饲料中利血平的测定农业部1029号公告-2-2011 适用范围 适用于饲料中利血平含量的检测。(本实验样品采用浓缩饲料和配合饲料) 参考标准《农业部1029号公告-2-2011 饲料中利血平的测定 高效液相色谱法》 溶液的配置 利血平标准工作液:精确移取1mL 1mg/mL利血平储备液,用乙腈稀释并定容至10mL,即0.1mg/mL储备液。 利血平标准使用液:精确移取1mL 0.1mg/mL利血平工作液,用乙腈稀释并定容至10mL,即10μg/mL储备液。 乙酸铵缓冲液:称取0.38g乙酸铵,溶解于1000mL水中,加入1.0mL乙酸,并用适量乙酸调节pH至4.2。 氨化乙腈:量取氨水10mL,乙腈90mL,混匀。 提取液:量取乙腈50mL,乙酸乙酯950mL混匀。 提取步骤 精确称取1g样品置于50mL的螺口尖底离心管 加入10mL提取液,涡旋超声10min,6000r/min离心5min,移取上清液于另一离心管中; 往残渣中再加入10mL提取液,涡旋超声10min,6000r/min离心5min,合并两次上清液,离心6000r/min离心5min,待净化。 4、SPE净化步骤 SPE柱:月旭Welchrom®P-SCX,规格:60mg/3mL。 活化:3mL甲醇,3mL水活化,弃去; 上样:准确移取2mL待净化液上样,控制流速,不宜过快,弃去; 淋洗:3mL水,3mL甲醇,弃去并抽干小柱; 洗脱:5mL氨化乙腈洗脱,抽干并收集于15mL离心管中; 复溶:将收集液体于50℃水浴氮吹至干,用流动相定容至1mL,过0.22μm有机滤头,供液相检测。 5、注意事项 加标水平:1g样中加入8μL 10μg/mL标准工作液,定容至1mL,加标水平0.08mg/kg,机读数0.008mg/L; 6、色谱条件 色谱柱:月旭Ultimate® XB-C18,4.6*250mm,5μm 流动相:乙酸铵缓冲液:乙腈=6:4(混为一相) 流速:1.0mL/min 柱温:25℃ 进样量:20μL 检测波长:激发波长:280nm,发射波长:360nm 7、色谱图或者加标回收率结果 图1. 利血平标准品0.008mg/L标准图谱 图2.浓缩饲料样空白图谱 图3.配合饲料样空白图谱 图4.浓缩饲料样加标0.08mg/kg图谱 图5.配合饲料样加标0.08mg/kg图谱 表1.加标回收表 基质 加标水平 平均回收率 RSD值 配合饲料 0.08mg/kg 92.88% 1.36% 浓缩饲料 96.00% 0.57% 8、相关产品信息 货号 名称 规格 00523-20016 SPE小柱 Welchrom® P-SCX,60mg/3mL,50pk 00837-05006 50mL螺口尖底离心管 Welchrom® 离心管 一次性离心管,平盖,锥形底,RCF12000xg,袋装, 未灭菌,50mL,50/包 00837-05002 15mL螺口尖底离心管 Welchrom® 离心管 一次性离心管,平盖,锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌,15mL,50/包 00821-32291 盖子+垫片 Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫,9mm蓝色短螺纹开口盖 中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶 带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk 00824-31001 固相萃取装置 Welch 固相萃取装置,12位方缸 00201-31043 液相分析柱 Ultimate® XB-C18 4.6*250mm,5μm 00802-02201 针头式过滤器 Welchrom® 进口NY,13mm*0.22μm, 100pk 00826-R106S01MANVC 利血平标准品 A2S, CAS No.:50-55-5, 1000µg/mL 于 乙腈, 1.1mL 声明:除非另有说明,此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可,不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168号Tel:400-810-6969 邮编:321000E-mail:lingyuyu@welchmat.com 适用范围适用于饲料中利血平含量的检测。(本实验样品采用浓缩饲料和配合饲料)参考标准《农业部1029号公告-2-2011 饲料中利血平的测定 高效液相色谱法》 SPE净化步骤SPE柱:月旭Welchrom®P-SCX,规格:60mg/3mL;活化:3mL甲醇,3mL水活化,弃去;上样:准确移取2mL待净化液上样,控制流速,不宜过快,弃去;淋洗:3mL水,3mL甲醇,弃去并抽干小柱;洗脱:5mL氨化乙腈洗脱,抽干并收集于15mL离心管中;复溶:将收集液体于50℃水浴氮吹至干,用流动相定容至1mL,过0.22μm有机滤头,供液相检测。 色谱条件色谱柱:月旭Ultimate® XB-C18,4.6*250mm,5μm;流动相:乙酸铵缓冲液:乙腈=6:4(混为一相);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;进样量:20μL;检测波长:激发波长:280nm,发射波长:360nm。 色谱图或者加标回收率结果图1. 利血平标准品0.008mg/L标准图谱图2.浓缩饲料样空白图谱图3.配合饲料样空白图谱图4.浓缩饲料样加标0.08mg/kg图谱图4.浓缩饲料样加标0.08mg/kg图谱相关产品信息