杜仲中松脂醇二葡萄糖苷检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技尽在北京在朋-企业QQ.40061 6516350 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 杜仲分析 杜仲的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为杜仲科植物科仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮。4~6月剥取，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，晒干。 【功能与主治】补肝肾，强筋骨，安胎。用于肝肾不足，腰膝酸痛，筋骨无力，头晕目眩，妊娠漏血，胎动不安。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(25：75)为流动相；检测波长为277nm。理论板数按松脂醇二葡萄糖苷峰计算应不低于1000。 对照品溶液的制备：精密称取松脂醇二葡萄糖苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，摇匀，即得。 供试品溶液的制备：取本品约3g，剪成碎片，揉成絮状，取2g，精密称定，置索氏提取器中，加入三氯甲烷适量，加热回流6小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，再置索氏提取器中，加入甲醇适量，加热回流6小时，提取液回收甲醇至适量， 转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取取照品溶液与供试品溶液各10uL，注入液相色谱仪，测定，即得。 杜仲高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中杜仲的含量测定以松脂醇二葡萄糖苷为质量评价依据，松脂醇二葡萄糖苷在InertsilODS-4中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对松脂醇二葡萄糖苷与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，甲醇比例越低分离度越高，考虑到分析效率，选择甲醇比例在20~30%(v/v)， 柱温40℃以下时随着柱温的升高分离度越高，但40℃以上柱温对松脂醇而葡萄糖与相邻色谱峰的分离基本无影响。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(20：80)，柱温45℃。 杜仲 样品来源：本品为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮。产地：广西。 对照品：松脂醇二葡萄糖苷(含量：99.2729%) 供试品溶液的制备：取本品约3g，剪成碎片，揉成絮状，取2g，精密称定，置索氏提取器中，加入三氯甲烷适量，加热回流6小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，再置索氏提取器中，加入甲醇适量，加热回流6小时，提取液回收甲醇至适量，转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密称取松脂醇二葡萄糖苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.3mg的溶液，摇匀，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-4(4.6x150mm，5pm)流动相：甲醇-水(20：80) 柱温：45℃ 检测波长：277nm 流 速：1mL/min 进样量：5pL ※该条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6×150mm，5um)。 2010版中国药典电子书(三部齐全，pdf高清版，可复制) 引领分析科技在北京谱朋业QQ：40061 65163杜仲 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150mm， 5um) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-水(20~30：80~70) DGU-20A3脱气机 柱主温：40~55℃ SPD-M20A二极管列紫外可见光检测器 检测波长：277nm CTO-20AC柱温箱 流 速： 1.0mL/min CBM-20A 系统控制器 SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 松脂醇二葡萄糖苷 20.46 781080 8522 2234 1.08 松脂醇二葡萄糖苷标准曲线 重现性数据如下 No. 标准样品保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 2 3 20.46 78108020.46 781028 20.45 777343 20.46 781080 20.46 78012820.45 777343 AverageRSD% 20.46 779817 20.46 779517 0.02 0.33 0.02 0.24 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil 0DS4(4.6x 150mm, 5um)流动相：甲醇-水(20:80)柱温：45°C检测波长：277nm流速：1ml/min进样置：5 uL※该条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6 x 150mm, 5um)