盐酸乐卡地平中异构体检测方案(液相色谱配件)

盐酸乐卡地平及其异构体的拆分 盐酸乐卡地平 Lercanidipine hydrochloride MW： 648.19 我们对客户提供的间硝基乐卡地平(主成分)及其两种异构体杂质——对硝基乐卡地平和邻硝基乐卡地平进行了拆分尝试。由于乐卡地平自身疏水性较强，需在较高有机相条件下才能得到良好洗脱，因此缓冲盐选择了在高有机相中也能良好溶解的高氯酸钠体系。 首先，使用两款 C18色谱柱进行分离尝试。结果如图1所示，小浓度进样时，间硝基乐卡地平与对硝基乐卡地平分离度为1.67，但大浓度进样时分离度仅有1.01，分离效果不佳。进一步使用表面极性高、柱效也更高的 C18 AQ S3 色谱柱进行分离，大浓度进样时同样未得到良好拆分结果，分离度为0.90。 E 图1 CAPCELL PAK C18 MGII分析结果 HPLC Conditions 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 度：40C 流动相： A：200 mmol/L 高氯酸钠溶液(高氯酸调 pH 值至2.1) B：乙腈 A/B=45/55流速：1.0 mL/ min温检浓 测： PDA 240nm 度：供供品(大浓度)：间硝基乐卡地平1mg/mL， 对硝基乐卡地平 0.01mg/mL 对照品(小浓度)：邻硝基乐卡地平 0.2 mg/mL，邻硝基乐卡地平 0.02 mg/mL， 对硝基乐卡地平 0.08 mg/mL 进样量： 10pL 同样在高氯酸钠流动相体系下，尝试使用对异构体有良好拆分能力的键合五氟苯基色谱柱 CAPCELLPAK PFP 进行拆分尝与。与C18色谱柱结果相比较，间位与对位的出峰顺序发生了翻转，对比结果如图2所示。 图2 C18 AQ、C18 MGII 与 PFP 色谱柱分析结果对比 同时，大浓度进样分析结果如图3所示，间位与对位的分离度为2.64，得到了良好分离。 图 3 CAPCELL PAK PFP 色谱柱分析结果 HPLC Conditions 色谱柱： CAPCELL PAK PFP S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 流动相： A：200 mmol/L 高氯酸钠溶液(高氯酸调 pH 值至2.1) B：乙腈 A/B=45/55 流流速：1.0mL/min温检浓 度：40℃ 测： PDA 240 nm 度：供供品(大浓度)：间硝基乐卡地平1 mg/mL， 对硝基乐卡地平 0.01 mg/mL对照品(单标)： 邻硝基乐卡地平0.5 mg/mL，邻硝基乐卡地平 0.2 mg/mL，对硝基乐卡地平 0.2 mg/mL 进样量： 10pL 综上所述，使用 CAPCELL PAK PFP S5； 4.6 mm i.d. ×250 mm 色谱柱可完成乐卡地平邻间对异构体之间的良好拆分，最终分离度达到2.0以上。 盐酸乐卡地平及其异构体的拆分盐酸乐卡地平Lercanidipine hydrochlorideMW：648.19我们对客户提供的间硝基乐卡地平（主成分）及其两种异构体杂质——对硝基乐卡地平和邻硝基乐卡地平进行了拆分尝试。由于乐卡地平自身疏水性较强，需在较高有机相条件下才能得到良好洗脱，因此缓冲盐选择了在高有机相中也能良好溶解的高氯酸钠体系。首先，使用两款C18色谱柱进行分离尝试。结果如图1所示，小浓度进样时，间硝基乐卡地平与对硝基乐卡地平分离度为1.67，但大浓度进样时分离度仅有1.01，分离效果不佳。进一步使用表面极性高、柱效也更高的C18 AQ S3色谱柱进行分离，大浓度进样时同样未得到良好拆分结果，分离度为0.90。图1 CAPCELL PAK C18 MGII分析结果同样在高氯酸钠流动相体系下，尝试使用对异构体有良好拆分能力的键合五氟苯基色谱柱CAPCELL PAK PFP进行拆分尝试。与C18色谱柱结果相比较，间位与对位的出峰顺序发生了翻转，对比结果如图2所示。图2 CAPCELL PAK C18 AQ、C18 MGII与PFP色谱柱分析结果对比同时，大浓度进样分析结果如图3所示，间位与对位的分离度为2.64，得到了良好分离。图3 CAPCELL PAK PFP色谱柱分析结果综上所述，使用CAPCELL PAK PFP S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm色谱柱可完成乐卡地平邻间对异构体之间的良好拆分，最终分离度达到2.0以上。