骨胶原肽中蛋白质含量检测方案(定氮仪)

Manon海能仪 器民族仪器 品质典范 海能仪器：骨胶原肽中蛋白质含量的测定(凯氏定氮法) 1前言 鲜骨含有人体需要的多种营养物质，但不易直接食用，利用酶法将骨胶原蛋白水解成骨胶原多肽，有利于人体消化吸收。 2 实验部分 2.1原理 骨胶原肽中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下，转化为氨态氮。加碱蒸馏后，用硼酸吸收后，再以硫酸标准滴定液进行滴定。 2.2仪器与试剂、器具 2.2.1K1100F 全自动凯氏定仪仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.2SH420F 石墨消解仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.3硫酸分析纯，c(HCL)=0.1mol/L，标准滴定液。 2.2.4硼酸分析纯，质量分数2%。 2.2.55氢氧化钠分析纯，质量分数40%。 2.2.6溴甲酚绿-甲基红混合指示剂将溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(1g/L)按5+1体积比临时混合摇匀备用。 2.2.7催化剂片3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片 2.2.8310ml移液管 2.2.9称量瓶 2.3实验部分 2.3.1取样：取0.2g左右的样品，称量纸包好一并投入消化管中，加一片催化剂片(或者3g硫酸钾、0.2g硫酸铜)，，加入10ml浓硫酸。 2.3.2消解：利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，，设置参数如下： 温度 时长 1 240度 15min 2 420度 60min 2.3.3待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下： 硼酸： 35ml 碱：40ml 蒸馏时间：：5min 2.3.4仪器自动滴定并给出计算结果。 氮含量蛋白质含量 P%=N(%)×6.25 式中：：M-标准酸摩尔浓度(mol/L) W-样品质量(g) V0-空白样滴定标准酸消耗量(mL) V-样品滴定标准酸消耗量(mL)，精确到小数点后四位 3结果与讨论 骨胶原肽 编号 质量 体积 氮含量 蛋白质含量 平均 1 0.2030g 23.694ml 16.936% 98.059% 98.2427% 2 0.2006g 23.543ml 17.028% 98.597% 3 0.2028g 23.674ml 16.938% 98.072% 骨胶原肽在消解过程中比较容易消解，，但仍要注意上冲的现象产生。 -- --