庆大霉素中C 组分检测方案(液相色谱仪)

免费服务热线：88008105118ThermoFisherSCIENTIFIC400 650 5118(支持手机用户)AN_C_LC-38 HPLC-CAD 法检测庆大霉素C组分 刘兴国金燕赛默飞世尔科技(中国)有限公司 引言 氨基糖苷类抗生素的测定由于在色谱柱上保留弱，没有紫外吸收，对于其含量的测定一直是一个难点。蒸发光检测器可用于该类化合物的测定，但蒸发光线性、响应一致性和稳定性均较差，，-一直让其使用者感到较难接受。电喷雾检测器基于其自身技术特点，在动态响应和稳定性上有了很大的提高，近年来深受广大科研工作者欢迎。本文使用电喷雾检测器来测定庆大霉素注射液中的有效组分，使广大用户对该检测器的应用有个更好的认识。 测定条件 UItimate 3000 系列： 泵：DGP-3400 自动进样器： WPS-3000SL 柱温箱： TCC-3000 柱温：30℃ 检测器： Corona Ultra CAD 检测器条件： CAD：neb=25℃ Gas pressure=35.0psi； 进样量：10pL； 色谱柱： Acclaim C185 pm， 4.6×150mm (PN 059149) 流动相：100mM TFA/H20—MeOH (92：8) 流速：0.6mL/min 样品前处理 对照品溶液制备 精密称定一定量的庆大霉素对照品，加流动相溶解并定量稀释成1mg/ml的对照品溶液，精密吸取上述溶液10pL注入液相色谱仪进行测定。 供试品溶液制备 将庆大霉素注射液(2ml8万单位)用流动相稀释成相当于含庆大霉素0.8mg/ml 的供试品溶液，摇匀，0.22um滤膜滤过，精密吸取上述溶液 10pL 注入液相色谱仪进行测定。 结果和讨论 庆大霉素对照品测定谱图(1mg/ml，进样10pL) 样品测定谱图(0.8mg/ml 注射液，进样10pL) 线性关系 不取对数4个组分在(0.1mg/ml 到 2mg/ml)20 倍的动态范围内线性良好 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 样品测定结果 样品 C1a% c2% c2a% c1% (c2+c2a)% 1 25.63807 24.40509 23.85764 26.12537 48.26273 2 25.65109 24.53197 23.86917 26.16714 48.40114 该样品C组分合格，符合 C1 25%-50%， C1a 15%-40%，(c2+c2a)%20%-50%的药典规定。 结论 本实验采用 HPLC-CAD 检测器对庆大霉素有关物质即其C组分进行测定，实验精密度、重复性、线性都较好。与蒸发光测定方法比较，不取对数线性相关系数就可以达0.998，从而计算结果不用进行对数转换，大大简化了含量计算过程。对照品和供试品溶液色谱图中C2 和 C2a之间的峰为小诺霉素峰，它们三个之间的分离度大于2.0，由于该化合物为庆大霉素C组分中的次要成分所以未对其进行分析。 CAD 操作简单，设置参数少，稳定性较好，受环境影响因素少。该检测器在测定氨基糖苷类物质上具有较高推广应用的价值。   氨基糖苷类抗生素的测定由于在色谱柱上保留弱，没有紫外吸收，对于其含量的测定一直是一个难点。蒸发光检测器可用于该类化合物的测定，但蒸发光线性、响应一致性和稳定性均较差，一直让其使用者感到较难接受。电喷雾检测器基于其自身技术特点，在动态响应和稳定性上有了很大的提高，近年来深受广大科研工作者欢迎。本文使用电喷雾检测器来测定庆大霉素注射液中的有效组分，使广大用户对该检测器的应用有个更好的认识。