UV-1500紫外分光光度法-双氧水含量的测定

Technology-because you change 紫外分光光度法测定过氧化氢含量美析仪器 关键词：分光光度法；过氧化氢；美析仪器 www.macylab.com； UV-1500 【原理】 H202与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物一钛复合物黄色沉淀，可被 H2SO4溶解后，在415nm 波长下比色测定。在一定范围内，其颜色深浅与 H2O2浓度呈线性关系。 【仪器和用具】 研钵；移液枪0.2ml和枪头，5ml×1支；容量瓶10ml×7个，离心管5ml×8支；离心机； UV-1500型紫外可见分光光度计。 【试剂】 100 u mol/L H202试剂；2mol/L硫酸；5%(W/V)硫酸钛；丙酮；浓氨水。 30%H202指的是过氧化氢溶液的质量比，其密度为 1.1g/cm3，而过氧化氢的分子量是34.02，通过这些参数，我们可以推算出30%的过氧化氢的摩尔浓度为9.7mol/L. 【方法】 1.制作标准曲线：取10ml离心管7支，顺序编号，并按表40-1加入试剂。 表40-1 测定 H2O2度度标准曲线配置表 试剂(ml) 离心管号 1 2 3 4 5 6 7 100 u mol/L H2O2 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 4℃下预冷丙酮 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 5%硫酸钛 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 浓氨水 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 3000r/min 离心10min，弃去上清夜，留沉淀 2mol硫酸 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 待沉淀完全溶解后，将其小心转入10ml容量瓶中，并用蒸馏水少量多次冲洗离心管，将洗涤液合并后定容至10ml刻度，415nm波长下比色。 2.样品提取和测定：(1)称取新鲜植物组织2~5g(视H202含量多少而定)，按材料与提取剂1：1的比例加入4℃下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后，转入离心管3000 r/min 下离心10min， 弃去残渣，上清液即为样品提取液。(2)用移液管吸取样品提取液1ml，按表35-1加入5%硫酸钛和浓氨水，待沉淀形成后 3000rpm/min 离心 10min， 弃去上清液。沉淀用丙酮反复洗涤3~5次，直到去除植物色素。(3)向洗涤后的沉淀中加入 2mol 硫酸 5ml，待完全溶解后， 与标准曲线同样的方法定容并比色。 3.结果计算： 植物组织中H202含量(mol/g Fw)=FWxV1 式中C一标准曲线上查得样品中H202浓度(umol)； V一样品提取液总体积(ml)； Vi一测定时用样品提取液体积(ml)； FW一植物组织鲜重(g)。 Tel： ttp：//www.macylab.com http：//www.macylab.comTel：