食品中维生素B1检测方案(液相色谱柱)

采用 TSKgel 色谱柱参考 GBT 5009.84-2016测定食品中维生素B1 【基本信息】 维生素B1又称硫胺素或抗神经炎维生素或抗脚气病维生素，为白色晶体，在有氧化剂存在时容易被氧化产生脱氢硫胺素，后者在有紫外光照射时呈现蓝色荧光。由嘧啶环和噻唑环通过亚甲基结合而成的一种B族维生素。为白色结晶或结晶性粉末；有微微的特臭，味苦，有引湿性，露置在空气中，易吸收水分。在碱性溶液中容易分解变质。酸碱度在3.5时可耐100℃高温，酸碱大于5时易失效。遇光和热效价下降。故应置于遮光，凉处保存，不宜久贮。在酸性溶液中很稳定，在碱性溶液中不稳定，易被氧化和受热破坏。还原性物质亚硫酸盐、二氧化硫等能使维生素B1失活。 【试剂配置】 铁氰化钾溶液(20g/L)：称取2g铁氰化钾，用水溶解并定容至100mL， 摇匀。 氢氧化钠溶液(100g/L)：称取25g氢氧化钠，用水溶解并定容至250 mL 摇匀。 碱性铁氰化钾溶液：将5 mL铁氰化钾溶液与 200 mL氢氧化钠溶液混合摇匀。 维生素B1标准储备液(500 ug/mL)：准确称取经五氧化二磷或者氯化钙干燥24小时的盐酸硫铵标准品56.1mg(精确至0.1 mg)，相当于50 mg 硫铵素，用0.01 mol/L 盐酸溶液溶解并定容至 100 mL摇匀。置于4摄氏度冰箱保存不得超过3个月。 【衍生步骤】 准确移取2.0 mL标准溶液或者样品上清液于10mL试管中，加入1.0 mL碱性铁氰化钾溶液，涡旋混匀后，准确加入 2.0 mL 正丁醇，再次涡旋混匀 1.5 min 后静置约 10 min 或者离心，待充分分层后，吸取正丁醇相经0.45 um 有机微孔滤膜过滤，取滤液于2 mL棕色进样品中，供分析用。 【色谱分析条件】 仪器：热电中高压色谱 U3000 配置荧光检测器 ( 色谱柱： ： T SKgel ODS-100V ( 4.6mmI.D×25 cm， 5 um) ) ( 流动相：0.05 mol/L 乙酸钠溶液：甲醇=65：35 ) 流速：0.8 mL/min ( 检测波长：激发波长375 nm，发射波长 435 nm ) 进样体积：20uL 检测器：荧光检测器 分析结果： min Time [min] 图1维生素B1标准溶液色谱图 No. 对照品名称 保留时间(min) 浓度(mg/L) 1 维生素B1 12.132 50.00 结论： ( 采用 TSKgel ODS-100 V (4.6mm I.D×25 cm，5 um) 可以满足 GB 5009.84-2016对食品中维生素 B1测定的要求。 ) 采用TSKgel ODS-100V（4.6mmI.D.X25cm,5µm）可以满足食品安全国家标准GB 5009.84-2016对食品中维生素B1测定的要求。