复方酚咖伪麻胶囊中主要成分分析检测方案(液相色谱柱)

复方酚咖伪麻胶囊的分析 客户提供了复方酚咖伪麻胶囊制剂，要求本实验室筛选合适的C18色谱柱对胶囊剂中的盐酸伪麻黄碱、咖啡因及对乙酰氨基酚进行分析。 依据客户提供方法，在210nm波长对伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液进行检测，在275 nm波长对对乙酰氨基酚供试品溶液进行检测。 (客户未提供单标，仅反馈出峰顺序依次为对乙酰氨基酚、伪麻黄碱、咖啡因，依据该出峰顺序对数据进行分析。) 首先尝试使用资生堂中等极性色谱及CAPCELL PAK C18 MGII， 分别对两种供试品溶液进行分析，如图1，在210nm检测波长下，伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液中各组分间得到了良好的分离结果；如图2，在275nm检测波长下，对乙酰氨基酚峰理论塔板数为10844，满足客户方法中不低于1500的要求。 图1盐酸伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液分析结果(MGII) *注：峰上标数字由下至上依次为分离度及理论塔板数。 图2对乙酰氨基酚供试品溶液分析结果(MGII) *注：峰上标数字为理论塔板数。 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm(柱号： A4AD 11407) 流动相：甲醇/50 mmol/L 磷酸二氢钾/三乙胺=20/80/0.02(磷酸调pH至3.2) 流速：1.0 mL/min 温度：40℃检测：PDA210nm/275 nm 进样量：10uL 样羊品：：①供试品贮备溶液：取10粒胶囊内容物于100 mL容量瓶中，加入甲醇25mL充分溶解，加水稀释 至刻度，摇匀滤过。 ②盐酸伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液：取续滤液200pL，用25%甲醇稀稀至1mL，摇匀。 ③对乙酰氨基酚供试品溶液：取续滤液40pL，用25%甲醇稀释至1mL， 摇匀。 为使客户能有更多的色谱柱选择，本实验室也尝试使用资生堂高碳载量的ODS色谱柱，按照上面的色谱条件对两供试品溶液进行分析，发现仍能够得到良好结果。在210nm检测波长下，三组分均能得到良好分离(如图3)。在275nm检测波长下，对乙酰氨基酚理论塔板数为10600，满足客户方法中不低于1500的要求(如图4)。 图3盐酸伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液分析结果(SUPERIOREXODS)*注：峰上标数字由下至上依次为分离度及理论塔板数。 图4对乙酰氨基酚供试品溶液分析结果(SUPERIOREX ODS) *注：峰上标数字为理论塔板数。 HPLC Conditions： 色谱柱： SUPERIOREX ODS； 4.6 mm i.d.×250 mm (柱号： AZAD22639) 流动相：甲醇/50mmol/L 磷酸二氢钾/三乙胺=20/80/0.02(磷酸调pH至3.2) 流速 1.0 mL/min温检 度 40°C 测： PDA210 nm / 275 nm 进样量：10pL 样 品：①供试品贮备溶液：取10粒胶囊内容物于100mL容量瓶中，加入甲醇25mL充分溶解，加水稀释至刻度，摇匀滤过 ②盐酸伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液：取续滤液200 pL，用25%甲醇稀释至1mL，摇匀。 ③对乙酰氨基酚供试品溶液：取续滤液40uL，用25%甲醇稀释至1mL，摇匀。 综上所述，使用资生堂第一选择色谱柱 CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm i.d.×250mm (柱号： A4AD 05021)色谱柱及高含碳量 SUPERIOREX ODS； 4.6 mm i.d. ×250 mm(柱号：AZAD 22639)均能对复方酚咖伪麻胶囊中对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱和咖啡因实现良好分离与保留，且能满足客户对分离度及理论塔板数的要求。 CAPCELL PAK C18 MGⅡ 使用了为 CAPCELL PAK C18 MG 开发的高纯度硅胶作为基质，同时 通过减沙硅胶微细孔的数量来增大有效比表面积，从而达到良好的分离效果。同时 ，CAPCELLPAK C18 MGⅡ采用了本公司自主研发的新包被技术 Ultimate Polymer Coating， 实现了对硅醇基极大程度的封锁。由此，一直以来难以在中性条件下使用硅胶系 ODS 柱对碱性化合物进行的分析成为了可能。当然，由于 CAPCELL PAK C18 MG ⅡI的分离能力也很优越，使其成为在色谱柱选定时全能色谱柱的第一选择。 SUPERIOREX ODS 采用孤立硅醇基少的细孔径为 10 nm 的硅胶。使用硅烷化剂二甲基十八烷基氯硅烷，极大限度地导入十八烷基后，对色谱柱进行了完全的封尾。因此，和 CAPCELL PAK系列相比保留能力更强，适合利用目标化合物的疏水性差异来进行分离。 复方酚咖伪麻胶囊的分析 客户提供了复方酚咖伪麻胶囊制剂，要求本实验室筛选合适的C18色谱柱对胶囊剂中的盐酸伪麻黄碱、咖啡因及对乙酰氨基酚进行分析。依据客户提供方法，在210 nm波长对伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液进行检测，在275 nm波长对对乙酰氨基酚供试品溶液进行检测。（客户未提供单标，仅反馈出峰顺序依次为对乙酰氨基酚、伪麻黄碱、咖啡因，依据该出峰顺序对数据进行分析。）首先尝试使用资生堂中等极性色谱柱CAPCELL PAK C18 MGII，分别对两种供试品溶液进行分析，如图1，在210 nm检测波长下，伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液中各组分间得到了良好的分离结果；如图2，在275nm检测波长下，对乙酰氨基酚峰理论塔板数为10844，满足客户方法中不低于1500的要求。图1 盐酸伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液分析结果（MGII）*注：峰上标数字由下至上依次为分离度及理论塔板数。图2 对乙酰氨基酚供试品溶液分析结果（MGII）*注：峰上标数字为理论塔板数。为使客户能有更多的色谱柱选择，本实验室也尝试使用资生堂高碳载量的ODS色谱柱，按照上面的色谱条件对两供试品溶液进行分析，发现仍能够得到良好结果。在210nm检测波长下，三组分均能得到良好分离（如图3）。在275nm检测波长下，对乙酰氨基酚理论塔板数为10600，满足客户方法中不低于1500的要求（如图4）。图3 盐酸伪麻黄碱、咖啡因供试品溶液分析结果（SUPERIOREX ODS）*注：峰上标数字由下至上依次为分离度及理论塔板数。图4 对乙酰氨基酚供试品溶液分析结果（SUPERIOREX ODS）*注：峰上标数字为理论塔板数。综上所述，使用资生堂第一选择色谱柱CAPCELL PAK C18 MGII S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm（柱号：A4AD 05021）色谱柱及高含碳量SUPERIOREX ODS; 4.6 mm i.d. × 250 mm（柱号：AZAD 22639）均能对复方酚咖伪麻胶囊中对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱和咖啡因实现良好分离与保留，且能满足客户对分离度及理论塔板数的要求。 ————————————————————————————————————————CAPCELL PAK C18 MGⅡ 使用了为CAPCELL PAK C18 MG开发的高纯度硅胶作为基质，同时，通过减少硅胶微细孔的数量来增大有效比表面积，从而达到良好的分离效果。同时，CAPCELL PAK C18 MGⅡ采用了本公司自主研发的新包被技术Ultimate Polymer Coating，实现了对硅醇基极大程度的封锁。由此，一直以来难以在中性条件下使用硅胶系ODS柱对碱性化合物进行的分析成为了可能。当然，由于CAPCELL PAK C18 MGⅡ的分离能力也很优越，使其成为在色谱柱选定时全能色谱柱的第一选择。 SUPERIOREX ODS 采用孤立硅醇基少的细孔径为10 nm的硅胶。使用硅烷化剂二甲基十八烷基氯硅烷，极大限度地导入十八烷基后，对色谱柱进行了完全的封尾。因此，和CAPCELL PAK系列相比保留能力更强，适合利用目标化合物的疏水性差异来进行分离。