豆制品及蛋制品中蛋白质含量检测方案(定氮仪)

Manon海能仪器民族仪器 品质典范 海能仪器：大豆肽中蛋白质含量的检测(凯氏定氮法测定) 1前言 大豆肽粉是一种由2-6个氨基酸组成的、分子量在200-800 Dalton的混合肽产品。与原蛋白相比，大豆肽粉具有很好的水溶性、持水性、起泡性，能在pH2-10的任何酸碱条件下完全溶解。大豆肽粉能与其它食品配料完全溶合，并保持各自原有的物化及营养特性。与原蛋白和同组成的氨基酸制剂相比，大豆肽粉更易被人体吸收，，它可不经胃肠消化，直接进入小肠被吸收，而且不受身体状况所影响。 大豆肽的分级标准中，粗蛋白含量作为其中一个重要的指标。因此测定大豆肽的蛋白质含量具有重要意义。 2实验部分 2.1原理 根据国标《GB/T22492-2008大豆肽粉》中大豆肽粉在浓硫酸和催化剂的共同作用下，由有机态的氮转化为氨态氮。加碱蒸馏后，用硼酸吸收后，再以硫酸标准滴定液进行滴定。 2.2仪器与试剂、器具 2.2.1K1100F全自动凯氏定氮仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.2SH420F 石墨消解仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.3硫酸分析纯，c(HCL)=0.1mol/L，标准滴定液。 2.2.4硼酸分析纯，质量分数2%。 2.2.5氢氧化钠分析纯，质量分数40%。 2.2.6溴甲酚绿-甲基红混合指示剂将溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(1g/L)按5+1体积比临时混合摇匀备用。 2.2.7催化剂片3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片 2.2.8S：50ml量筒 2.2.9称量瓶 2.3实验部分 2.3.1取样：取0.5g左右的样品，称量纸包好一并投入消化管中，加一片催化剂片(或者3g硫酸钾、0.2g硫酸铜)，加入10ml浓硫酸。 2.3.2消解：利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用直线升温模式，逐渐升温至420度，消解1小时。 2.3.3待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下： 硼酸： 35ml ：40ml 蒸馏时间：：5min 2.3.4仪器自动滴定并给出计算结果。 氮含量 蛋白质含量 P%=N(%)×6.25 式中：：M-标准酸摩尔浓度(mol/L) W-样品质量(g) VO-空白样滴定标准酸消耗量(mL) V-样品滴定标准酸消耗量(mL).)，，精确到小数点后四位 3结果与讨论 大豆肽中蛋白质含量作为一个重要的分标准： 项目 质量指标 一级 二级 三级 粗蛋白质(以干基计，NX6.25)/% ≥90.0 ≥85.0 ≥80.0 -- --