粉葛中葛根素检测方案(液相色谱柱)

2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制)引领分析科技在北京谱京谱QQ.40061L6 65163 中国药典2010版对应高效液相色谱图集 粉葛分析 粉葛的高效液相色谱 《中国药典》收载情况 【来源】本品为豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的干燥根。秋、冬二季采挖，除去外皮，稍干，截段或再纵切两半或斜切成厚片，干燥。 【功能与主治】解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。用于外感发热头痛，项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，眩晕头痛，中风偏瘫，胸痹心痛，酒毒伤中。 【含量测定】色色条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水(25：75)为流动相，检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于4000。 对照品溶液的制备：精密称取葛根素对照品10mg， 置25mL量瓶中，加30%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2mL， 置10mL量瓶中，加30%乙醇至刻度，摇匀，即得(每1mL中含葛根素80pg)。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.8g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入30%乙醇50mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10uL， 注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含葛根素(C21H20O9)不得低于0.30%。 粉葛药材高效液相色谱方法的建立 【色谱行为描述】《中国药典》中粉葛的含量测定以葛根素为质量评价依据，葛根素在Inertsil ODS-3中的色谱特点为：在流动相组成为甲醇-水系统时，流动相的比例对葛根素与相邻色谱峰的分离具有显著的影响，流动相甲醇的比例愈低，其分离度愈好，选择甲醇比例在20~30%(v/v)之间均可以获得满意的分离度，考虑到分析时间长短，采用上述色谱柱，优化流动相比例为甲醇-水(22：78)；柱温对葛根素与相邻色谱峰的分离基本无影响，故在室温下使用即可。 粉葛 样品来源：豆科植物甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的干燥根。产地：广西。 对照品：葛根素(含量：99.853%) 供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)0.8g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入30%乙醇50mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用30%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 对照品溶液的制备：精密精取葛根素对照品适量， 加30%乙醇制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。 色谱柱： Inertsil ODS-3(4.6×150mm，5um)流动相：甲醇-水(22：78) 柱温：35℃ 检测波长：250nm 流速：1mL/min 进样量：10uL ※该条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6x150mm，5pm)。 2010版中国药典电子书(三部齐全， pdf高清版，可复制) 引领分析科技在北京京谱QQ.40061L665163 粉葛 推荐使用条件范围： 仪器配置： 色谱柱： Intersil ODS-3(4.6×150mm， 5 um) LC-20ADXR高压泵 流动相：甲醇-水(20~30：80~70) SPD-M20A二极管阵列紫外可见光检测器 柱 温：40~55℃ CTO-20AC柱温箱 检测波长：250nm CBM-20A 系统控制器 流 速：1.0mL/min SIL-20AC 自动进样器 标准样品 实际样品 保留时间 名称 面积 高度 理论塔板 拖尾因子 25.17 葛根素 3322370 72589 6419 1.04 葛根素标准曲线 重现性数据如下 No. 标准样品 保留时间 峰面积 实际样品 保留时间 峰面积 1 23 25.39 436625525.40 449336425.43 4856882 26.04 79180324.34 84659923.61 841957 AverageRSD% 25.41 4572167 24.67 826786 5.04 3.68 0.078 5.56 *本数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供 色谱柱：Inertsil ODS-3(4.6x 150mm, 5um)流动相：甲醇-水(22:78)柱温：35℃检测波长：250nm流速：1mL/min进样量：10ul※该条件同样适用于Inertsil ODS-4(4.6 x 150mm, 5um)