复方酮康唑软膏中HPLC分析的色谱柱选择检测方案

复方酮康唑软膏 HPLC分析的色谱柱选择 1.酮康唑类药物简介 自八十年起，三唑类药物的研究进展迅速，1981年酮康唑，1990年氟康唑，1992年伊曲康唑相继问世，对许多全身性真菌感染，新的三唑类抗真菌药在有产性和安全性等方面均优于两性霉素B、氟胞嘧啶及咪康唑。从而得到较广泛的临床应用。酮康唑为咪唑类广谱抗真菌药，作用于真菌细胞膜，改变其通透性，对多种皮肤癣菌、酵母菌和白色念珠菌等均有抑菌作。且不易产生耐药性。实验证明体外对多种皮肤癣菌如毛癣菌属、小孢子属、表皮癣菌属等常见致病真菌等均有明显抗菌作用。丙酸氯倍他索为皮质类固醇素，抗炎、抗过敏作用强、副作用小。新霉素对革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性杆菌有良好的杀灭作用。酮康唑常用的剂型有片(胶囊)剂、混悬液、霜剂等。 化学名 顺-1-乙酰基-4-[4-[[2-(2，4-二氯苯基)-2-(1H-咪唑-1-基甲基)- 1，3-二氧戊环-4-基]甲氧基]苯基]哌嗪 分子量 531.44 分子式 C26H28CI，N404 结构式 -C7 HgC 2.复方酮康唑乳膏的 HPLC分析 复方酮康唑乳膏 (Compound Ketoconazole Cream)主要含酮康唑、丙酸氯倍他索和硫酸新霉素。国家药品标准对复方酮康唑软膏的分析有如下规定： 含量测定：按照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录ⅤD)测定。色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：甲醇-0.02mol/l磷酸二氢钾缓冲液(pH7.40) (75：25)为流动相，检测波长为239nm。 理论板数按酮康唑峰计算应不低于1000，酮康唑峰和丙酸氯倍他索峰的分离度应大于3.5。 目前用户中存在较多的问题之一是按照药典方法，复方酮康唑软膏中酮康唑峰和丙酸氯倍他索峰分离度达不到3.5；所用色谱柱寿命较短。 3.问题1----分离度与色谱柱 3.1 传统ODS 固定相分离 图1是传统的商品十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)固定相色谱分离图，相关数据列于表1中。 图1传统的商品十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)固定相色谱分离图 流动相：甲醇-0.02mol/1磷酸二氢钾缓冲液(pH7.40)(75：25)；流速：1.0ml/min检测波长：239nm；色谱柱：4.6×250mm。 表1 传统商品十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)固定相色谱分离相关数据 # 组分名 保留时间(min) 容量因子 塔板数 (N/柱) 分离度 1 Unknown 2.63 0.00 1545 2 Unknown 3.60 0.37 2238 3.39 3 丙酸氯倍他索 6.38 1.42 2588 6.89 4 酮康唑 8.02 2.05 2567 2.90 5 Unknown 10.73 3.08 6969 4.73 结果表明：理论塔板数按酮康唑峰计算高于1000，但是酮康唑峰和丙酸氯倍他索峰的分离度只有2.9，达不到药典的要求，并且酮康唑峰和丙酸氯倍他索色谱峰前伸比较明显。 3.2 SINOCHROM ODS-BP分离情况 图2是依利特公司 SINOCHROM ODS-BP 5um十八烷基硅烷键合硅胶固定相色谱分离图，相关数据列于表2中。 图2 SINOCHROM ODS-BP 十八烷基硅烷键合硅胶固定相色谱分离图 流动相：甲醇-0.02mol/l 磷酸二氢钾缓冲液(pH7.40)(75： 25)；流速： 1.0ml/min检测波长：239nm；色谱柱：4.6×250mm。 表2SINOCHROM ODS-BP 十八烷基硅烷键合硅胶固定相色谱分离相关数据 # 组分名 保留时间(min) 容量因子 塔板数(N/柱) 分离度 1 Unknown 4.09 0.00 2320 2 Unknown 6.11 0.49 4152 5.62 3 丙酸氯倍他索 13.11 2.20 4651 12.19 4 酮康唑 16.56 3.05 4566 3.94 5 Unknown 21.03 4.14 12121 7.56 结果表明：理论塔板数按酮康唑峰计算高于1000，与传统ODS 固定相比较有非常明显的提高， ，i酮康唑峰和丙酸氯倍他索峰的分离度达到3.94，满足药典的要求，并且酮康唑峰和丙酸氯倍他索色谱峰对称性好。 3.3 SINOCHROM ODS-AP分离情况 图3是依利特公司 SINOCHROM ODS-AP 5um十八烷基硅烷键合硅胶固 定相色谱分离图，相关数据列于表3中。 图3 SINOCHROM ODS-AP 十八烷基硅烷键合硅胶固定相色谱分离图流动相：甲醇-0.02mol/1 磷酸二氢钾缓冲液 (pH7.40)(75： 25)；流速：1.0ml/min检测波长：239mm；色谱柱：：4.6×250mm。 表3SINOCHROM ODS-AP 十八烷基硅烷键合硅胶固定相色谱分离相关数据 # 组分名 保留时间(min) 容量因子 塔板数(N/柱) 分离度 1 Unknown 4.76 0.00 2045 0.00 2 Unknown 7.40 0.56 5059 6.33 3 丙酸氯倍他索 17.25 2.63 6079 15.14 4 酮康唑 21.73 3.57 5673 4.40 5 Unknown 28.38 4.97 15159 6.40 结果表明：理论塔板数按酮康唑峰计算高于1000，与传统ODS 固定相比较有非常明显的提高， ，i酮康唑峰和丙酸氯倍他索峰的分离度达到4.40，满足药典的要求，并且酮康唑峰和丙酸氯倍他索色谱峰对称性好。 4结论 从以上分离情况对比可以看出，依利特公司 SINOCHROM-ODS系列 ODS 固定相在分离复方酮康唑软膏中具有突出的优势。大多数传统 C18 色谱柱酮康唑峰和丙酸氯倍他索峰的分离度都小于3.5，，而 SINOCHROM-ODS家 AP 和 BPODS 色谱柱很好地解决了这个问题。 有关 SINOCHROM-ODS 系列产品的详细信息请参考公司网站或公司宣传材料。