头孢克肟片中有关物质检测方案(制备液相色谱)

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 头孢克肟片分析报告 AP 应用及技术服务部 摘要：本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法结合紫外检测器，按 ChP2015二部头孢克肟片项下分析方法，选择Venusil@ XBP C18(A)色谱柱对头孢克肟供试品与系统适用性溶液进行测试。结果表明：在波长为254nm， 流速为1.0 mL/min， 柱温为40℃，流动相为四丁基氢氧化铵溶液∶乙腈=72：28(v/v)时，供试品溶液与系统适用性溶液中头孢克肟与(E)异构体及相邻杂质峰分离度均大于1.5，可满足药典分离要求。 关键词：高效液相色谱法；紫外检测器；头孢克肟片； Venusil XBP C18(A) 前言 头孢克肟是第三代口服头孢菌素类抗生素，又称为氨噻肟烯头孢菌素、世伏素、世福素，临床上用于治疗由链球菌属(肠球菌除外)、肺炎链球菌、淋球菌、大肠杆菌、卡他布兰汉球菌、沙雷杆菌、枸橼酸杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯杆菌属、沙雷菌属、变形杆菌属及流感杆菌等引起的细菌感染性疾病。 表1.头孢克肟化学信息 样品名称 英文名 结构式 分子式 分子量 CAS 编号 HO =O 头孢克肟 Cefixime N H S 'OH C16H15N5O7S2 453.45 79350-37-1 S N NH2 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 高效液相色谱仪，紫外检测器； ( 地址： 天 津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s s e e r v ice@ag el a . com . cn 网址：ww w .age la. c om. c n 客服：400-606-8099 ) 试剂材料 10%四丁基氢氧化铵溶液与磷酸均为色谱纯试剂； 头孢克肟片：由某医药公司提供； 高效液相色谱柱主：： Venusil"XBP C18(A)； 5um， 120A；4.6×250mm：实验条件 色谱柱：Venusil"XBP C18(A)；5 um， 120A；4.6×250mm： 四丁基氢氧化铵溶液：取10%四丁基氢氧化铵溶液25 mL， 加水1000 mL，摇匀， 用1.5 mol/L磷酸溶液调节pH值至7.0，混匀； 流动相：：四丁基氢氧化铵溶液：乙腈=72：28(v/v)； 波 长：254nm： 流速：1.0 mL/min： 进样量：20 uL； 温 度：40℃； 样品制备 取头孢克肟片1片，研细，置100mL容量瓶中，加水50 mL超声溶解并稀释至刻度，制成每1.0 mL中含头包克肟1.0 mg的溶液，摇匀，经0.45 p.m微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。 取头孢克肟片1片，研细，置100 mL容量瓶中，加磷酸盐缓冲液(pH7.0)超声溶解并稀释至刻度，制成每1mL中含头孢克肟lmg的溶液，于沸水浴上加热45分钟，冷却，摇匀，经0.45 um微孔滤膜过滤，取续滤夜作为系统适用性溶液。 结果与讨论 本实验选择VenusilXBP C18(A)色谱柱按 ChP2015二部头孢克肟片项下分析方法对头孢克肟供试品及系统适用性溶液进行测试，由表2及下图可知，供试品溶液与系统适用性溶液中头孢克肟与(E)异构体及相邻杂质峰可实现有效分离。 实验数据 表2.头孢克肟片相关样品溶液实验数据 样品名称 序号 保留时间/min 理论塔板数 拖尾因子 分离度 备注 系统适用性溶液 1 15.809 18456 1.70 图1 2 17.325 13704 2.20 2.86 ( 地址： 天 津经济开发区西区南大街179号 邮编：300462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s s e e rvice@agela . com.cn 网址： w w w. ag ela . com . cn 客服：400-606-8099 ) 供试品溶液 1 15.905 26243 1.07 2 18.894 6704 3.94 1.62 图2 3 20.040 8899 1.07 3.74 图1.Venusil@XBP C18(A)色谱柱用于头孢克肟系统适用性溶液高效液相色谱图 图2.Venusil@XBP C18(A)色谱柱用于头孢克肟片供试品溶液高效液相色谱图(纵坐标局部放大) 结论 根据实验结果，选择 Venusil XBP C18(A)色谱柱按 ChP2015二部头孢克肟片项下分析方法对头孢克肟供试品及系统适用性溶液进行测试，供试品溶液与系统适用性溶液中头孢克肟与(E)异构体及相邻杂质峰分离度均大于1.5，可满足药典分离要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 VenusilXBP C18(A) 5 um， 120A； 4.6×250 mm； 1支 VX952505-A 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处 100/PK 1109-0519 ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： s s e e rvice@agela . com.cn 网址： w w w.a g ela . com.cn 客服：400-606-8099 ) 32×11.6mm 1.5 mL样品瓶盖 9 mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE 隔垫 45°Shore A； 1.0 mm 100/PK 0915-1819 微孔滤膜 单膜， 13 mm， 0.45 um 100个/包 AS021345-T 一次性注射器 2mL无针头 100支/包 LZSQ-2ML 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：话： 传真：mail： seservice@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服：