饲料中利血平检测方案(固相萃取仪)

饲料中利血平的测定农业部1029号公告-2-2011 适用范围 适用于饲料中利血平含量的检测。（本实验样品采用浓缩饲料和配合饲料） 参考标准《农业部1029号公告-2-2011 饲料中利血平的测定 高效液相色谱法》 溶液的配置 利血平标准工作液：精确移取1mL 1mg/mL利血平储备液,用乙腈稀释并定容至10mL，即0.1mg/mL储备液。 利血平标准使用液：精确移取1mL 0.1mg/mL利血平工作液,用乙腈稀释并定容至10mL，即10μg/mL储备液。 乙酸铵缓冲液：称取0.38g乙酸铵，溶解于1000mL水中，加入1.0mL乙酸,并用适量乙酸调节pH至4.2。 氨化乙腈：量取氨水10mL，乙腈90mL，混匀。 提取液：量取乙腈50mL，乙酸乙酯950mL混匀。 提取步骤 精确称取1g样品置于50mL的螺口尖底离心管 加入10mL提取液，涡旋超声10min，6000r/min离心5min，移取上清液于另一离心管中； 往残渣中再加入10mL提取液,涡旋超声10min，6000r/min离心5min，合并两次上清液，离心6000r/min离心5min，待净化。 4、SPE净化步骤 SPE柱：月旭Welchrom®P-SCX，规格：60mg/3mL。 活化：3mL甲醇，3mL水活化，弃去； 上样：准确移取2mL待净化液上样，控制流速，不宜过快，弃去； 淋洗：3mL水，3mL甲醇，弃去并抽干小柱； 洗脱：5mL氨化乙腈洗脱，抽干并收集于15mL离心管中； 复溶：将收集液体于50℃水浴氮吹至干，用流动相定容至1mL，过0.22μm有机滤头，供液相检测。 5、注意事项 加标水平：1g样中加入8μL 10μg/mL标准工作液，定容至1mL，加标水平0.08mg/kg，机读数0.008mg/L； 6、色谱条件 色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18，4.6*250mm,5μm 流动相：乙酸铵缓冲液：乙腈=6:4（混为一相） 流速：1.0mL/min 柱温：25℃ 进样量：20μL 检测波长：激发波长：280nm，发射波长：360nm 7、色谱图或者加标回收率结果 图1. 利血平标准品0.008mg/L标准图谱 图2.浓缩饲料样空白图谱 图3.配合饲料样空白图谱 图4.浓缩饲料样加标0.08mg/kg图谱 图5.配合饲料样加标0.08mg/kg图谱 表1.加标回收表 基质 加标水平 平均回收率 RSD值 配合饲料 0.08mg/kg 92.88% 1.36% 浓缩饲料 96.00% 0.57% 8、相关产品信息 货号 名称 规格 00523-20016 SPE小柱 Welchrom® P-SCX,60mg/3mL,50pk 00837-05006 50mL螺口尖底离心管 Welchrom® 离心管 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装, 未灭菌，50mL，50/包 00837-05002 15mL螺口尖底离心管 Welchrom® 离心管 一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装,未灭菌，15mL，50/包 00821-32291 盖子+垫片 Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖 中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶 带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk 00824-31001 固相萃取装置 Welch 固相萃取装置，12位方缸 00201-31043 液相分析柱 Ultimate® XB-C18 4.6*250mm,5μm 00802-02201 针头式过滤器 Welchrom® 进口NY,13mm*0.22μm, 100pk 00826-R106S01MANVC 利血平标准品 A2S, CAS No.:50-55-5, 1000µg/mL 于 乙腈, 1.1mL 声明:除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add:浙江省金华市婺城区双林南街168号Tel:400-810-6969 邮编：321000E-mail:lingyuyu@welchmat.com 适用范围适用于饲料中利血平含量的检测。（本实验样品采用浓缩饲料和配合饲料）参考标准《农业部1029号公告-2-2011 饲料中利血平的测定 高效液相色谱法》 SPE净化步骤SPE柱：月旭Welchrom®P-SCX，规格：60mg/3mL；活化：3mL甲醇，3mL水活化，弃去；上样：准确移取2mL待净化液上样，控制流速，不宜过快，弃去；淋洗：3mL水，3mL甲醇，弃去并抽干小柱；洗脱：5mL氨化乙腈洗脱，抽干并收集于15mL离心管中；复溶：将收集液体于50℃水浴氮吹至干，用流动相定容至1mL，过0.22μm有机滤头，供液相检测。 色谱条件色谱柱：月旭Ultimate®  XB-C18，4.6*250mm，5μm；流动相：乙酸铵缓冲液：乙腈=6:4（混为一相）；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；进样量：20μL；检测波长：激发波长：280nm，发射波长：360nm。 色谱图或者加标回收率结果图1. 利血平标准品0.008mg/L标准图谱图2.浓缩饲料样空白图谱图3.配合饲料样空白图谱图4.浓缩饲料样加标0.08mg/kg图谱图4.浓缩饲料样加标0.08mg/kg图谱相关产品信息