肉制品中添加及非法添加检测方案

深圳点生物技术有限公司-biocomma biotech co.，ltd. 动物源性食品中喹诺酮类物质检测的固相萃取方法 (Polybase"M HLB) 一、实验目的 本研究利用固相萃取法作为猪肉样品的前处理方法， LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化猪肉样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。 二、实验目标物 三种喹诺酮类药物：依诺沙星(CAS：74011-58-8；84294-96-2)，洛美沙星 (CAS：98079-51-7)，麻保沙星(CAS：115550-35-1)。 三、应用范围 本方法适用于动物源食品中喹诺酮类药物LC-MS/MS检测及确证。 四、参考标准 进出口行业标准《SN/T 1751.2-2007 动物源性食品中喹诺酮类药物残留检测方法；第2部分：液相色谱-质谱/质谱法》。 五、实验材料 BiocommaPolybaseHLB固相萃取柱3mL/60mg。 六、实验方法 1、样品提取 称取均质试样5.0g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中，加入20mL乙腈，涡旋混合1min，超声提取10min，10000r/min离心，提取三次，合并上清液。 2、SPE柱净化 (1)活化：加入6mL甲醇，6mL水活化。 (2)上样和洗脱：当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，以2mL/min-3mL/min的速度过柱，弃去滤液，用2 mL 5%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，在用6mL甲醇洗脱并收集洗脱液。 (3)浓缩定容：50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用1 mL0.2%甲酸水溶液溶解， 1000r/min旋涡混合1min，上液相色谱-质谱仪检测。 3、LC-MS/MS条件 色谱柱： Venusil ASB C18 (2.1×150mm， 5um， 100A) 质谱仪： API 4000 A：乙青溶液；B：0.1%甲酸的水溶液 表1流动相梯度洗脱程序 时间/min A (%) B(%) 0.00 13 87 2.00 13 87 5.00 90 10 10.00 90 10 10.01 13 87 16.00 Stop 流速：0.3mL/min 柱温：40℃ 进样体积：2uL 离子源：电喷雾(ESI)，正离子模式 检测方式：多反应监测(MRM) 表2质谱仪离子源参数 表3喹诺酮类药物的母离子和子离子参数表 Source/Gas Collision Gas(CAD) 6 Curtain Gas(CUR) 30 Ion Source Gas 1(GS 1) 30 Ion Source Gas 2(GS 2) 30 Ion Spray Voltage(IS) 5500 Temperature(TEM) 500 Interface Heater(ihe) On 物质名称 保留时间(min) 检测离子对 DP EP CE CXP 依诺沙星 1.54 320.9/303.3 78 10 25 12 320.9/232.3 78 10 48 12 洛美沙星 1.61 351.9/308.2 86 10 24 12 351.9/265.1 86 10 31 12 麻保沙星 6.26 363.4345.2 94 10 28 12 363.4/320.3 94 10 22 12 七、实验结果 1、猪肉基质10Hg/kg加标回收结果： 三个平行测试样的平均回收率均大于80%，平行样间相对标准偏差均小于5%，符合标准要求。((见表4) 表4猪肉中10ug/kg加标回收实验结果 名称 1 2 3 平均回收率(%) RSD(%) 依诺沙星 90.12 89.65 88.32 89.36 1.04 洛美沙星 92.36 87.39 88.36 89.37 2.94 麻保沙星 81.69 80.65 84.95 82.43 2.72 2、空白样品中添加喹诺酮类残留物色谱图 图1喹诺酮待测物总离子流图 图2依诺沙星(Enox)(320.9/303.3)质谱图 图3洛美沙星(Lomeflo)(351.9/308.2)质谱图 图4麻保沙星(Marboflo)(363.4/345.2)质谱图 本号：HLBWW.biocomma.cn