下层乙腈层于鸡心瓶中；再往鸡心瓶中加入正己烷饱和乙腈15mL重复萃取两次，剧烈震荡，静置分层，移取下层乙腈层于鸡心瓶中，合并三次乙腈层于同一鸡心瓶中，置于45℃水浴中旋转蒸发至近干，用乙酸乙酯-环己烷（1:1）复溶并定容至10mL，待GPC净化。 牛奶： 称取10g样品于50mL离心管中，加入20mL乙腈，涡旋，超声10min，离心5min（6000 r/min），移取上清液至鸡心瓶中，置于45℃水浴中旋转蒸发至剩余10mL；鸡心瓶中的溶液转入分液漏斗中，并加入10mL氯化钠溶液，混匀，加入20mL乙酸乙酯，剧烈震荡，静置分层，移取上层乙酸乙酯层于鸡心瓶中下层水相再用20mL乙酸乙酯萃取，弃去水相，合并乙酸乙酯层于同一鸡心瓶中，置于45℃水浴中旋转蒸发至近干，用乙酸乙酯-环己烷（1:1）复溶并定容至10mL，待GPC净化。 净化步骤 凝胶渗透色谱净化步骤： GPC仪器型号 月旭 GPC-1600凝胶色谱仪 凝胶色谱柱 月旭Bio-Beads S-X3凝胶色谱柱，规格25×400mm 流动相 乙酸乙酯-环己烷（1:1） 流速 5.0 mL /min 进样量 5.0 mL 收集时间 18-22 min 将待净化液经凝胶色谱柱以乙酸乙酯-环己烷（1:1）洗脱，流速5mL/min，收集18-22min流分，将其旋转蒸发至干，加入1mL丙酮溶解残渣，待上机检测。 注意事项 加标水平：10g样品中加入0.2mL 1μg/mL标准工作液，定容至1mL，因此加标水平为0.02mg/kg，最终机度数为 0.1μg/mL。 样品经无水硫酸钠柱后，再用3mL相对应的溶液润洗一次，并压干；分液漏斗萃取完后，用相应的溶液润洗并合并至一起。 若没有均质器，也可采用均质子进行均质。 色谱条件 6.1气相色谱条件 色谱柱 WM-5MS ,30m×0.25mm×0.25μm 进样口温度 280℃ 升温程序 初始温度为200℃，保持1min；以10℃/min升温至280℃，保持12min。 载气 高纯氦气（纯度>99.999%） 进样方式 不分流进样 恒流模式 1.0mL/min 进样量 1μL 6.2质谱条件 电离方式 电子轰击电离源（EI） 电离能量 70eV 传输线温度 280℃ 离子源温度 250℃ 四极杆温度 150℃ 监测方式 选择离子扫描（SIM）:423、308、318、280 溶剂延迟 14min 色谱图或者加标回收率结果 图1. 氟烯草酸0.1 μg/mL图谱 物质 保留时间 类型 峰宽 面积 开始时间 结束时间 氟烯草酸 15.453 M 0.071 46998 15.346 15.623 图2. 苹果样品空白图谱 图3.b苹果样品加标0.02 mg/kg图谱 图4. 猪肉样品空白图谱 图5. 猪肉样品加标0.02 mg/kg图谱 图6. 牛奶样品空白图谱 图7. 牛奶样品加标0.02 mg/kg图谱 表1.加标回收率表 物质 基质 加标水平 平均回收率 RSD值（n=3） 氟烯草酸 苹果 0.02 mg/kg 105% 5.77% 猪肉 92% 2.52% 牛奶 92% 4.07% 8、相关产品信息 货号 名称 规格 00823-00002 GPC凝胶色谱柱 Welch Bio-Beads S-X3， 200-400mesh，400mm*25mm 00837-05006 50mL螺口尖底离心管 Welchrom® 离心管 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌，50mL，50/包 00824-31001 固相萃取装置 Welch 固相萃取装置，12位方缸 00821-32291 盖子+垫片 Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖 中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶 带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk 03904-22001 气相色谱柱 WM-5MS, 30m×0.25mm×0.25μm 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168号TeL:400-810-6969 邮编：321000 E-maiL:Lingyuyu@weLchmat.com 适用范围适用于食品中氟烯草酸的测定。（本实验样品苹果、猪肉、牛奶）参考标准《GB 23200.62-2016 食品安全国家标准 食品中氟烯草酸残留量的测定 气相色谱-质谱法》。 净化步骤GPC仪器型号：月旭 GPC-1600凝胶色谱仪；凝胶色谱柱：月旭Bio-Beads S-X3凝胶色谱柱；规格：25×400mm；流动相：乙酸乙酯-环己烷（1:1）；流速：5.0mL /min；进样量：5.0mL；收集时间：18-22min。色谱条件气相色谱条件质谱条件色谱图或者加标回收率结果图1. 氟烯草酸0.1 μg/mL图谱图2. 苹果样品空白图谱图3.b苹果样品加标0.02 mg/kg图谱图4. 猪肉样品空白图谱图5. 猪肉样品加标0.02 mg/kg图谱图6. 牛奶样品空白图谱图7. 牛奶样品加标0.02 mg/kg图谱 表1.加标回收率表相关产品信息