食用油（橄榄油、大豆油）中品种鉴别检测方案(生物质谱)

SSL-CA14-981Excellence in Science Excellence in ScienceMALDI-011 岛津企业管理(中国)有限公司分析中心http：//www.shimadzu.com.cn上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋咨询电话：021-34193996Hotline： 021-34193996Building C801，No.180 Yizhou Road， Shanghai 应用台式 MALDI-TOF-MS 鉴别橄榄油与大豆油 MALDI-011 摘要：本文以DHB (2，5-二羟基苯甲酸)为基质，应用岛津台式基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱MALDI-8020分析多种橄榄油和大豆油样品，通过多元变量统计分析软件 Simca 对检测结果进行主成分分析(PCA)，成功实现了橄榄油与大豆油的鉴别。 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI-8020 食用油橄榄油大豆油 食用油的安全一直是公众关注的话题。传统分析食用油的方法有 PCR、色谱、核磁共振、MALDI-TOF-MS等。在这些方法中， MALDI-TOF-MS因其操作简便、分析通量高、灵敏度高而具有显著优势。传统 MALDI-TOF质谱体积大，价格昂贵，不易普及。在本研究中，我们使用一种小型的台式线性 MALDI-TOF分别分析五 种不同品牌的大豆油和橄榄油，将采集到的质谱图中的相对信号强度导入多元变量统计分析软件 Simca 进行主成分分析(PCA) ：，结果表明，5种大豆油与5种橄榄油的所有分析图谱全部得到有效区分，表明应用台式线性 MALDI-TOF 可以实现食用油的分析。 *主成分分析：英文名称为 Principal Component Analysis， 简称PCA， 是一种统计方法。通过正交变换将一组可能存在相关性的变量转换为一组线性不相关的变量，转换后的这组变量叫主成分。在实际课题中，为了全面分析问题，往往提出很多与此有关的变量(或因素)，因为每个变量都在不同程度上反映这个课题的某些信息。信息的大小通常用离差平方和或方差来衡量。 |实验部分 1.1仪器 MALDI-8020 台式基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪 1.2分析条件 调谐模式：线性正离子模式扫描范围：m/z 500-2000激光器：355nm 固态激光器激光能量：85 I样品前处理 超市分别购买五种不同品牌的大豆油和橄榄油，作为质谱分析的样本。将 DHB 基质溶于四氢呋喃，配成10mg/mL的基质溶液。吸取2ul基质溶液点靶，干燥后用医用棉签沾取少量食用油样品，涂抹在基质结晶层上。每个样品涂抹三个靶点，共计涂抹30个靶点，涂抹完成后将靶板送入质谱进行分析。质谱分析时每个靶点重复采集三次。 l结果与讨论 五种橄榄油15个靶点共计采集45张质谱图45张质谱图的信号峰分布高度相似，质谱图示例(1号橄榄油)见图1-3中的上图。同样，五种大豆油15个靶点共计采集45张质谱图，这45张质谱图中的信号峰分布也是高度相似，质谱图示例(1号大豆油)见图1-3中的下图。从质谱图上来看，橄榄油和大豆油的信号峰的整体分布相似，主要集中在 m/z 550-650，850-950之间，对应了食用油中二酰基甘油(DAGs)样碎片和三酰基甘油钠加合物的分布。将这两个区域的质谱图局部放大(见图2及图3)，可以看到橄榄油与大豆油的图谱存在显著差异。橄榄油的峰主要集中在 m/z 575-579，601-606，879-883，905-910等区域，其中m/z 577，603，604，881，907，908等具有较高信号强度。大豆油的峰主要集中在 m/z 573-579， 595-606，853-855，875-883，899-909等区域，其中 m/z 599， 601，603，877，879，901，903，905等具有较高的信号强度。橄榄油和大豆油中特征峰的信号强度有较大不同，可能与两者所含脂肪酸种类及比例不同有关。 图1橄榄油和大豆油的一级质谱图示例(1号橄榄油与1号大豆油) 图2橄榄油和大豆油的一级质谱局部放大图(m/z 560-620) 图3橄榄油和大豆油的一级质谱局部放大图(m/z850-930) 将橄榄油和大豆油共计90张谱图的相对强度值(质谱峰信号强度与最高峰的信号强度的比值(百分比))导入Umetrics Simca 13.0软件进行主成分分析(PCA)， 结果见图4，橄榄油和大豆油的样品分别聚在一起，其中第一主成分方差贡献率为51%，第二主成分方差贡献率为17%。通过主成分分析，成功实现了不同橄榄油和大豆油样品的鉴别。 橄榄油大豆油 图4橄榄油和大豆油质谱结果主成分分析图谱 结论 本文应用台式基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI-8020 检测橄榄油和大豆油样品，通过质谱检测结果的统计分析，成功实现了大豆油与橄榄油样品的鉴别。 MALDI-8020 作为台式基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱，体积紧凑、分析速度快、仪器维护方便，性能卓越，是食用油分析的有力工具。 Shimadzu(China)CO.，LTD. Analytical Applications Center 食用油的安全一直是公众关注的话题。传统分析食用油的方法有PCR、色谱、核磁共振、MALDI-TOF-MS等。在这些方法中，MALDI-TOF-MS因其操作简便、分析通量高、灵敏度高而具有显著优势。传统MALDI-TOF质谱体积大，价格昂贵，不易普及。在本研究中，我们使用一种小型的台式线性MALDI-TOF分别分析五种不同品牌的大豆油和橄榄油，将采集到的质谱图中的相对信号强度导入多元变量统计分析软件Simca进行主成分分析（PCA），结果表明，5种大豆油与5种橄榄油的所有分析图谱全部得到有效区分，表明应用台式线性MALDI-TOF可以实现食用油的分析。