疫苗中蛋白质含量检测方案(定氮仪)

Mlanon海能能仪器民族仪器 品质典范 海能仪器：疫苗中蛋白质含量的测定(凯氏定氮法) 前言 现在市面上的疫苗主要分为两种：灭活病毒和抗体。而灭活的病毒主要成分为蛋白质和核酸。而蛋白质含量是药典中规定其性质的重要参数之一。 2实验部分 2.1原理 根据《中国药典2015版》中的规定进行测定疫苗中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下，转化为氨态氮。加碱蒸馏后，用硼酸吸收后，再以硫酸标准滴定液进行滴定。 2.22仪器与试剂、器具 2.2.1 K1100F 全自动凯氏定氮仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.2 SH420F 石墨消解仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.3 硫酸分析纯， c(HCL)=0.1mol/L，标准滴定液。 2.2.4 硼酸 分析纯，质量分数2%。 2.2.5氢氧化钠分析纯，质量分数40%。 2.2.65溴甲酚绿-甲基红混合指示剂将溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(1g/L)按5：1体积比临时混合摇匀备用。 2.2.7催化剂片3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片 2.2.8 50ml量筒 2.2.9称量瓶 2.3 实验部分 2.3.1取样：精确量取2ml羊品放入消化管中，并用纯水冲洗消化管壁，，防止残留，加催化剂片(或者3g硫酸钾、0.2g硫酸铜)，加入8ml浓硫酸。 2.3.2消解：：利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，，设置参数如下： 温度 时长 1 200℃ 20min 2 420℃ 60min 2.3.33待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下： 稀释水：：30ml 硼酸：25ml 碱：12ml 蒸馏时间：5min 2.3.4仪器自动滴定并给出计算结果。 3结果与讨论 氮含量 蛋白质含量 P%=N%*6.25 式中：M-标准酸摩尔浓度(mol/L) W-样品质量(g) V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL) V-样品滴定标准酸消耗量(mL)，精确到小数点后四位 -- --