中药中主要物质含量分析检测方案

《2015药典》：牛黄清感胶囊中黄芩苷含量的分析测定 甘辛 引言（实验目的） 牛黄清感胶囊含有：黄芩、金银花、连翘、人工牛黄、珍珠母等成分，本实验主要测定其中黄芩苷的含量，用以标定牛黄清感胶囊的有效成分含量。 关键词：牛黄清感胶囊、黄芩苷、HPLC法 1 仪器与药品 LC-100高效液相色谱仪（UV检测器） 分析天平 超声波振荡机 甲醇 蒸馏水 量瓶 针筒 滤头 移液枪 2 分析条件 色谱柱：汉邦 C18 250mm*4.6mm*5μ 流动相：50%甲醇-水溶液，每升加入10ml冰醋酸 流速：1ml/min 检测波长：274nm 进样量：20μL 柱温：30℃ 3 样品处理 取装量差异项下的本品内容物，混匀，取0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇 50ml,密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率 33kHz) 20分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液 5ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 4 实验步骤 按照如下条件配置标准品溶液： 精密称取黄芩苷对照品l0mg，置l00ml量瓶中，加50% 甲醇适量，置水浴中加热使溶解，放冷，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得(每1ml含黄芩苷0.1mg)。 向上述标准液中加入50%的甲醇水溶液稀释，分别得到含量为20%、40%、60%、80%与未稀释的100%溶液。 依次进样。用工作站计算并绘制标准曲线。 得到如下数据与标准曲线： 按照3中所述方法对样品进行处理，将前处理后的样品溶液稀释一倍进行分析。 按照色谱条件进行分析。 得到的色谱图及分析报告如下： 5结论 测得的稀释一倍后的供试品浓度为68.916%，即供试品原溶液的浓度是标准品溶液的137.832%，按照标准品的说明书，标准品含量按93.3%计算，配置的标准品溶液实际浓度为0.9*10-4g/ml. 即标准品实际含量为0.8397*10-4g/ml. 计算可得，样品溶液（0.7g/50ml）实际黄芩苷总含量为0.0289克，每粒（0.3g）含量为12.40mg，达到了药典规定每粒含量10mg的要求。 日期： 2014年12月30日 PAGE