桔梗中桔梗皂苷D检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163中国药典2010版对应高效液相色谱图集 桔梗分析 桔梗的高效液相色谱 1.药典收载情况 【来源】本品为桔梗科植物桔梗Platycodon gradiflorum (Jacq.) A. DC.的干燥根。春、秋二季采挖，洗净，除去须根，趁鲜剥去外皮或不去外皮，干燥。 【功能与主治】宣肺，利咽，祛痰，排脓。用于咳嗽痰多，胸闷不畅，咽痛音哑，肺痈吐脓。 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(25：75)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按桔梗皂苷D峰计算应不低于3000。 对照品溶液的制备：取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，加甲醇制成每l mL含0.5 mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)约2g，精密称定，精密加入50%甲醇50 mL， 称定重量，超声处理(功率250W，频率40 kHz)30分钟， 放冷，再重定重量，用50%甲醇补足减失的重量；摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，置水浴上蒸干，残渣加水20 mL， 微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20 mL， 合并正丁醇液，用氨试液50 mL洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水50mL洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇3mL使溶解，加硅胶0.5g拌匀，置水浴上蒸干，加于硅胶柱[100~120目， 10 g， 内径为2 cm，用三氯甲烷-甲醇(9：1)混合溶液湿法装柱]上，以三氯甲烷-甲醇(9：1)混合溶液50 mL洗脱，弃去洗脱液，再用三氯甲烷-甲醇-水(60：20：3)混合溶液100mL洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲醇-水(60：29：6)混合溶液100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5mL量瓶中，加加醇至刻度，摇匀，滤过，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液5 uL、10uL，供试品溶液10~15pL，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。 本品按干燥品计算，含桔梗皂苷D(C5H92028)不得少于0.10%。 桔梗 样品来源：本品为桔梗科植物桔梗Platycodon gradiforum (Jacq.) A. DC.的干燥根。春、秋二季采挖，洗净，除去须根，趁鲜剥去外皮或不去外皮，，干燥。产地：黑龙江。 对照品：桔皂苷D(成都曼思特生物科技有限公司，批号：A0321，含量：98%)。 对照品溶液的制备：取桔梗皂苷D对照品适量，精密称定，加流动相制成每ImL含500 pg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过二号筛)2.0135 g， 精密称定，精密加入50%甲醇50 mL，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量；摇匀，滤过，精密量取续滤液25 mL，置水浴上蒸干，残渣加水20mL，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20 mL， 合并正丁醇液，用氨试液50mL洗涤，弃去氨液，再用正丁醇饱和的水50 mL洗涤，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇3 mL使溶解，加硅胶0.5g拌匀，置水浴上蒸干，加于硅胶柱[100~120目，10g， 内径为2 cm，用三氯甲烷-甲醇(9：1)混合溶液湿法装柱]上，以三氯甲烷-甲醇(9：1)混合溶液50 mL洗脱，弃去洗脱液，再用三氯甲烷-甲醇-水(60：20：3)混合溶液100mL洗脱，弃去洗脱液，继用三氯甲烷-甲 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163 醇-水(60：29：6)混合溶液100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得。 色谱柱： Shim-pack XR-ODSⅡ(3.0mm×75mm， 2.2 um) 仪器配置： 流动相：乙腈-水(28：72) UFLC-20ADXR高压泵 柱温：40℃ ELSD-LTII 蒸发光散射检测器流 速：0.9 mL/min CTO-20AC柱温箱 进样量：4pL CBM-20A 系统控制器 检测器条件：漂移管温度：40℃，氮气压力：350 KPa，增益：6，采集频率： 2.5 Hz SIL-20AC HT 自动进样器 对照品 实际样品 名称 保留时间 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 桔梗皂苷D 2.192 359325 84433 5341 1.20 桔梗皂苷D标准曲线 重复性数据如下： 桔梗皂苷D No. 对照品分析 样品分析 保留时间 峰面积 保留时间 峰面积 1 2.171 364333 2.241 183192 2 2.173 362498 2.243 181446 3 2.173 361390 2.254 180723 Average 2.172 362740 2.246 181787 RSD% 0.05 0.41 0.31 0.70 色谱柱：Shim-pack XR-ODS II(3.0mm x 75mm, 2.2um) 流动相: 乙腈-水(28:72) 柱温：40℃流速：0.9 mL/min 进样量：4 ul检测器条件：漂移管温度：40℃,氮气压力：350 KPa，增益：6 ,采集频率：2.5 Hz