多糖中分子量检测方案(液相色谱仪)

多糖的 GPC 分析 摘要 采用GPC对多糖进行了分子量分析，得到满意的分析结果 关键词.CGPC HPLC 多糖分子量分析 糖类作为生物的能源，具有重要的作用。糖类中的多糖是指超过10个以上的单糖组成的聚合糖。多糖的生物活性与分子量密切相关，因此对其分子量的测定也尤为重要。本文以食品级和工业级的多糖为例，进行相关分子量的测定，并对检测结果进行了讨论。 仪器配置 DGU-20A3在线脱气机1台，LC-20AD 并联双柱塞泵1台， CTO-20AC 柱恒温箱1台，RID-10A 示差检测器1台，Sil-20AC 自动进样器1台，CBM-20A 系统控制器1台，LC-Solution GPC 数据处理软件， Shodex SUGAR KS-802， KS-803， KS-805(内径8mmx300mm)分析柱各一根。 实验条件 流动相：水；流量：11.0mL/min；温度：50℃；检测时间：50min 样品处理 1、样品：多糖，食品级和工业级各一个，食品级由工业级提纯而来。将其分别称量 10mg，溶解于10mL的水中，经0.45p的滤膜过滤，直接进样 2、标准品： Shodex标准品P-82，包括8种分子量，分别为788000，404000，212000，112000，47300，22800，11800，5900，各称量10mg， 溶解于10mL的水中，经0.45p的滤膜过滤，直接进样 结果与讨论 1、GPC 图谱如下所示 uV(x10，000) 图1 GPC图谱 2、标准曲线信息 R^2=0.9993 图2 标准曲线 3、样品谱图 uRIU 图3食品级多糖500uL 进样时的色谱图 图4工业业多糖100uL 进样时的色谱图 4、分子量计算结果 表1分子量计算结果 样品名称 食品级样品 重均分子量(Mw) 重均分子量(Mw) 320997 3106508 在工业级多糖的色谱图中，从 30min 以后，有一些单体流出，未将其包括在多体分子量的计算之中。 在食品级多糖的色谱图中，在 1min 前有一高峰出现，， 18min 处有一小峰出现，根据提纯工艺分析，高峰可能是在提纯过程中引入的高分子杂质，小峰可能是提纯物。分子量以小峰计算。