血浆中西地那非检测方案(液质联用仪)

LAAN-A-LM-C012 ApplicationnNo.C101News岛津SHIMADZU岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司第一版发行日：2015年3月 LC/MSLiquid Chromatography Mass Spectrometry 使用三重四极杆 LC/MS/MS 快速高灵敏度测定血浆中的药物成分 High-Speed， High-Sensitivity Analysis of Drugs in Plasma Using Triple Quadrupole LC/MS/MS (LCMS-8040) 本文向您介绍使用LC/MS/MS ESI-正离子模式，对内皮素受体拮抗剂(ERA) 波生坦 (Bosentan)、安贝生坦(Ambrisentan)磷酸二酯酶-5(PDE-5)抑制剂西地那非 (Sildenafil)、他达那非(Tadalafil)等4种成分进行快速高灵敏度分析的示例。上述成分可有效治疗肺动脉高压(Pulmonary ArterialHypertension，以下简称 PAH)。PAH 是因为由心脏输送到肺部的肺动脉末梢小动脉的内腔变窄，导致血液流动不通畅，使肺动脉压力升高，而心脏的右心房难以承受该高压的病理状态。 图1至药物成分的结构 Structures of Drugs 图22代表性色谱图(A)人血浆空白样品、 (B)添加标准品的人血浆样品(各100ng/mL) Representative MRM Chromatograms of (A) Blank Human Plasma and (B) Human Plasma Spiked Standard Solutions and Respective ISs at 100 ng/mL Each 图1为波生坦、安贝生坦、西地那非、他达那非等4种成分的结构。内标物质分别使用了波生坦-d4、安贝生坦-d3、西地那非-ds和他达那非-d3。图2为4种成分的代表性色谱图。 安贝生坦洗洗时间为1.8分钟，他达那非洗脱时间为2.5分钟，西地那非洗脱时间为3.4分钟，波生坦洗脱时间为3.9分钟。因为进行了快速分析，所以一次分析仅需要5分钟(分析条件请参考表1)。 图3从血浆萃取的药物成分代表性色谱图 Typical MRM Chromatograms of Plasma Samples 图3为从血浆萃取的药物成分代表性色谱图；图4为从血浆的萃取方法。 由图可知，使用高灵敏度 LC/MS/MS 法，可从微量血浆中萃取样品进行分析。另外，本次分析使用了固相萃取柱，操作简便。 加样血浆的萃取率分别为：安贝生坦44.3~63.9%、他达那非78.9~88.5%、西地那非83.4~88.1%、波生坦86.1~109.9%。此时的萃取率CV(%)小于17.7。 综上所述，本法分析了50pL血浆中提取的药物成分，分析时间仅用了 5min。该法分析速度快、灵敏度高，适合于血浆药物的药代动力学研究。 图44从血浆萃取的药物成分萃取方法Sample Extraction 1分析条件 Analytical Conditions 色谱柱 Cadenza CD-C18 (75 mm L.×2mm I.D.，3 um) 保护柱 Security Guard columns (Phenomenex， Torrance，CA) 流动相 乙腈：5 mmol/L 醋酸铵=45：55，v/v；使用醋酸将 pH调节到5.0 流速 0.2mL/min 柱温 40℃ 进样体积 20pL 离子源电压 4.5 kV(ESI-positive mode) 加热模块温度 400℃ MRM 离子对 Tadalafil； m/z 390.2>268.1，Tadalafil-ds； m/z 393.0>271.1 Bosentan； m/z 553.0>202.0， Bosentan-ds； m/z 557.1>202.1 Sildenafil； m/z 475.1>58.1， Sildenafil-dz； m/z 478.1>61.1 Ambrisentan； m/z 379.0>346.7， Ambrisentan-ds； m/z 382.1>346.9 参考文献1)：Y. Yokoyama et al. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 89 (2014) 227-232 本分析得到以下各位的大力协助： 静冈县立大学药学部临床药效解析学专业横山由齐博士、户祭美保女士、林秀树副教授(现岐阜药科大学) 静冈县立大学药学部生体机能分子分析学专业轰木坚一郎副教授。 本产品并未作为符合药事法的医疗器械获得批准和认证。请勿用于诊断和其他目的。 免责声明： *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 如有变动，恕不另行通知。 使用三重四极杆LC-MS/MS ESI-正离子模式，对血浆中内皮素受体拮抗剂进行快速高灵敏度分析。血浆通过固相萃取柱简单进行预处理。5分钟内可完成分离检测。该方法适用于血浆药物的药代动力学研究。