血液中毒品，安眠药，精神药物检测方案(气质联用仪)

SSL-CA14-616Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-129 岛津全球应用技术开发支持中心上海市徐汇区宜州路180号华鑫天地二期C801栋 咨询电话：021-34193996http：//www.shimadzu.com.cn 岛津ATLAS-USIS 自动前处理装置结合GCMS-TQ8050 对血液中9种毒物快速筛杳 GCMSMS-129 摘要：本文建立了一种使用样品自动前处理装置结合岛津三重四极杆气质和刑侦数据库快速筛查血液中9种毒品的分析方法。结果表明：经过 ATLAS-USIS处理的血液加标样品在较低浓度(10 ng/mL)下上机分析，仍然具有较好的峰型和响应，自动前处理设备有效的减少了血液基质对样品出峰的干扰；对 ATLAS 处理的血液加标样品重复进样6次， 10 ng/mL 和100 ng/mL 的加标样品化合物峰面积相对标准偏差 (RSD) 均小于8%，精密度良好；在基质加标水平为10 ng/mL 和100 ng/mL 的浓度下，平均回收率均在 73.48~116.96%，回收率高。本方法操作简单、方便，， 可以为血液中毒品快速筛查提供一定的参考。 关键词： ATLAS-USIS 三重四极杆气质联用仪 Smart Forensic Database 血液毒品 近年来，随着世界经济全球化及快速发展，毒品泛滥呈现日益蔓延的趋势，对社会的公共安全、医疗卫生等造成较大威胁，特别是对青少年的身心健康造成极大危害，引起各国政府的高度关注。毒品分析检测技术对此类事件的现场排查与物证提取起着至关重要的作用，可有效地打击犯罪、固定证据和维护社会治安，已成为公共安全领域的研究热点之一。 岛津 ATLAS-USIS 自动前处理装置针对尿液、血液等样品中的毒品、兴奋剂等违禁药物可自动进行液-液萃取等过程完成样品制备，复溶后可以进行液质联用分 实验部分 1.1仪器 气相色谱-三重四极杆质谱联用仪： GCMS-TQ8050 1.2分析条件 色谱柱： SH-Rxi-5 Sil MS， (30 mx0.25 mmx0.25 um) 进样口温度：280℃ 柱温程序：40℃(3 min) 25℃ /min 180℃ (1 min)10℃/min 300℃ (7.4 min) 载气控制方式：恒线速度(48.1cm/sec) 析或气质联用分析，自动化程度高，大量节省人力物力。岛津“Smart Forensic Database”刑侦毒物库包含200种常见毒品、滥用药物和精神药物及其衍生物的 MRM离子对参数，使用保留指数预测数据库中化合物的出峰时间， 可以快速创建 MRM 筛查方法应对毒品分析。 本文利用 ATLAS-USIS 结合 GCMS-TQ8050 和岛津“Smart Forensic Database”数据库建立了血液中9种毒品快速筛查的方法，该方法灵敏度高，操作简单，可以为血液中毒品筛提供一定的参考。 进样方式：不分流进样(1 min)离子源温度：200℃接口温度：300℃检测器电压：调谐电压+0.6kV采集方式：MRM( 离子对采集信息参见表1) 表1MRM参数与化合物信息 No 名称 英文名 CAS 号 定量离子对 参考离子对1 参考离子对2 1 氯胺酮 Ketamine 6740-88-1 180.0>116.1 209.0>180.1 180.0>151.1 2 利多卡因 Lidocaine 137-58-6 86.0>58.1 234.0>86.1 234.0>72.1 3 美沙酮 Methadone 76-99-3 223.0>105.1 294.00>223.1 223.0>91.1 4 异丙嗪 Promethazine 60-87-7 284.0>72.2 213.0>197.9 284.0>213.2 5 可待因 Codeine 76-57-3 299.0>162.1 229.0>214.1 299.0>214.0 6 氯丙嗪 Chlorpromazine 50-53-3 318.0>86.1 318.0>58.2 272.0>257.0 7 氯氮平 Clozapine 5786-21-0 256.0>192.1 243.0>181.1 243.0>208.0 8 艾司唑仑 Estazolam 29975-16-4 259.0>205.1 293.0>239.1 259.0>203.1 9 阿普唑仑 Alprazolam 28981-97-7 273.0>203.1 273.0>176.1 273.0>245.10 注：表中所有信息来自岛津“Smart Forensic Database”刑侦数据库 1.3样品前处理 1.3.1配置一定浓度的毒品混标，作为工作储配液。 1.3.2取精确体积1 mg/mL工作储备液，加至空白血样中，依次配制得到浓度分别为10和100 ng/mL的基质加标溶液，用 ATLAS-USIS 自动前处理装置的 MainSeq 2 程序进行前处理，将前处理得到的样品用丙酮定容至0.5mL，使定容后的基质标液浓度分别为10和100 ng/ml，然后过 0.22 um 滤膜后上机分析。(注： ATLAS-USIS 的 MainSeq 2 程序处理样品时，取3mL血样，用4mL乙酸乙酯萃取，然后取3mL 上清液进行烘干处理，最后手动用丙酮将烘干剩余物定容到0.5mL)； 结果与讨论 2.1 MRM采集方法建立 使用岛津“Smart Forensic Database”数据库中自带“AART Smart Forensic Database”方法采集 C7~C40正构烷烃标液(10 ug/mL)，然后将采集数据导入数据库建立筛查方法。 图2正构烷烃10 pg/mLSCAN谱图 MS表视图 各分的际测定范围 峰延预计时间i 图3 Smart Forensic Database数据库截图 图4 Smart Forensic Database生成MRM方法截图 2.2 MRM 谱图 经过 ATLAS-USIS 处理的血液加标 10 ng/mL 样品的 MRM 谱图如图5所示。 图5 10 ng/mL血液样品MRM谱图 2.3重复性测试 ATLAS-USIS 处理的 10 ng/mL 和100 ng/mL 的血液样品重复进样6次，峰面积 RSD% 见表3。 表22重复性测试(n=6) No 名称 英文名 峰面积RSD% 10 ng/mL 100 ng/mL 氯胺酮 Ketamine 4.88 3.30 2 利多卡因 Lidocaine 3.44 5.06 美沙酮 Methadone 6.45 2.93 4 异丙嗪 Promethazine 6.70 5.12 可待因 Codeine 7.04 6.70 6 氯丙嗪 Chlorpromazine 5.94 3.69 7 氯氮平 Clozapine 4.21 3.28 艾司唑仑 Estazolam 7.63 3.98 阿普唑仑 Alprazolam 8.00 4.00 2.4标准曲线与检出限 配置9种毒品溶剂混标考查线性，浓度分别为1、10、50、100和250 ng/mL， 以目标组分浓度为横坐标，目标组分峰面积纵坐标，绘制标准曲线，线性相关系数和检出限见表3。 图669种毒品标准曲线 表39种毒品线性相关系数和检出限 No. 化合物名称 相关系数R 检出限(ug/L) 氯胺酮 0.9999 0.05 2 利多卡因 0.9998 0.42 3 美沙酮 0.9992 0.57 4 异丙嗪 0.9995 1.09 5 可待因 0.9992 0.60 6 氯丙嗪 0.9992 0.18 7 氯氮平 0.9998 0.35 8 艾司唑仑 0.9994 0.19 9 阿普唑仑 0.9997 3.38 2.5回收率测试 对 ATLAS-USIS 处理的血液加标样品 10 ng/mL 和100 ng/mL 进行进样，并结合溶剂标样响应结果，计算加标回收率，结果见表4。 表4加标回收率结果 No. 化合物 添加浓度100 ng/mL 平均回收率 添加浓度10 ng/mL 平均回收率 R1(%) R2(%) R3(%) R(%) R1(%) R2(%) R3(%) R(%) 1 氯胺酮 83.67 83.27 86.75 84.56 73.27 79.70 79.07 77.35 2 利多卡因 115.36 119.35 115.03 116.58 118.75 118.92 112.82 116.83 3 美沙酮 94.73 94.11 95.13 94.66 85.81 81.58 85.81 84.40 4 异丙嗪 82.72 79.33 83.19 81.75 81.15 75.58 81.15 79.29 5 可待因 113.09 112.26 115.94 113.76 120.64 109.61 120.64 116.96 6 氯丙嗪 74.28 74.36 74.18 74.27 73.89 75.59 76.04 75.17 7 氯氮平 74.51 71.98 73.94 73.48 91.22 94.83 91.22 92.43 8 艾司唑仑 90.97 85.73 91.01 89.24 100.81 108.43 101.29 103.51 9 阿普唑仑 105.21 103.01 98.48 102.23 76.89 75.75 79.24 77.29 结论 经过 ATLAS-USIS 处理的血液加标样品，在10 ng/mL 的浓度下峰型、响应、重现性(RSD%<8)均较好。在基质加标水平为 10 ng/mL 和100 ng/mL 的浓度下，平均回收率均在 73.48~116.96%，回收率高。ATLAS-USIS 自动前处理设备包含萃取、移液、离心、乳化检测和浓缩功能，，可以有效减少手工处理产生的误差，提高样品萃取效率，增加实验室的生产力。岛津“Smart Forensic Database”收录了200种常见毒品、滥用药物、精神药物及其代谢物的 MRM离子对参数以及保留指数，数据库采用正构烷烃预测化合物出峰时间，从而提升检测的灵敏度。本方法操作简单、方便，灵敏度高，可以为血液中毒品快速筛查提供一定的参考。 本文建立了一种使用样品自动前处理装置结合岛津三重四极杆气质和刑侦数据库快速筛查血液中9种毒品的分析方法。结果表明：经过ATLAS-USIS处理的血液加标样品在较低浓度(10ng/ml)下上机分析，仍然具有较好的峰型和响应，自动前处理设备有效的减少了血液基质对样品出峰的干扰；对ATLAS处理的血液加标样品重复进样6次，10ng/ml和100ng/ml的加标样品化合物峰面积相对标准偏差（RSD）均小于8%，精密度良好；在基质加标水平为10ng/ml和100ng/ml的浓度下，平均回收率均在73.48~116.96%，回收率高。本方法操作简单、方便，可以为血液中毒品快速筛查提供一定的参考。