药物中麻痹病毒检测方案(液质联用仪)

代谢组学技术挖掘病毒感染宿主后代谢动态变化分析产品配置单(液质联用仪) 方案摘要 采用基于静电场轨道阱高分辨质谱Q Exactive 平台的非靶标和靶标代谢组学方式研究了麻痹病毒 (Cricket paralysis virus， CrPV) 感染昆虫 Bm5细胞后宿主代谢的动态变化情况。研究发现， CrPV 感染导致 Bm5 细胞的代谢具有显着和特定阶段的变化。比如， CrPV 持续感染过程中葡萄糖和谷氨酰胺水平均显着升高，随后在致病期急剧下降。不同代谢产物的丰度和途径分析进一步确定了病毒生命周期不同阶段的特定代谢特征，为病毒感染宿主后的致病过程、疾病分期、以及药物治疗效果提供理论依据。 方案详情 本文在 Thermo ScienticTM 四极杆静电场轨道阱高分辨质谱平台 Thermo ScienticM QExactive 上建立了非靶标和靶标代谢组学的分析方法，研究了麻痹病毒 (Cricket paralysis virus，CrPV) 感染昆虫Bm5后胞后宿主代谢的动态变化情况。病毒感染后不同时期的细胞提取液样品经过色谱系统 Ultimate 3000 XRS UHPLC system (Thermo Fisher Scientific)分离后直接进入质谱进行检测。借助统计学方法 PCA-X 和 OPLS-DA 对样品中的所有代谢物进行非靶标代谢组分分析。利用现有的300个极性化合物的数据库进行靶标代谢组分分析，再对靶标代谢的分析结果利用 MetaboAnalyst 及 KEGG 数据库进行代谢通路分析。 基于300个极性代谢物的自建数据库，从Bm5细胞提取液中共鉴定出了59个代谢物，其中包含32个氨基酸、4个糖类成分、5个羧酸类成分、及8个其它类组分。研究发现，CrPV 感染导致 Bm5 细胞的代谢具有显着和特定阶段的变化，主要影响的是氨基酸代谢通路，CrPV 持续感染过程中葡萄糖和谷氨酰胺水平均显着升高，随后在致病期急剧下降。 不同代谢产物的丰度和途径分析进一步确定了病毒生命周期不同阶段的特定代谢特征。为病毒感染宿主后的致病过程，疾病分期，以及药物治疗效果提供理论依据。Orbitrap 其高灵敏度、高精度，高通量等特性在代谢组学和脂质组学研究中表现出色，可以帮助研究者在一个平台上实现非靶标和靶标代谢组学的综合分析。 本文在 Thermo Scientic™ 四极杆静电场轨道阱高分辨质谱平台 Thermo Scientic™ Q Exactive上建立了非靶标和靶标代谢组学的分析方法，研究了麻痹病毒（Cricket paralysis virus, CrPV）感染昆虫 Bm5 细胞后宿主代谢的动态变化情况。病毒感染后不同时期的细胞提取液 样品经过色谱系统 Ultimate 3000 XRS UHPLC system (Thermo Fisher Scientific)分离后直接进 入质谱进行检测。借助统计学方法 PCA-X 和 OPLS-DA 对样品中的所有代谢物进行非靶标 代谢组分分析。利用现有的 300 个极性化合物的数据库进行靶标代谢组分分析，再对靶标代 谢的分析结果利用 MetaboAnalyst 及 KEGG 数据库进行代谢通路分析。