穿心莲中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技在北京谱朋企业QQ：40061665163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 穿心莲分析 穿心莲的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为爵床科植物穿心莲 Andrographis paniculata (Burm. f.)Nees的干燥地上部分。秋初茎叶茂盛时采割，晒干。 【功能与主治】清热解毒，凉血，消肿。用于感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泄泻痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，蛇虫咬伤。 【含量测定】色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水(52：48)为流动相，穿心莲内酯检测波长为225nm， 脱水穿心莲内酯检测波长为254nm。理论板数按穿心松内酯和脱水穿心莲内酯峰计算均应不低于2000。 对照品溶液的制备：精密称取穿心莲内脂对照品、脱水穿心莲内脂对照品适量，加甲醇制成每1mL各含0.1mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约0.5g，精密称定，精密加入40%甲醇25mL，称定重量，浸泡1小时，超声处理(功率25W，频率33kHz)30分钟，用40%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10mL，置中性氧化铝柱(200~300目，5g，内径1.5cm)上，用甲醇15mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试共溶液溶5uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。 穿心莲药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中穿心莲的含量测定以穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯为质量评价依据，穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，与穿心莲内酯相邻色谱峰较多，为了达到较理想的分离度，同时考虑到分析效率，选择甲醇比例在50~55%(v/v)，柱温对穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯与相邻色谱峰的分离，影响较小，但较高的柱温可以缩短分析时间。采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(53：47)，柱温40℃。经考察，在此优化条件下，采用Inertsil ODS-4也能够对穿心莲进行分析。 穿心莲 样品来源：本品为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata (Burm. f.)Nees的干燥地上部分。产地：广东。 对照品：穿心莲内酯(含量：98.879%) 脱水穿心莲内酯(含量：99.60%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过四号筛)约0.5g，精密称定，精密加入40%甲醇25mL，称定重量，浸泡1小时，超声处理(功率25W，频率33kHz)30分钟，用40%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10mL，置中性氧化铝柱(200~300目，5g，内径1.5cm)上，用甲醇15mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制) 引领分析科技在北京京谱QQ.40061665163 穿心莲 对照品溶液的制备：精密称取穿心莲内酯和脱水穿心穿内酯对照品适量，加甲醇制成每1mL含30ug的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150mm，5um)流动相：甲醇-水(53：47) 柱温：40℃检测波长：穿心莲内酯225nm；脱水穿心莲内酯254nm 流速： 1mL/min 进样量： 10uL ※该条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6×150mm，5um)。 推荐使用条件范围：色谱柱： Intersil ODS-4(4.6×150mm， 5um) 流动相：甲醇-水(60~80：40~20) 柱 温：35~60℃检测波长：300mm流 速： 1.0mL/min 仪器器置： LC-20ADXR高压泵泵 DGU-20A3气气机 SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 CTO-20AC柱温箱CBM-20A 系统控制器SIL-20AC 自动进样器 名称 保留时间(min) 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 穿心莲内酯 6.646 339618 21947 4151.134 1.096 脱水穿心莲内酯 19.717 107263 3062 7499.848 1.048 峰面积 穿心莲内酯标准曲线 样 品 重现性数据如下 脱水穿心莲内酯 峰面积 107263 107889 107406 107519 45000004000000 Y =(2.37715e+006)X 穿心莲内酯No.3500000 R2=0.9999 保留时间 峰面积 保留时间30000001 6.646 339618 19.71726000002000000 2 6.654 342679 19.7261E59 3 6.658 344809 19.7501000t001000500000 Average 6.653 342368 19.731浓度mg/LRSD%90.5 0.76 0.0 0.09 0.31 1.0脱水穿心莲内酯标准曲线 标准品穿心莲内酯 脱水穿心莲内酯3500000 No.3000000 Y=(2.12043e+006)X 保留时间 峰面积 保留时间R2-0.999925000001 6.622 4390243 19.6542000D0Q- 2 6.632 4391659 19.6721500000 3 6.623 4379814 19.6651000000- Average 6.623 4387238 19.664500000 RSD% 0.08 0.15 0.05浓度mg/L8560 0.25 0.50 0.75 1.001.251.50 峰面积 3731734 3720725 3718157 3723539 0.19 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6 x 150mm, 5um )流动相：甲醇- 水(53:47)柱温：40℃检测波长：穿心莲内酯225nm;脱水穿心莲内酯254 nm流速：1mL/min进样量：10uL※该条件同样适用于Inertsil ODS-3(4.6 x 150mm, 5um) 。