畜牧生产和兽医临床上使用的兽药按照用途分类,主要有抗微生物药(抗生素、抗菌药和抗病毒药)、抗寄生虫药(抗蠕虫药、抗原虫药、杀虫药)、激素类及生长促进剂等,这些物质都有可能在动物源中产生残留。
动物源食品中50种激素残留分析 兽药因其在降低发病率与死亡率、促生长、提高饲料利用率和改善产品品质方面有显著的效果,已成为养殖业不可缺少的物质基础。动物性食品中兽药残留是近几年来国际社会研究的热点问题之一,而且越来越受到人们的重视。兽药残留指给动物使用药物后蓄积或贮存在细胞、组织或器官内的药物原形、代谢产物和药物杂质。在畜牧业生产中广泛使用的亚治疗剂量药物、使用违禁药物、不遵 守停药期、动物个体代谢差异和不合理用药是导致兽药残留超标的主要原因。 畜牧生产和兽医临床上使用的兽药按照用途分类,主要有抗微生物药(抗生素、抗菌药和抗病毒药)、抗寄生虫药(抗蠕虫药、抗原虫药、杀虫药)、激素类及生长促进剂等,这些物质都有可能在动物源中产生残留。 在畜牧业中,激素常作为饲料添加剂或埋植于动物皮下,达到促进动物生长发育(促生长幅度可以提高10%-40%),增加体重,促进动物发情等目的,结果导致动物食品中的激素残留。常见的激素包括: (1)性激素 包括雌性激素(如:雌二醇、己烯雌酚、己烷雌酚、甲基孕酮、雌烯酮等)和雄性激素(如:甲基睾丸酮、丙酸睾酮、氯睾酮)。 (2)生长激素 是由动物脑垂体分泌的天然蛋白质激素,主要通过促进蛋白质合成和脂肪分解来促进动物生长,增加瘦肉率,提高饲料转化率。目前在畜牧业生产中使用的主要有牛生长激素和猪生长激素。 (3)甲状腺素,类甲状腺素及抗甲状腺素。 (4)人工合成的蛋白质同化激素 人工合成的蛋白质同化激素可促进动物脑下垂体生长激素的分泌。经常使用的合成激素是类固醇药物(如:雌二醇、睾丸激素、孕酮)。 (5)镇静剂和β-肾上腺素阻断剂 为了控制被运输及待宰动物的紧张,如:利血平;克伦特罗等β-受体激动剂可以使动物组织发生重新分布,特别是精瘦肉增加和脂肪减少。 兽药残留对人类的危害作用,一般来说,并不表现为极性作用。倘若人体经常摄入低剂量的同样残留物,在经过一定时间后,则可由于残留物在体内的逐渐蓄积而导致各种器官病变,甚至癌变。某些过敏体质的个体,对某些药物的敏感性比一般个体高,即使接触的残留量甚低,也可能引起变态反应。动物性食品中的兽药残留对人体健康的影响,主要变现为变态反应、过敏反应、细菌耐药性、致畸作用、致突变作用和致癌作用,以及激素(样)作用等多方面。 本方法主要适用于猪肉、猪肝、鸡蛋、牛奶、牛肉、鸡肉和虾等动物源食品中的50种激素(详见参考标准 GB/T 21981-2008)残留的确证与定量测定。 1 试样的制备 1.1 动物肌肉、肝脏、虾 从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g,剔除筋膜,虾去除头和壳。用组织捣碎机充分捣碎均匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于-18℃以下冷冻存放。 1.2 牛奶 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g,充分摇匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于0℃—4℃以下冷藏存放。 1.3 鸡蛋 从所取全部样品中取出有代表性样品约500 g,去壳后用组织捣碎机充分搅拌均匀,均分成两份,分别装入洁净容器中,密封,并标明标记,于0℃—4℃以下冷藏存放。注:制样操作过程中应防止样品被污染或其中的残留物发生变化。 所需均质设备有: 拍击式均质器 虾肉拍击效果图 图为拍击虾的效果图,由图中可以看出虾肉被有效破碎,并且均匀分散于萃取液中,均质效果好。 内切式匀浆机 2 样品提取净化 2.1 提取 称取5g试样(精确至0.01g)于50mL具塞塑料离心管中,准确加入内标溶液(4.15)100μL和10mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液,漩涡混匀,再加入β-葡萄糖醛酸酶溶液100µL于37±1℃振荡酶解12h。取出冷却至室温,加入25mL甲醇超声提取30min,0℃~4℃下10000r/min离心10min,将上清液转入洁净烧杯,加水100mL,混匀后待净化。 在此步中需要用到的实验仪器如下: 超声波清洗器 恒温水浴摇床 漩涡混合器 多管漩涡混合器 2.2 净化 提取液以2mL/min~3mL/min的速度上样于活化过的ENVI-Carb固相萃取柱。将小柱减压抽干,在将活化好的氨基柱串接在ENVI-Carb固相萃取柱的下方。用6mL二氯甲烷-甲醇溶液洗脱并收集洗脱液,取下小柱,再用2mL二氯甲烷-甲醇溶液洗氨基柱,洗脱液在微弱的氮气流下吹干,用1mL甲醇-水溶液溶解残渣,采用LC-MS/MS法进行测定。 在此步骤中需要使用的仪器有: 方形固相装置 半自动数控固相萃取系统 全自动密闭氮吹仪 圆形水浴氮吹仪 干式氮吹仪 以上仪器天津市恒奥科技发展有限公司均可提供,保证实验效果的前提下,提高实验的回收率、可重复性以及样品间的平行性。 市场部电话:022-83713517,全国热线电话:4006-328-128
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