亚硝酸盐氮中比色时间检测方案(紫外分光光度)

PerkinElmer'For the BetterPerkinElmer80 周年用户论文集 测定亚硝酸盐氮比色时间的选择 郭军、全亚男 吉林省水产科学研究院 摘要：在 ph=1.8的磷酸介质中，亚硝酸根离子与4-氨基苯磺酰胺反应生成重氮盐，再与N-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐盐联生成红色物质，在540nm测定吸光值。依据国标GB 7493-87测定水质亚硝酸盐氮的规定，在加入显色剂20分钟以后测试。为什么是20分钟以后测试呢?本文通过实验数据和理论计算，选择最佳比色时间。 关键词：测定亚硝酸盐氮、比色时间。 所用设备：紫外可见分光光度计， PerkinElmer Lambda25。 实验方法：通常环境下，将一定浓度的亚硝酸盐盐标准溶液加入显色剂，摇匀、计时，应用Lambda25 的 timedrive 软件模块，获得溶液吸光值随时间的变化曲线。如图1，溶液的吸光值随时间的增加而增加，达到最大值之后以很小的斜率随时间呈线性下降。 图1 软件设置：：波长540nm，检测时间180分钟，采集数据间隔1秒。 在测试人员实际操作时不可能精确掌握比色时间(将标准品和所有样品都在同一显色时间后测试)。因此我们根据图1计算出吸光值随时间变化而变的最小幅度时间区域。既求图1函数的一阶导数， Lambda25 软件内置这一数据处理功能，处理结果如图2，可见在2305秒时斜率等于0，之后(斜率近乎等于固定值，.9小于10A/S))。同时吸光值最大，灵敏度较高。因此认为最佳的比色时间应该是加入显色剂后2305秒左右。 图2 9Sample7a11 现在我们假设测试人员的比色时间误差是60秒，计算下在1200秒和2305秒时可能的最大比色误差分别是多少。图1使用软件的 send to excel功能，查得对应时间得吸光值如下表： 比色时间S 吸光值 相对误差(A2-A1)/A2 1140 0.44105 0.2307% 1200 0.44207 2245 0.44797 0.0535% 2305 0.44821 可见在2305秒时的最大比色误差更小。 我们的推论是建立在用 Lambda25 采集的溶液吸光值随时间变化的曲线之上，而仪器采集的数据是否可靠呢?我们用一个标准的滤光片在仪器上做同样的实验验证之。结果如图3，使用软件的 send to excel功能， 求得 RSD=0.02%。可见仪器非常稳定。 综上可见，依据国标 GB 7493-87 测定水质亚硝酸盐氮时最佳比色时间是2305秒。文中所列数据均在本单位实验室获得，如有疑问欢迎批评指正。 所用设备：紫外可见分光光度计，PerkinElmer Lambda25。实验方法：通常环境下，将一定浓度的亚硝酸盐氮标准溶液加入显色剂，摇匀、计时，应用Lambda25 的timedrive 软件模块，获得溶液吸光值随时间的变化曲线。如图1，溶液的吸光值随时间的增加而增加，达到最大值之后以很小的斜率随时间呈线性下降。图1软件设置：波长540nm，检测时间180 分钟，采集数据间隔1 秒。