注射用氯解磷定中有关物质检测方案(液相色谱柱)

注射用氯解磷定的有关物质分析 氯解磷定注射液是有机磷中毒解毒药，对急性有机磷杀虫剂抑制的胆碱酯酶活力有不同程度的复活作用，用于解救多种有机磷酸酯类杀虫剂的中毒。 M.W.： 172.6 客户提供了注射用氯解磷定样品，希望本实验室依依客户指定色谱条件筛选合适的C18色谱柱，以实现氯解磷定注射液样品的有关物质分析，满足氯解磷定主峰同相邻杂质峰以及各杂质峰间的基线分离要求。 首先，尝试使用中等极性的普适型色谱普——(-CAPCELL PAK C18 MGII，依据客户所提供的色谱条件(流动相含十二烷基硫酸钠和二乙胺)对氯解磷定注射液样品进行分析。如图1，氯解磷定主峰保留时间为16 min， 主峰与峰前杂质D之间分离度为2.33，杂质D与杂质E之间分离度为1.64，均能得到良好分离结果。通过对相对保留时间进行计算，所得结果满足客户SOP要求。 图1 CAPCELL PAK C18 MGII 分析所得色谱图 大阪曹達集团三耀精细化工品销售(北京)有限公司 图2 CAPCELL PAK C18 MGII分析所得色谱图放大图 注：峰上标数字由下至上依次为分离度、理论塔板数与保留时间。 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 流动相： 十二烷基硫酸钠水溶液*/甲醇=90/10 流速1.0mL/min温度检测 40°C PDA260 nm 进样量： 20pL 样羊品 1 mg/mL (以水溶解稀释) *十二烷基硫酸钠水溶液： 取十二烷基硫酸钠2.8 g， 二乙胺5.6 mL， 加水溶解并稀释至1000mL， 用磷酸调节pH值至3.5。 就上述实验结果与客户沟通，客户反映希望使主峰的保留时间在20 min左右。为满足客户需求，我们在上述实验条件基础上，将柱温由初始条件的40°℃降至30℃进行分析，发现主峰保留时间为17 min左右；为进一步增强其保留，我们将色谱柱更换为极性更高的CAPCELL PAK C18 AQ色谱柱，如图3，氯解磷定主峰保留明显增强，保留时间约20 min， 主峰与峰前杂质D之间分离度为2.88，杂质D与杂质E之间分离度为2.72，能够得到良好的保留与分离结果。 图3 CAPCELL PAK C18 AQ分析所得色谱图 图4 CAPCELL PAK C18 AQ分析所得色谱图放大图 注：峰上标数字由下至上依次为分离度、理论塔板数与保留时间。 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 AQ S5； 4.6 mm i.d.×250 mm 流动相： 十二烷基硫酸钠水溶液*/甲醇=90/10 流速1.0 mL/ min温度检测 30℃ PDA 260 nm 进样量： 20 pL 样 品： 1 mg/mL(以水溶解稀释) *十二烷基硫酸钠水溶液： 取十二烷基硫酸钠2.8g， 二乙胺5.6mL， 加水溶解并稀释至1000mL， 用磷酸调节pH值至3.5. 综上实验结果，使用大曹色谱 CAPCELL PAK 系列色谱柱中的第一选择——中等极性的普适型色谱普CAPCELL PAK C18 MGII 和能在纯水条件下稳定使用的高极性色谱柱 CAPCELL PAK C18 AQ 进行分析，均能实现注射用氯解磷定的有关物质分析，并能满足氯解磷定主峰同其相邻杂质及各杂质峰间的基线分离要求，客户可根据实际需求进行选择。 三耀精细化工品销售(中国)有限公司 技术开发部 地址：北京经济技术开发区宏达南路5号 宏达利德工业园1栋418室 邮编：100176 大阪曹達集团耀精细化工品销售(北京)有限公司 氯解磷定注射液是有机磷中毒解毒药，对急性有机磷杀虫剂抑制的胆碱酯酶活力有不同程度的复活作用，用于解救多种有机磷酸酯类杀虫剂的中毒。使用大曹色谱CAPCELL PAK系列色谱柱中的第一选择——中等极性的普适型色谱柱CAPCELL PAK C18 MGII和能在纯水条件下稳定使用的高极性色谱柱CAPCELL PAK C18 AQ进行分析，均能实现注射用氯解磷定的有关物质分析，并能满足氯解磷定主峰同其相邻杂质及各杂质峰间的基线分离要求，客户可根据实际需求进行选择。