植物油中9种抗氧化剂的测定检测方案(样品前处理)

植物油中9种抗氧化剂的测定GB5009.32-2016 抗氧化剂是指能防止或延缓食品氧化，提高食品的稳定性和延长贮存期的食品添加剂。GB5009.32-2016《食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定》中采用GPC和C18小柱对食品中9种抗氧化剂进行前处理，该方法回收率低，测试结果不稳定。安谱实验优化了实验方法，用CNW Poly-Sery PSD SPE小柱进行前处理，克服了国标方法的缺点，方法简单，9种抗氧化剂的回收率均在90%以上。 一、样品前处理 植物油基质：准确称取混合均匀的试样1g（精确至0.01 g）于50mL离心管中，加入3mL乙腈饱和的正己烷溶液溶解样品，涡旋1min，静置10min，用3mL含AP的正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2min，3000r/min离心5min，收集乙腈层于另一50mL离心管中，再重复使用3mL含AP的正己烷饱和的乙腈溶液溶液提取4次，合并5次提取液，待上样。（提取次数对BHT的回收率影响很大） 含AP的正己烷饱和的乙腈溶液：1L正己烷饱和的乙腈中溶解0.1gL-抗坏血酸棕榈酸酯（AP) 植物油基质加标：在样品中加入标准溶液（1000ppm，100ul，使上机检测浓度为50ppm），其它操作同样品空白。 二：小柱操作 SBEQ-CA3554 CNW Poly-Sery PSD SPE小柱 500mg/6ml 小柱上端预装2g 无水硫酸钠 活化：5ml甲醇 平衡：5ml乙腈 上样：全部待净化液 洗脱：15ml乙腈：甲醇（2:1） 氮吹浓缩：全部上样液和洗脱液一起收集浓缩，在40℃下旋蒸至1ml左右，转移至15mL离心管中，用少量乙腈润洗旋蒸瓶3次，合并后40℃氮吹至0.5mL，用乙腈定至2mL，涡旋30s，过0.22um PVDF或PTFE滤头后，用高效液相色谱仪配二极管阵列检测器测定。 三：仪器测定条件 仪器：HPLC-DAD 色谱柱：C18（4.6*100mm*2.6um） 流动相梯度： 时间min 甲醇% 0.5%甲酸水溶液 % 0 50 50 4 50 50 5 80 20 8 95 5 10 95 5 11 50 50 15 50 50 流速：1.0mL/min 柱温：35 ℃ 进样量：5μL 检测器波长：280nm 四：实验谱图 1：50ppm标准谱图 2：植物油基质空白谱图 3：植物油基质加标50ppm 五：实验数据 序号 目标物 植物油基质平均回收率 1 PG 没食子酸丙酯 100.3% 2 THBP 2,4,5—三羟基苯丁酮 99.0% 3 TBHQ 叔丁基对苯二酚 96.9% 4 NDGA 去甲二氢愈创木酸 99.2% 5 BHA 叔丁基对羟基茴香醚 99.0% 6 Ionox-100 2,6-二叔丁基-4-羟甲基苯酚 92.6% 7 OG 没食子酸辛酯 95.1% 8 DG 没食子酸十二酯 100.7% 9 BHT 2,6-二叔丁基对甲基苯酚 97.1% 六：实验耗材 货号 名称 规格 品牌 SBEQ-CA3554 CNW Poly-Sery PSD 聚苯乙烯二乙烯苯 SPE 小柱 500mg， 6mL/30 pcs CNW CDAA-M-3110013-AA-1ml ９种抗氧化剂混标（GB 5009.32-2016) 1000mg/L于乙腈，1ml ANPEL SBEQ-CR0002 SPE 小柱连接件【1，3，6mL】，PP 材质 12 个/ 包 CNW SBEQ-CG1012 CNW G系列12位固相萃取真空装置 玻璃缸（内）长*宽*高=16.2*7.5*15.5cm，12位 CNW SCAA-114 亲水PTFE针式滤器（金色） 13mm*0.22um，金色，100只/罐 ANPE L QBAA-002012 2ml 无针注射器 100 只/ 包 ANPEL ABEQ-3300002-25 CNW 50ml 尖底离心管 25/袋 CNW ADEQ-2600111 3ml 塑料巴斯德吸管、160mm、未灭菌 500/ 箱 CNW VAAP-32009E-1232A-100 CNW 9mm 透明螺纹口自动进样瓶( 带刻度、书写) 2ml，12*32mm， 9mm，100 只/ 盒 CNW VEAP-5394-09FRB-100 兼容Agilent 的9mm 蓝色开孔拧盖、含PTFE/ 橡胶隔垫，Bond 100/ 袋 CNW EOFO-945605 Talboys 基本型旋涡混合器，230V/150W 外形尺寸： 20.3×10.2×14.0cm， 包装重量：5.3kg Talboys 第5页 / 共5页 　　抗氧化剂是指能防止或延缓食品氧化，提高食品的稳定性和延长贮存期的食品添加剂。GB5009.32-2016《食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定》中采用GPC和C18小柱对食品中9种抗氧化剂进行前处理，该方法回收率低，测试结果不稳定。安谱实验优化了实验方法，用CNW Poly-Sery PSD SPE小柱进行前处理，克服了国标方法的缺点，方法简单，9种抗氧化剂的回收率均在90%以上。 一、样品前处理1、 植物油基质：准确称取混合均匀的试样1g（精确至0.01 g）于50mL离心管中，加入3mL乙腈饱和的正己烷溶液溶解样品，涡旋1min，静置10min，用3mL含AP的正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2min，3000r/min离心5min，收集乙腈层于另一50mL离心管中，再重复使用3mL含AP的正己烷饱和的乙腈溶液溶液提取4次，合并5次提取液，待上样。（提取次数对BHT的回收率影响很大）含AP的正己烷饱和的乙腈溶液：1L正己烷饱和的乙腈中溶解0.1gL-抗坏血酸棕榈酸酯（AP)2、 植物油基质加标：在样品中加入标准溶液（1000ppm，100ul，使上机检测浓度为50ppm），其它操作同样品空白。 二：小柱操作SBEQ-CA3554 CNW Poly-Sery PSD SPE小柱 500mg/6ml小柱上端预装2g 无水硫酸钠活化：5ml甲醇平衡：5ml乙腈上样：全部待净化液  洗脱：15ml乙腈：甲醇（2:1）氮吹浓缩：全部上样液和洗脱液一起收集浓缩，在40℃下旋蒸至1ml左右，转移至15mL离心管中，用少量乙腈润洗旋蒸瓶3次，合并后40℃氮吹至0.5mL，用乙腈定至2mL，涡旋30s，过0.22um PVDF或PTFE滤头后，用高效液相色谱仪配二极管阵列检测器测定。 三：仪器测定条件仪器：HPLC-DAD色谱柱：C18（4.6*100mm*2.6um） 流动相梯度： 流速：1.0mL/min柱温：35 ℃进样量：5μL检测器波长：280nm  四：实验谱图1：50ppm标准谱图                       2：植物油基质空白谱图 3：植物油基质加标50ppm 五：实验数据六：实验耗材