茶叶中农残检测方案(浓缩仪)

气相色谱法同时测定茶叶中10种有机磷农药残留 2016-3-25 茶叶从古到今一直都是我国重要的经济作物，同时也是我国重要的出口创汇的农产品之一。我国在茶叶的生产、制造、饮用等方面都有着深厚的茶文化底蕴，但是茶叶种植方式还停留在“粗放式、模糊式、经验式经营”的阶段,许多茶园缺乏有效的监管,存在乱用/滥用农药的现象。随着人们生活水平的提高，人们越来越关注食品安全问题，对茶叶的品质也有了更高的要求。近年来，欧盟对茶叶中农药残留限量的规定项目不断增多，最大残留限值大幅度降低，检测限也越来越低。 茶叶本身含有数百种化学成分，基质比较复杂，茶叶在种植的过程中通过环境迁移，根茎吸收传导等途径，农药很容易进入到茶叶组织内部，这也增加了检测的难度。茶叶中农药多残留分析研究已成为国际上食品安全检测技术研究的难点和热点之一。 我国原有的农药残留检测技术，前处理通常采用传统的液-液萃取、柱层析净化等手段及填充柱气谱检测方法，这些方法只适合已知、单残留（单类、几种）测定，已不能适应茶叶农药快速检测的要求。目前茶叶中多种有机磷农药残留检测最常用的方法采用 GB/T 5009.20-2003《食品中有机磷农药残留量的测定》，但该方法中没有对样品进行较好的净化处理，尤其是茶叶这种基质复杂，色素含量高的样品，会使仪器进样口、毛细管柱以及检测器等受到污染，影响仪器寿命。 本试验选用乙腈作为萃取溶剂，并采用超声波技术萃取茶叶样品，缩短了前处理时间。净化过程采用CARR/NH2固相萃取小柱，操作简单、快速、净化效果 好。洗脱溶剂用量少，降低了实验操作人员的有机溶剂暴露风险。经HP-5弱极性柱石英毛细管柱分离后用气相色谱火焰光度检测器（FPD）测定，结果证明方 法重现性好、回收率高。检出限低于欧盟对茶叶的最大残留限量（MRL）值，符合实际检验要求。 1 试剂与仪器 气相色谱仪（配有FPD检测器，美国Agilent）、多管漩涡混合器（HMV-50A，天津恒奥）、多功能振荡器、平行浓缩蒸发仪（HPE-12A，天津恒奥）、台式离心机、超声波清洗仪（天津恒奥）、数控固相萃取装置（天津恒奥）、全自动密闭氮吹仪（HAC-24A，天津恒奥）。 乙腈、丙酮、二氯甲烷均为色谱纯，无水硫酸钠（使用前650℃，烘烤4h），CARR/NH2固相萃取小柱（500mg/6ml，德国CNW）；敌敌畏、甲拌磷、乐果、二嗪磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、倍硫磷、水胺硫磷、甲基异柳磷、乙硫磷均购自国家标准物质中心，浓度100ug/ml，混合标准液用丙酮稀释配置。 2 样品前处理 茶叶样品经粉碎后，过20目筛制成粉状样品，密封装样，4℃冰箱中保存。 2.1 提取 称取1g（精确至0.01g）茶叶样品置于50ml离心管中，加适量水浸泡30min后，加入25ml乙腈，多管漩涡混合器混匀1min，超声提取10min后，5000r/min离心5min，取上清液于120ml平行浓缩蒸发仪配套试管内，残渣再加入10m乙腈提取两次，合并3次提取液。在40℃下使用平行浓缩蒸发仪减压浓缩至近干，加2ml丙酮，待净化。 2.2 净化 取CARB/NH2小柱，加入2cm高的无水硫酸钠，用3ml丙酮、3ml二氯甲烷预淋洗柱子，将待净化的2ml丙酮样液加到柱之上。用2ml丙酮洗涤试管，将清洗液同样加到柱之上，重复两次。再用4ml丙酮、10ml二氯甲烷淋洗柱子，收集洗脱液，40℃平行浓缩蒸发仪浓缩至近干，将剩余溶液转移至15ml离心管中，用氮吹仪吹干后，加1ml丙酮制成分析液，用于气相色谱测定。 2.3 色谱条件 色谱柱：HP-5（30m×0.32mm，0.25um）； 进样口温度：250℃； 离子源温度：250℃； 氢气流量：75ml/min； 空气流量：100ml/min； 尾吹流量（N2）：60ml/min，恒流模式； 柱流量：2.0ml/min。 升温程序：50℃保持1min，以30℃/min速率升至160℃保持1min，以5℃/min速率升至178℃保持4min，再以2℃/min速率升至180℃保持2min，以10℃/min速率升至210℃，以30℃/min速率升至260℃保持3 min。进样量1 ul，不分流进样，外标法定量。 2.4 10种有机磷混标线性方程及检测线 从浓度为100 ug/ml的10种有机磷标准品中分别吸取100 ul标准溶液注入到10 ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，配置成1 ug/ml的农药混合标准储备液，临用前分别稀释成0.05、0.1、0.2、0.4、0.5、1.0 ug/ml 6个浓度的有机磷混合标样，用气相色谱进行分析，以峰面积作为纵坐标，质量浓度作为横坐标做线性回归。以3倍信噪比确定10种有机磷农药的最低检测线。 2.5 10种有机磷农药的回收率及相对标准偏差 为考察本方法同时测定茶叶中10种有机磷农药的准确度和精密度，称取3份茶叶各1.0 g作为空白样品（已确定不含待测项目），分别添加3种不同浓度水平的有机磷混标，按照2.4方法进行加标回收试验，并计算10种有机磷农药的回收率及相对标准偏差。 2.6 结果与分析 茶叶中10种有机磷农药的分离效果良好，出峰时间分别为：敌敌畏5.482 min；甲拌磷9.866min；乐果10.415 min；二嗪磷 11.762 min；杀螟硫磷15.530 min；马拉硫磷 16.406 min；倍硫磷 16.799 min；水胺硫磷 17.320 min；甲基异柳磷 18.290 min；乙硫磷 21.196min。见图一。 本实验建立了一种检测茶叶中10种有机磷农药残留的气相色谱法，采用乙腈做萃取溶剂，用超声波法提取样品，大大缩短了萃取时间，提高了萃取效率；选用CARB/NH2固相萃取小柱净化样品，样品净化效果良好。本方法在0.05～1.0 mg/kg浓度范围内具有良好的线性关系，相关系数为0.99963～0.99986；在有机磷农药添加浓度为0.02～1.0 mg/kg 时，回收率为80.0%～102.0%，相对标准偏差为1.8%～5.8%，最低检出限为0.002～0.013 mg/kg。实验所建立的气相色谱法操作简单、分离效果好、回收率高、方便快捷，适用于茶叶中有机磷农药的日常监测。 注：本次实验中所用的减压浓缩装置为天津恒奥科技HPE-12A平行浓缩蒸发仪。该款仪器能显著提高实验效率以及样品间的平行性，重复性。 该系列样品单次最多处理24位样品，满足实验中批量处理样品的需求； 每个样品独立密封，避免交叉污染； 通过同时加热/摇动/抽真空，浓缩速度快、效率高； -A系列配有冷却循环装置，可实现0.5/1ml 定量浓缩。 如下图所示为我公司工程师给客户安装前后效果对比图。 广泛应用于环境监测、卫生医疗、科研、检验检疫、食品安全、第三方检测等机构，典型用户如下： 潍坊市海洋环境检测中心； 河南疾控中心； 四川隆昌疾控中心； 济南商业大学； 暨南大学； 大连海产品监测站； 成都药检所； 深圳华测检测认证集团； 华测黑龙江分公司； 华测青岛分公司； 华测北京分公司。