肉制品中农兽药残留检测方案

DiKMAA reliable partner for your lab QuEChERS方法用于动物源性食品中喹诺酮类兽药残留量测定 喹诺酮是一类合成抗生素类药物，治疗系统感染疾病，并且在动物饲养中作为预防和治疗药物普遍使用。近年来，这些药物在动物组织中的残留已被引起广泛关注。联合国粮农组织、世界卫生组织食品添加剂专家联合委员会、欧盟都已制定了多种喹诺酮类药物在动物组织中的最高残留限量。 喹诺酮类药物残留分析方法，主要包括高效液相法(HPLC)以及与此相关的HPLC-UV、HPLC-FD、HPLC-DVD、LC-MS/MS、LC-ESI-MS/MS， 另外还有荧光光谱法、毛细管电泳法和酶联免疫法等。样品前处理主要采用 SPE、GPC、液液萃取等净化方法；但是目前还没有文献采用 QuEChERS方法净化。而且官方所发布标准的检测方法中大多数是 LCMS-SPE 或者 LCMS-LLE。 方法优势 基于QuEChERS 方法原理，采用乙腈提取，然后取出1mL提取液净化，上机分析。对比国标方法《GB/T 21312-2007 动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法液相色谱-质谱质谱法》，本方法具有： 1.前处理过程简单、方便，并能同时检测马波沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、洛美沙星、双氟沙星、萘啶酸、氟甲喹； 2.节省时间，降低基质效应； 3..回收率达85%以上，保证实验结果的准确性、重现性； 4.方法检出限均为1.0 ug/kg，优于国标方法《GB/T 21312-2007动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法液相色谱-质谱质谱法》。 以下为详细解决方案，敬请参考! 1、适用范围 适用于草鱼、猪肉、猪肝等动物源性食品中马波沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、洛美沙星、双氟沙星、萘啶酸、氟甲喹等兽药残留量的测定；本方法检出限1.0ug/kg。 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 2、提取 (1)猪肉、草鱼样品 取 5.0g样品与1.0g氯化钠，搅匀，加5mL5%甲酸乙腈，涡旋混合 1 min，振荡5 min， 8000 rpm 下离心2 min， 取 1mL 上清液待净化。 (2)猪肝样品 取5.0g样品与2.0g氯化钠，搅匀，加5 mL5%甲酸乙腈，涡旋混合1 min，振荡 5 min， 8000 rpm下离心2 min， 取1mL上清液待净化。 3、净化 将1mL 提取液转移到 ProElut QuE 2 mL Tube (Cat#： 64529)，涡旋混合30 s，10000 rpm 下离心1 min， 取上清液500 pL于浓缩管中，加水100 pL，涡旋混匀，室温下氮吹至剩余约100 pL溶液，加水定容至500 pL， 混匀，过0.22 um 微孔滤膜，进 LC-MS/MS 分析。 4、分析条件 4.1 UPLC 条件 色谱柱： Endeavorsil C18，100×2.1 mm，1.8 um (Cat#：87003) 流速：0.2mL/min 进样量：5pL 柱 温：35℃ 流动相： A：0.4%甲酸水 B：甲醇：乙：甲酸(40：60：0.4)梯度设置 时间/Min. 0 4.5 5.5 7 7.5 15 A(%) 80 80 0 0 80 80 B(%) 20 20 100 100 20 20 4.2质谱条件 电离模式：ESI扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测电喷雾电压：5500V雾化气压力：50 psi辅助气压力：50 psi气帘气压力：20 psi离子源温度：500℃ 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 定性离子对、定量离子对、碰撞气能量及去簇电压见下表 药物名称 定性离子对(m/z) (母离子/子离子) 定量离子对(m/z) (母离子/子离子) 碰撞气能量/eV 去簇电压/V 马波沙星 363.2/320.2 363.2/320.2 24 82 363.2/277.4 24 沙拉沙星 386.2/342.2 386.2/342.2 24 92 386.2/299.2 35 双氟沙星 400.2/356.2 400.2/356.2 27 100 400.2/299.3 37 恩诺沙星 360.3/316.1 360.3/316.1 26 80 360.3/245.2 34 洛美沙星 352.3/265.1 352.3/265.1 30 93 352.3/308.3 23 萘啶酸 233.2/215.1 233.2/215.1 20 58 233.2/187.0 33 氟甲喹 262.1/244.2 262.1/244.2 24 69 262.1/201.1 45 5、实验结果 草鱼、猪肝、猪肉样品中喹诺酮类药物的 LC-MS/MS 检测添加回收结果 基质 药物名称 添加水平 (ug/kg) 回收率(%) 猪肉 马波沙星 10 77.5 恩诺沙星 10 91.2 洛美沙星 10 84.0 沙拉沙星 10 84.6 萘啶酸 10 93.5 氟甲喹 10 80.0 双氟沙星 10 96.9 猪肝 马波沙星 10 84.8 恩诺沙星 10 97.0 洛美沙星 10 92.9 沙拉沙星 10 98.0 萘啶酸 10 90.5 氟甲喹 10 78.2 双氟沙星 10 93.4 草鱼 马波沙星 10 95.9 恩诺沙星 10 91.3 洛美沙星 10 94.1 沙拉沙星 10 91.2 萘啶酸 10 94.6 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 氟甲喹 10 78.4 双氟沙星 10 92.6 马波沙星多反应监测色谱图 洛美沙星多反应监测色谱图 恩诺沙星多反应监测色谱图 沙拉沙星多反应监测色谱图 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 氟甲喹多反应监测色谱图 草鱼空白样品总反应监测图 草鱼加标样品(添加水平：10pg/kg)总反应监测图 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 猪肉空白样品总反应监测图 4.0猪肉加标样品(添加水平：10 ug/kg)总反应监测图y) 猪肝空白样品总反应监测图 猪肝加标样品(添加水平：10 pg/kg)总反应监测图 北京：400-608-7719 上海：021-61263966 天津：400-633-6606 广州：020-85593520 成都：028-86612625 沈阳：024-22943513 石家庄：0311-66686220 青岛：0532-83725230 济南：0531-83681355 重庆：023-62568657 货号 名称 规格 样品前处理 64529 ProElut QuE 2 mL Tube.For Quinolone 2 mL Tube 100/pk 30039 FitMax 针头式过滤器 Nylon 13 mm，0.22 um 100/pk 色谱柱及保护柱 87003 UHPLC专用柱Endeavorsil C18 100x2.1 mm， 1.8 um 标准品 55-34039-100MG 马波沙星[115550-35-1] 100 mg 50P-C16908001 沙拉沙星[98105-99-8] 10 mg 55-33984-100MG 双氟沙星盐酸盐[91296-86-5] 100 mg 55-33699-100MG 恩诺沙星[93106-60-6] 100 mg 50P-C14646000 洛美沙星盐酸盐[98079-52-8] 100 mg 50P-C15412000 萘啶酸[389-08-2] 100 mg 55-45735-250MG 氟甲喹[42835-25-6] 250 mg HPLC溶剂·缓冲盐·离子对试剂 50101 乙腈 HPLC级 4L 50102 甲醇 HPLC级 4L 50144 甲酸 HPLC 级 50 mL 通用色谱产品 52401B 瓶架/蓝色 50 孔 52401A 瓶架/白色 50 孔 1034 样品瓶(棕色/螺纹) 2 mL， 100/pk 1035 样品瓶盖/含垫(已经组装) 100/pk H80465 HPLC 进样针 25 pL 红色产品货号#30039、#1034、#1035火热促销中 济南： 重庆： 济南： 重庆：