猪肉、猪肝、猪肾、牛奶、鱼肉、虾中五氯酚残留检测方案

动物组织中五氯酚残留的提取与检测 背景 在现代生活中，五氯酚常作为除草剂和杀虫剂被广泛使用。该物质的毒性主要体现在，它会通过食物链在沉积物或者动物体中富集，影响农业和水产业等，进而影响人类。进入人体中的五氯酚会长时间在人体器官中，如肝，肾等蓄积，干扰内分泌，影响免疫系统，甚至还可能在遗传上有潜在威胁。探索一种简便高效的样品前处理方法，对该类物质的检测具有重要意义。 适用范围 本方法(参考GB23200.92-2016)适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛奶、鱼肉、虾等动物源食品中五氯酚残留的检测。 实验步骤 1. 试剂准备 甲醇(CH3OH)：色谱纯 乙腈(CH3CN)：色谱纯 三乙胺(C6H15N) 甲酸 (HCOOH)：色谱纯 氨水(NH3.H2O) 溶液配制 乙腈水溶液：准确量取700 mL 乙腈和 300 mL水，超声震荡摇匀； 5%三乙胺乙乙水溶液：准确量取 50 mL 的三乙胺，倒入1000 mL 的容量瓶中，用乙腈水溶液(7：3)定容至刻度，摇匀； 5%氨水：量取200mL浓氨水， 转入1000 mL 的容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀； 4%甲酸甲醇：量取10mL 的甲酸至250 mL 的容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀； 2%甲酸甲醇水溶液：取一定体积的4%甲酸甲醇溶液与等体积的水混合； 0.1%甲酸水：取1mL的甲酸溶液加入1000 mL 容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。 2、样品提取 称取均质试样2g置于50mL离心管中，加入6mL5%%三乙胺的乙腈水溶液，充分震荡(鸡肉和鱼肉震荡时间为2 min；肝脏、肾脏、虾和蟹样品为1 min)， 并超声提取 5 min， 离心机以3000 r/min 的条件离心5 min， 收集上清液于离心管中，离心后的残渣用6mL5%三乙胺的乙腈水溶液重复一次上述提取步骤，合并上清液，混匀。 3、净化 SPE 柱： SelectCore MAX (60mg/3mL) 固相萃取柱 活化：依次用5mL的甲醇和水活化； 上样：加入提取好的全部上清液； 淋洗：依次用5%氨水溶液、甲醇、2%甲酸的甲醇-水溶液各5mL进行淋洗，淋洗结束后再减压抽干5min以上 洗脱：用4mL4%甲酸甲醇溶液进行洗脱，洗脱液在40℃下用氮气吹至1mL，加水定容至2mL后过0.22 u.m 有机滤膜，上机。 4、液相色谱仪器条件 色谱柱： ChromCore C18 1.8 m 2.1X50mm 柱温：30℃ 进样体积：22u L 流速：0.4mL/min 流动相：A相：0.1%甲酸水溶液； B相：乙腈 洗脱梯度： 时间(min) 流速(mL/min) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 0.4 80 20 3 0.4 30 70 3.5 0.4 0 100 7 0.4 0 100 7.1 0.4 80 20 12 0.4 80 20 5、质谱条件 离子源：电喷雾离子源 (Electrospray ionization， ESI) 负离子扫描 监测方式：多反应监测(Multiple Reaction Monitoring， MRM) 电喷雾电压：-4000V 干燥气：N2 (11L/min， 300℃) 雾化气压力：35psi 图1： 10ng/mL 五氯酚钠标准溶液的多反应监测(MRM)色谱图 图2：空白样品里的五氯酚钠残留量的多反应监测(MRM)色谱图 图3：虾基质中添加量为2.0ug/kg 五氯酚钠标准溶液的多反应监测(MRM)色谱图 图4：猪肉基质中添加量为 2.0 ug/kg 五氯酚钠标准溶液的多反应监测(MRM)色谱图 样品名称 化合物(中文) 化合物(英文) 加标量(ug/kg) 平均回收率% 保留时间(min) 虾 五氯酚钠 Pentachlorophenolsodium 2.0 81.95% 5.518 猪肉 五氯酚钠 Pentachlorophenolsodium 2.0 86.88% 5.470 6、实验结论 由以上数据和图谱可知，纳谱分析的 SelectCore MAX 小柱能有效去除杂质的干扰，对目标物质有良好的保留和洗脱能力，回收率较好，符合国标动物源食品中五氯酚残留的检测要求。 纳谱分析纳谱分析技术(苏洲)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com NanoChrom 样品名称化合物（中文）化合物（英文）加标量（μg/kg）平均回收率%保留时间（min）虾五氯酚钠Pentachlorophenol sodium2.081.95%5.518猪肉五氯酚钠Pentachlorophenol sodium2.086.88%5.470