尿液中有机酸检测方案(气质联用仪)

尿中有机酸的GC-MS 分析 1实验部分 1.1仪器与设备 GC-MS3100 型气质联用仪、分析天平、涡旋混合器、离心机、氮吹仪、烘箱、冰箱移液枪、PH试纸、容量瓶、具塞玻璃试管等 1.2样品处理 取约20mL 尿样50mL塑料离心试管中，于冰箱中冷藏1h，然后放置于离心机中以4000r/min 离心 10min， 然后取上层澄清尿样2mL于10mL的玻璃具塞试管中，加入1mL55%盐酸羟胺水溶液，涡旋混匀，室温下进行肟化反应1h；肟化反应完成后加入浓盐酸调节 PH值为1，加入氯化钠使水层饱和(约1g)，然后用6mL乙酸乙酯涡旋提取两次，将两次的提取液合并于同一玻璃具塞试管中(共准确移取出5mL)， 然后于氮吹仪中60℃慢慢吹干，吹干后加入 200uL衍生化试剂(BSTFA+TMCS 99：1 )，涡旋混合，然后放置于烘箱中于80℃衍生化反应 30min，反应完成后将其转移至2mL小样品瓶中，然后取 1uL 进 GC-MS分析。 1.3分析条件 1.3.1 分析条件 色谱条件：Equity-5( 30m×0.25mm×0.25um)石英毛细管柱，柱前压60KPa，分流进样，分流比：20：1，进样量：1uL，汽化室：260℃，柱温：80℃保持1min，然后以5℃/min 升至270℃，保持5min。 质谱条件：EI源，电子能量70eV， 离子源200℃，接口280℃，扫描方式：全扫描定性，扫描范围：50u~550u，溶剂峰时间：4min，电子倍增器高压：1100V。 EWAI 图1成人尿样中有机酸全扫描总离子流图 图2五种有机酸混标硅烷化衍生物全扫描总离子流图 -- -