化学药品中位置异构体分离检测方案(液相色谱柱)

May.20，2016LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31， BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801，FAX 010-6785-6882样品： 0.5mg/mL 1号样品， 0.1mg/mL 2号样品，1：1混合。样品溶剂为 MeOH 位置异构体分离 分别使用资生堂 CAPCELL CORE PFP 和 CAPCELL PAK ADME对以下位置异构体进行分离。柱型分别选用内径2.0mm 和4.6mm两种，有机溶剂分别使用甲醇和乙腈进行分析，结果如图1-4所示。 图1 PFP 2.1mmI.D.色谱柱甲醇体系分析图谱 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL CORE PFP S2.7； 2.1mm i.d.×100mm 流动相： 40%MeOH 流200匹L/ min温 检 35°C UV 254nm 进样量： lpL 图2 PFP 4.6mmI.D.色谱柱甲醇体系分析图谱 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL CORE PFP S2.7； 4.6mm i. d. ×100mm 流动相： 40%MeOH 流750L/ min 温 检 35°C UV 210nm 进样量： 5 pL 样占： 0.5mg/mL 1号样品， 0.1mg/mL2号样品，1：1混合。样品溶剂为 MeOH 图3 PFP 4. 6mmI.D.色谱柱乙腈体系分析图谱 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL CORE PFP S2. 7； 4.6mm i.d.×100mm 流动相： 25%CH3CN 流速1000 L/min温度检测 35°C UV 210nm 进样量： 2mL 样 品： 0.5mg/mL 1号样品， 0.1mg/mL 2号样品，1：1混合。样品溶剂为 MeOH 图4ADME 4.6mmI.D. 色谱柱乙腈体系分析图谱 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK ADME S5； 4.6mm i.d.×250 mm 流动相： 40% CH3CN 流1000 pL / min 温 检 35°C UV 210nm 进样量： 2pL 样品： 0.5mg/mL 1号样品， 0.1mg/mL 2号样品，1：1混合。样品溶剂为 MeOH 使用对位置异构体具有良好拆分能力，键合了五氟苯基官能团的 PFP 色谱柱，对位置异构体进行分析，实现了样品1和2的良好分离。结果分别如图1-3所示，分离度见色谱峰上标。 对于内径4.6mm 的 PFP柱，由于其填料为 2.7um核壳型颗粒，在甲醇水体系下系统压力偏高，故将流速降低为750 mL /min， 使得系统整体压力(包括柱压)降低至20MPa， 并且也得到了样品1和2的良好分离。 进一步，使用对极性和疏水性物质均有良好保留能力，对异构体有分离能力的 ADME 色谱柱进行分析，结果如图4所示，样品1和2在14min 内就得到了基线分离。并且压力仅为 7.75MPa。 综上所述，作为常规 C18 柱候补的第二选择反相柱 ADME， 对此异构体具有良好拆分能力，并且柱压低，具有广泛的系统适用性，建议使用 CAPCELL PAK ADME 柱进行该分析。 郭彦丽