鱼肉中妥布霉素检测方案(固相萃取)

DIKMAA reliable partner for your lab 济南： 0531-83681355 鱼肉中妥布霉素的测定——SPE-UPLC-MS/MS法解决方案 参考标准《GB/T 21323-2007动物组织中氨基糖苷类药物残留量的测定高效液相色谱-质谱质谱法》 目前有关妥布霉素检测的文献和标准较少，主要参考标准《GB/T 21323-2007 动物组织中氨基糖苷类药物残留量的测定高效液相色谱-质谱质谱法》；高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)具有高灵敏度和高特异性，适用于基质复杂、样品组分含量很低的兽药残留的确证分析。 方法优势 迪马科技开发的《鱼肉中妥布霉素的检测》： (1)采用三氯乙酸水提取、ProElut PXC 固相萃取柱净化和超高效液相色谱-质谱法检测； (2)具有前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点； 同)使用氰基液相色谱柱进行分析，峰形和保留时间均符合要求；④ )过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低； (5)定量限是20 pg/kg，与国标方法-一致。 鱼肉中妥布霉素的测定——SPE-UPLC-MS/MS法 1、适用范围 本方案适用于鱼肉中妥布霉素检测。本方法定量限是 20.0 pg/kg. 2、标准品配制 )单标储备液 1000 pg/mL， 准确称取妥布霉素，用水配制成 1000 pg/mL 的储备液。 )中间液10.0 pg/mL， 吸取适量单标储备液1000 pg/mL，用水配制成 10 g/mL 的中间液。 3、提取 (1)称取样品(鱼肉)5.0g(精确至0.05g)， 置于50mL 离心管中。加入20 mL三氯乙酸水(25 g/L)和2mL二氯甲烷，涡旋分散，振荡5 min， 8000 r/min 离心 2min， 收集上清液； (2))在上清液中加入5 mL乙腈混匀，8000 r/min 离心2 min， 待净化(离心为了去除乙腈水溶解时产生的气泡)。 4、净化——ProElut PXC 60 mg/3 mL (Cat.# 68203) (1)活化： 依次加入3mL甲醇，3mL水，流出液弃去； (2)上样： 将上样液加入柱中，流出液弃去； 北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520成都：028-86612625沈阳：024-22943513石家庄：0311-66686220青岛：0532-83725230 重庆：023-62568657 (3)淋洗： 依次用5 mL 水、3mL甲醇淋洗，流出液弃去； (4)洗脱： 3mL 20%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液； (5)定容： 将洗脱液在40℃水浴下通入氮气吹至 0.2mL， 然后用流动相重新定容至0.5mL， 上机分析。同方法制备基质匹配标准溶液。 5、色谱条件 UPLC 条件： 色谱柱： Platisil CN， 150x4.6 mm， 5 pm (Cat.# 99506) 流 速：0.5mL/min 进样量：5uL 柱温：35℃ 流动相： A：3%甲酸水 B：3%甲酸乙腈 A： B=9：1 质谱条件： 电离模式：ESI 扫描方式：正离子扫描 检测方式：多反应监测 电喷雾电压：5500V 雾化气压力：60 psi 辅助气压力：60 psi 气帘气压力：20psi 离子源温度：550℃ 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对(m/z) (母离子/子离子) 定量离子对(m/z) (母离子/子离子) 碰撞气能量/eV 去簇电压/V 妥布霉素 468.2/163.1 468.4/163.2 35 70 468.4/144.8 25 468.4/205.3 30 468.2/324.1 20 6、添加回收结果 鱼肉中妥布霉素检测的添加回收结果(%) 添加水平 目标物基质 回收率(%) 添加浓度为20 ug/kg， 加标量：10 ug/mL， 加 10 pL 龙利鱼 鲫鱼 鳗鱼 妥布霉素 89.2 95.3 93.7 妥布霉素标准品0.2pg/mL 的 MRM 色谱图 鱼肉中妥布霉素的测定——-5SPE-UPLC-MS/MS法相关产品信息 货号 名称 规格 样品前处理 68203 ProElut PXC 60 mg/3 mL 50/pk 244358 12管防交叉污染真空 SPE 萃取装置 12位 4803 1，3，6 mL 柱管通用连接器 15/pk 4806 考克(控制流量) 15/pk 99011 真空/正压两用泵，无油 1/pk 99013 抽滤瓶套装 包括硅橡胶管2米，2L抽滤瓶及橡胶塞) 1/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm， 0.22 pm 100/pk 30040 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm， 0.45 pm 100/pk 色谱柱及保护柱 99506 Platisil CN 色谱柱 150×4.6 mm， 5 pm HPLC溶剂·缓冲盐·离子对试剂 50102 甲醇 HPLC及 4L 50101 乙腈 HPLC级 4L 50117 二氯甲烷 HPLC 级 4L 50144 甲酸 HPLC级 50 mL 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50孔 52401A 瓶架/白色 50 孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2mL， 100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk H80465 HPLC 进样针 25 pL 红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035火热促销中 北京：400-608-7719上海：021-61263966天津：400-633-6606广州：020-85593520成都：028-86612625沈阳：024-22943513石家庄：0311-66686220青岛：0532-83725230济南： 0531-83681355 重庆：023-62568657 方法优势    迪马科技开发的《鱼肉中妥布霉素的检测》：(1)     采用三氯乙酸水提取、ProElut PXC固相萃取柱净化和超高效液相色谱-质谱法检测；(2)     具有前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；(3)     使用氰基液相色谱柱进行分析，峰形和保留时间均符合要求；(4)     过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低；(5)     定量限是20 μg/kg，与国标方法一致。