调味品中硝酸盐和亚硝酸盐含量检测方案(流动注射分析)

全自动流动注射分析仪应用案例 上头了!调味品检测，吉天流动注射信手拈来 民以食为天，食以味为先。在调味品行业朝蓬勃发展同时，“一滴香”“牛肉膏”“勾兑醋”等事件，也将其推向了食品安全的“重灾区” 调味品不仅要调出美味的“味”，更要调出安全的“味”。吉天流动注射分析仪，为调味品的检测提供了解决方案。 流动注射-调味品中硝酸盐亚硝酸盐检测解决方案 、前言 随着我国餐饮业的飞速发展，调味品行业也出现了空前的发展，且总体发展趋势朝向高档化、方便化、多元化、复合化和营养化。调味品已经从简单的油盐酱醋发展成为一个品种众多的大家族，成为人们生活中不可或缺的食物伴侣。 其中亚硝酸盐作为添加剂在调味品中起到了保鲜防腐的作用，一般蔬菜水果中都含有硝酸盐，硝酸盐在细菌作用下可还原为亚硝酸盐，量大时可引起中毒，且能产生致癌物质亚硝胺，从而危害人体健康。另有不法分子用工业盐代替食用盐，在生产调味品过程中添加进去，使得亚硝酸盐含量超标，引起中毒，对人体产生很大危害，所以检测调味品中硝酸盐和亚硝酸盐意义重大。 目前 GB 5009.33-2016中硝酸盐和亚硝酸盐的检测方法中常用的是分光光度法，此方法为纯手工操作，操作复杂，无法避免手工误差，不仅实验时间长，而且对显色时间要求严格，无法一次性做大量样品。使用全自动流动注射分析仪来进行实验检测，不仅提高了实验效率，而且实验结果更加准确可靠，操作更加简便安全。 二、实验目的 更加高效、快速、准确的测定调味品中硝酸盐和亚硝酸盐含量。 三、实验原理 试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与磺胺重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，在540 nm 波长下比色测得亚硝酸盐含量；采用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，测得亚硝酸盐总量，由测得的亚硝酸盐总量减去试样中亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。 四、样品处理 称取1.25 g试样置于 100mL 具塞锥形瓶中，加适量 50 g/L 饱和硼砂溶液，加入70℃左右的水，混匀，于沸水浴中加热 15 min， 取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。 定量转移上述提取液至 50mL具塞比色管中，加入适量亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。 加水至刻度，摇匀，转移到50ml离心管中，离心后取中间无悬浮物溶液测试，如样品有浑浊颗粒物，可通过针头过滤器过滤，单次样品量4mL。 五、实验仪器 本实验使用吉天全自动流动注射分析仪 iFIA7 进行调味品中硝酸盐和亚硝酸盐含量的检测。 图1 iFIA7 全自动流动注射分析仪 六、实验数据 1、方法线性 图2硝酸盐工作曲线 图3亚硝酸盐工作曲线 2、检出限 硝酸盐检出限，按照 EPA 方法 DL=t(n-1， a=0.99) *(s)， 当n=7时t=3.14，取0.1mg/L标准溶液，测定检出限数据其结果为 0.0207mg/L(以 NaNO2计)。 表1硝酸盐检出限数据 SD 次数 1 2 3 4 5 6 7 回算浓度 mg/L (以 0.0929 0.0871 0.0894 0.0876 0.0953 0.0911 0.0749 NaNO2计) 亚硝酸盐检出限，按照 EPA 方法 DL=t(n-1a=0.99)*(s)， 当 n=7时 t=3.14，取0.1mg/L标准溶液，测定检出限数据其结果为 0.0153mg/L(以NaNO2计)。 表2亚硝酸盐检出限数据 SD 次数 1 2 3 4 5 6 7 回算浓度 mg/L(以 0.1031 0.1059 0.1005 0.1035 0.0973 0.1053 0.1129 3、精密度 取 2.0mg/l 的硝酸盐标准溶液及亚硝酸盐标准溶液，测定7次计算精密度，精密度分别为0.4%和0.25%。参考数据见表3、表4。 表3硝酸盐精密度数据 测定次数 1 2 3 4 5 6 7 回算浓度 mg/L 2.08 2.08 2.08 2.07 2.07 2.09 2.08 表4亚硝酸盐精密度数据 测定次数 1 2 3 4 5 6 7 回算浓度 mg/L 2.00 1.99 2.00 1.99 2.00 2.00 2.01 (以NaNO2计) 4、实际样品测试数据结果 对市面上各种类型的调味品如酱油，果酱、海鲜酱等进行了硝酸盐及亚硝酸盐的测定及不同浓度的加标实验，其数据见表5、表6。 表5硝酸盐实际样品测定数据 样品名称 原样浓度mg/kg (以NaNO2计) 本底值mg/1 (以NaNO2计) 加标量mg/1 (以NaNO计) 加标后浓度mg/1 (以NaNO2计) 加标回收率% 老抽 24.1 0.607 0.3 0.8897 94.2% 0.5 1.1263 103.9% 1.0 1.7031 109.6% 瓶装酱油 24.645 0.6171 0.3 0.9017 94.8% 0.5 1.1117 98.9% 1.0 1.6280 101% 散装酱油 33.42 0.8407 0.3 1.1263 95.2% 0.5 1.3562 103.1% 1.0 1.8849 104.4% 鱼露 20.64 0.5168 0.3 0.8253 102.8% 0.5 0.9976 96.2% 1.0 1.5034 98.7% 蓝莓酱 24.7531 0.6503 0.3 0.9189 89.5% 0.5 1.0863 87.2% 1.0 1.5942 94.4% 草莓酱 70.5526 1.7237 0.3 2.0142 96.8% 0.5 2.1863 92.5% 1.0 2.7425 101.9% 番茄酱 25.7948 0.9724 0.3 1.2536 93.7% 0.5 1.5032 106.1% 1.0 1.8976 92.5% 海鲜酱 15.8201 1.5855 0.3 1.8609 91.8% 0.5 2.0376 90.4% 1.0 2.4887 90.3% 表6亚硝酸盐实际样品测定数据 样品名称 原样浓度mg/kg (以NaNO2计) 本底值mg/1 (以NaN02计) 加标量mg/1 (以NaNO2计) 加标后浓度mg/1 (以NaNO2计) 加标回收率% 老抽 1.1947 0.0301 0.1 0.1261 96% 0.3 0.3470 105.6% 0.5 0.5227 98.5% 瓶装酱油 0.945 0.0237 0.1 0.1137 89.9% 0.3 0.3274 101.2% 0.5 0.5286 100.9% 散装酱油 1.38 0.0344 0.1 0.1306 96.2% 0.3 0.3264 97.3% 0.5 0.5369 100.5% 鱼露 1.86 0.0468 0.1 0.1504 103.6% 0.3 0.3179 90.4% 0.5 0.5329 97.2% 蓝莓酱 0.5231 0.013 0.1 0.1025 89.5% 0.3 0.3073 98.1% 0.5 0.4983 97.1% 草莓酱 0 0 0.1 0.0952 95.2% 0.3 0.3045 101.5% 0.5 0.4863 97.3% 番茄酱 0.1197 0.003 0.3 0.3124 103.1% 0.5 0.4987 99.1% 1.0 0.9993 99.6% 海鲜酱 1.6677 0.0418 0.3 0.3245 94.2% 0.5 0.4998 91.6% 1.0 1.0137 97.2% 七、实验结论 本实验方案成功的对调味品中硝酸盐和亚硝酸盐含量进行了测定，其中硝酸盐检出限为0.0207mg/kg (以 NaNO2 计)，精密度为 0.4%，亚硝酸盐检出限为 0.0153mg/kg (以NaNO2计)，精密度为0.25%，都远低于GB 5009.33-2016中要求范围，满足国标要求。 通过对不同种类调味品中硝酸盐及亚硝酸盐进行低中高浓度加标测定，其加标回收率均在85~110%之间，使用全自动流动注射分析法测定调味品中硝酸盐、亚硝酸盐含量，不仅提高了 样品分析效率，并且更加准确、简便、安全。 民以食为天，食以味为先。在调味品行业朝蓬勃发展的同时，“一滴香”、“牛肉膏”、“勾兑醋”等事件，也将其推向了食品安全的“重灾区”。调味品不仅要调出美味的“味”，更要调出安全的“味”。吉天流动注射分析仪，为调味品的检测提供了解决方案。 流动注射-调味品中硝酸盐亚硝酸盐检测解决方案一、  前言随着我国餐饮业的飞速发展，调味品行业也出现了空前的发展，且总体发展趋势朝向高档化、方便化、多元化、复合化和营养化。调味品已经从简单的油盐酱醋发展成为一个品种众多的大家族，成为人们生活中不可或缺的食物伴侣。其中亚硝酸盐作为添加剂在调味品中起到了保鲜防腐的作用，一般蔬菜水果中都含有硝酸盐，硝酸盐在细菌作用下可还原为亚硝酸盐，量大时可引起中毒，且能产生致癌物质亚硝胺，从而危害人体健康。另有不法分子用工业盐代替食用盐，在生产调味品过程中添加进去，使得亚硝酸盐含量超标，引起中毒，对人体产生很大危害，所以检测调味品中硝酸盐和亚硝酸盐意义重大。目前GB 5009.33-2016中硝酸盐和亚硝酸盐的检测方法中常用的是分光光度法，此方法为纯手工操作，操作复杂，无法避免手工误差，不仅实验时间长，而且对显色时间要求严格，无法一次性做大量样品。使用全自动流动注射分析仪来进行实验检测，不仅提高了实验效率，而且实验结果更加准确可靠，操作更加简便安全。二、实验目的    更加高效、快速、准确的测定调味品中硝酸盐和亚硝酸盐含量。三、实验原理试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与磺胺重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，在540 nm波长下比色测得亚硝酸盐含量；采用镉柱将硝酸盐还原成亚硝酸盐，测得亚硝酸盐总量，由测得的亚硝酸盐总量减去试样中亚硝酸盐含量，即得试样中硝酸盐含量。四、样品处理称取1.25 g试样置于100mL具塞锥形瓶中，加适量 50 g/L饱和硼砂溶液，加入70℃左右的水，混匀，于沸水浴中加热15 min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。定量转移上述提取液至50 mL具塞比色管中，加入适量亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，转移到50ml离心管中，离心后取中间无悬浮物溶液测试，如样品有浑浊颗粒物，可通过针头过滤器过滤，单次样品量4mL。五、实验仪器本实验使用吉天全自动流动注射分析仪iFIA7进行调味品中硝酸盐和亚硝酸盐含量的检测。                           图1 iFIA7全自动流动注射分析仪 六、实验数据1、方法线性                            图2 硝酸盐工作曲线图3 亚硝酸盐工作曲线2、检出限硝酸盐检出限，按照EPA方法DL=t（n-1，α=0.99）*(s)，当n=7时t=3.14，取0.1mg/L标准溶液，测定检出限数据其结果为0.0207mg/L（以NaNO2计）。表1 硝酸盐检出限数据SD次数1234567回算浓度mg/L（以NaNO2计）0.09290.08710.08940.08760.09530.09110.0749亚硝酸盐检出限，按照EPA方法DL=t（n-1，α=0.99）*(s)，当n=7时t=3.14，取0.1mg/L标准溶液，测定检出限数据其结果为0.0153mg/L（以NaNO2计）。表2亚硝酸盐检出限数据 SD次数1234567回算浓度mg/L（以NaNO2计）0.10310.10590.10050.10350.09730.10530.11293、精密度取2.0mg/l的硝酸盐标准溶液及亚硝酸盐标准溶液，测定7次计算精密度，精密度分别为0.4%和0.25%。参考数据见表3、表4。表3 硝酸盐精密度数据测定次数1234567回算浓度mg/L（以NaNO2计）2.082.082.082.072.072.092.08表4 亚硝酸盐精密度数据测定次数1234567回算浓度mg/L（以NaNO2计）2.001.992.001.992.002.002.014、实际样品测试数据结果对市面上各种类型的调味品如酱油，果酱、海鲜酱等进行了硝酸盐及亚硝酸盐的测定及不同浓度的加标实验，其数据见表5、表6。表5 硝酸盐实际样品测定数据 样品名称原样浓度mg/kg（以NaNO2计）本底值mg/l（以NaNO2计）加标量mg/l（以NaNO2计）加标后浓度mg/l（以NaNO2计）加标回收率% 老抽 24.1 0.6070.30.889794.2%0.51.1263103.9%1.01.7031109.6% 瓶装酱油 24.645 0.61710.30.901794.8%0.51.111798.9%1.01.6280101% 散装酱油 33.42 0.8407 0.31.126395.2%0.51.3562103.1%1.01.8849104.4% 鱼露 20.64 0.51680.30.8253102.8%0.50.997696.2%1.01.503498.7% 蓝莓酱24.75310.65030.30.918989.5%0.51.086387.2%1.01.594294.4% 草莓酱70.55261.72370.32.014296.8%0.52.186392.5%1.02.7425101.9% 番茄酱 25.7948 0.97240.31.253693.7%0.51.5032106.1%1.01.897692.5% 海鲜酱 15.8201 1.58550.31.860991.8%0.52.037690.4%1.02.488790.3% 表6 亚硝酸盐实际样品测定数据样品名称原样浓度mg/kg（以NaNO2计）本底值mg/l（以NaNO2计）加标量mg/l（以NaNO2计）加标后浓度mg/l（以NaNO2计）加标回收率%老抽1.19470.03010.10.126196%0.30.3470105.6%0.50.522798.5%瓶装酱油0.9450.02370.10.113789.9%0.30.3274101.2%0.50.5286100.9%散装酱油1.380.0344 0.10.130696.2%0.30.326497.3%0.50.5369100.5%鱼露1.860.04680.10.1504103.6%0.30.317990.4%0.50.532997.2%蓝莓酱0.52310.0130.10.102589.5%0.30.307398.1%0.50.498397.1%草莓酱000.10.095295.2%0.30.3045101.5%0.50.486397.3%番茄酱0.11970.0030.30.3124103.1%0.50.498799.1%1.00.999399.6%海鲜酱1.66770.04180.30.324594.2%0.50.499891.6%1.01.013797.2% 七、实验结论  本实验方案成功的对调味品中硝酸盐和亚硝酸盐含量进行了测定，其中硝酸盐检出限为0.0207mg/kg（以NaNO2计），精密度为0.4%，亚硝酸盐检出限为0.0153mg/kg（以NaNO2计），精密度为0.25%，都远低于GB 5009.33-2016中要求范围，满足国标要求。通过对不同种类调味品中硝酸盐及亚硝酸盐进行低中高浓度加标测定，其加标回收率均在85~110%之间，使用全自动流动注射分析法测定调味品中硝酸盐、亚硝酸盐含量，不仅提高了样品分析效率，并且更加准确、简便、安全。