苍术中β-桉叶醇检测方案(真空泵)

中国中药杂志China Journal of Chinese Materia Medica第25卷第11期2000年11月Vol.25，No.11Nov.，2000 气相色谱法测定苍术中有效成分3-桉叶醇含量的方法学研究 傅梅红，王金华，张 颖，王跃生，薛宝云， 何希容，王智民，王岚，张静修 (中国中医研究院中药研究所，北京 100700) [摘要] 目的：建立苍术药材中有效成分β-桉叶醇的含量测定方法。方法：气相色谱法，不锈钢柱3 mm×2 m，固定液15%QF-1，载体 Chromosorb WAW(80~100目)，氢火焰离子检测器，气化室温度210℃，柱温174℃，载气50 ml.min-1氮气，空气 49 kPa，氢气 58.8 kPa。结果：平均回收率为 100.7%(n=5)。结论：该法可用于苍术药材的质量控制。 [关键词]苍术；3-桉叶醇；含量测定；气相色谱法 [中图分类号]R284.1；R282.5 [文献标识码]B [文章编号]1001-5302(2000)11-0680-03 《中国药典》1995年版收载苍术为菊科植物茅苍术 Atractylodes lancea (Thunb.) DC.，或北苍术A. chinensls (DC.) Koid.的干燥根茎11。临床适用于脘腹胀满，泄泻，水肿，风湿痹痛，风寒感冒，雀目夜盲等症。为燥湿健脾，祛风散寒药。药效学研究发现3-桉叶醇为苍术健脾的有效成分之一。因此，我们对苍术中的3-桉叶醇进行了含量测定方法学的研究。 1 仪器与试药 岛津 GC-7AG气相色谱仪，氢火焰离子检测器，C-E1B数据处理器。苍术药材(市售)，经王副研究员鉴定为菊科植物茅苍术 A. lancea (Thunb.)DC.的干燥根茎。3-桉叶醇对照品为本所制备(纯度为99.8%)。所用试剂均为分析纯。 2 实验条件 2.1 色谱条件 不锈钢柱3mm×2m，固定液15%QF-1(三氯丙基甲基聚硅氧烷)，载体 Chromosorb WAW(80~100目)，氢火焰离子检测器，气化室温度210℃，柱温174℃，载气 50 ml·min-1氮气，空气 49 kPa，氢气58.8kPa。灵敏度10AUFS，衰减64，纸速2.5 mm'min-1。气相色谱图见图1. 2.2 标准曲线测定 精密称取对照品3-桉叶醇3.0 mg于2ml容量 ( [收稿日期] 2000-03-12 ) 瓶中，加乙酸乙酯定容。精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5，6 ul；4，10，14，20，24，28ul；测定，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标做图，得回归方程Y=9457.41X+14609.26，r=0.9999，在1.348~9.436ug线性关系良好；Y2=66840.8X+125642.3，r=0.9999，在5.20~31.20 pg线性关系良好。 图1 供试品的GC图谱 1.3-桉叶醇(tR=17 min) 3 含量测定 精密称取苍术粉末(过40目筛)400 mg于50ml三角瓶中，加25 ml氯仿，称重，超声波振荡5min，补足溶剂，静置片刻，过滤，吸取续滤液10 ml，40~50℃减压水浴回收至干，残渣以乙酸乙酯溶解于2ml容量瓶中为供试品溶液。精密吸取10~20ul进样(结果见图1)，外标两点法测定，结果苍术药材的含量为1.46 mg.g (n=3)。 3.3 重现性试验 对同一批样品进行测定，RSD=3.0%(n=5) 3.4 精密度试验 对同一供试液进样10 ul，测定，RSD=2.0%(n=6)。 3.5 回收率试验 精密称取苍术药粉(过40目筛)200 mg，加对照品1.600 mg，于50 ml三角瓶中，加25 ml氯仿超声振荡5 min，静置片刻，称重补足损失溶剂，过滤，吸取续滤液15ml，于40~50℃水浴回收至干，加乙酸乙酯溶于2ml 容量瓶中。测定回收率，结果见表1。 表1 回收率测定结果 样品量 加入量 测定量 回收率 RSD /mg /mg /mg /% /% 1.492 1.620 3.113 100.1 1.551 1.613 3.158 99.6 1.472 1.560 3.035 100.2 100.7 1.7 1.940 1.687 3.689 103.7 1.647 1.657 3.297 99.7 3.6 稳定性试验 供试品溶液放置 0.5，4，12 h，10 pl进样，测定 峰面积分别为832585，825967，822901(RSD=0.06%)，表明在12h内稳定。 4 讨论 4.1 我们比较了4种不同的提取方法，超声波提取法、冷浸法、温浸法、温浸加超声波提取法，结果分别为0.769%，0.579%，0.526%，0.706%。故采用超声波提取法提取。 4.2 采用超声波提取法，比较了不同提取时间(3，5，8，12，15，25，40min)，结果分别为0.666%，0.769%，0.675%，0.647%，0.632%，0.616%。以5 min 提取率最高。 4.3 采用超声波提取法，比较了3种提取溶媒(甲醇、氯仿、正己烷)，结果分别为 0.398%，0.769%，0.672%。以氯仿提取率最高。 4.4 由于β-桉叶醇气化温度较低，在供试品溶液回收溶媒时，应采用减压回收且水温应控制在40~50℃。 ( [参考文献] ) ( 中国药典.1995.136. ) ( 西川洋一.生藥0品質評口寸石研究.生藥學口口， 1975，29(2)： 1 39. ) Methodological Studies on Quantitative Determinationofβ-Eudesmol in Atractylodes lancea (Thunb.) DC. FU Mei-hong，WANG Jin-hua，ZHANG Ying，WANG Yue-sheng，XUE Bao-yun， HE Xi-rong，WANG Zhi-min，WANG Lan，ZHANG Jing-xiu (Institute of Chinese Materia Medica，China Academy of Traditional Chinese Medicine，Beijing100700，China) [Abstract] Objective： To establish methodologicaiiy a method for quantitative determination of B-eudesmolin Atractylodes lancea. Method：GC， column：3 mm×2 m； stationary phase：15% QF-1； support： ChromosorbWAW(60~80mesh)； detector： hydrogen flame ionization detector； injection chamber temperature： 210 ℃； col-umn temperature：174 ℃；carrier gas：N2：50 ml·min，，air：49 kPa，H：58.8 kPa； sensibility range：102×64；chart speed：2.5 mm'min. Result： Average recovery ratio is 100.7%(n=5).Conclusion： This method can beused to control the quality of A. lancea. [Key words]Atractylodes lancea ；3-eudesmol； determination；GC ( [责任编辑 徐美珍] ) 医生在线 医生在线