淀粉中顺丁烯二酸检测方案

I峰面积(V*S)1 LC5510 测定淀粉中的顺烯二酸 摘要：：本文建立了利用我公司高效液相色谱 LC-5510测定淀粉中顺丁烯二酸含量的方法：样品中的顺丁烯二酸用5%甲醇水溶液超声提取后，：，离心，上清液进高效液相色谱仪，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。该方法在0.1~20.0ug/mL 浓度范围内线性关系良好，回收率在90.5%~94.1%之间，精密度良好，检出限为1.1 mg/kg。 (S/N=3)完全满足检测分析要求。 关键词： LC-5510高效液相色谱；顺丁烯二酸；淀粉 台湾近日发现含顺丁烯二酸的“毒淀粉”，顺丁烯二酸又称“马来酸”，无色结晶体，无营养价值，会破坏人体器官黏膜组织，并损害肾脏。截至目前，全台粉圆、黑轮、板条、芋圆、地瓜圆等越来越多食品被查出违法添加顺丁烯二酸。但据我国相关质监部门表示，这种顺丁烯二酸作为食品添加剂并不在现有监管范围内，尚未有食品中检测顺丁烯二酸的相关的国家标准。 本文建立了测定淀粉中顺丁烯二酸的高效液相色谱分析方法，样品前处理过程简单、快速，方法定性定量准确，灵敏度高。 1实验部分 1.1主要仪器和试剂 LC 5510 高效液相色谱仪：：配有紫外检测器 DM-100在线脱气机 超声波水浴 离心机 甲醇 磷酸 顺丁烯二酸标准品(含量≥99.5%) 1.2色谱条件 色谱柱：C18柱，250 mmx4.6mm， 5um。 流动相：甲醇+水(磷酸调PH=2.8)=5+95， 0.45 um 滤膜过滤。 流速：1.0 mL/min。 检测波长：：：214nm。 柱温：：室温。 进样量：20 uL. 1.3试样处理 称取2.5g淀粉样品(精确至0.0001g)于50mL容量瓶中(淀粉制品用粉碎机打碎后称取)，加入约 30mL5%甲醇水溶液(体积分数)，涡旋 5min， 超声提取 10min， 冷却至室温，用5%甲醇水溶液定容，摇匀，取 5mL于10mL离心管中，3000r/min 离心15min，上清液过0.22um 微孔滤膜，待测。 2结果与讨论 2.11标准曲线的绘制 2.1.1标准溶液配制 顺丁烯二酸标准储备液：准确称取顺丁烯二酸标准品 50mg 于 100mL容量瓶中，加水溶解并定容，此标准贮备液浓度为 500ug/mL. 顺丁烯二酸标准工作液： 吸取顺丁烯二酸标准贮备液 1mL 于25mL容量瓶中，用5%甲醇水溶液定容配成标准溶液浓度为 20pg/mL。再分别吸取 20ug/mL顺丁烯二酸标准溶液 0.05、0.125、0.25、2.5、5.0、10.0mL于10mL容量瓶中，用5%甲醇水溶液定容至刻度，摇匀。此标准工作液浓度为0.1、0.25、0.5、5.0、10.0、20.0pg/mL。 2.1.2 标准曲线 将顺丁烯二酸标准工作液依次按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 回归方程：￥=5516731X+144.18 相关系数：0.99999 曲线点数：6 图1顺丁烯二酸标准曲线谱图 2.2样品分析 将样品溶液按上述色谱条件上机测定，记录色谱峰面积，计算含量。 图20.5ug/mL标样谱图 图3 某品牌淀粉添加顺丁烯二酸标样谱图 2.3回收率实验 取3份样品，分别加入不同体积的 20ug/mL 的标准溶液，按上述方法进行样品处理，得到回收率如下表所示。 序号 加标量(20ug/mL标准溶液) (mL) 回收率(%) 0.25 93.7 2 1.25 90.5 3 2.5 94.1 表1回收率实验 2.4精密度实验 相同的条件下，取三份样品，分别加入 1.25mL的20pg/mL 的标准溶液，结果如下： 组分名称 第-t_-L次测定 结果(mg/kg) 第二次测定 结果(mg/kg) 第三次测定结果(mg/kg) RSD(%) 双氰胺 9.47 9.20 9.23 1.59 2.5最小检出限 以3倍的基线噪声计算出检出限为 1.1mg/kg。 3结论 用 LC-5510 高效液相色谱分析淀粉中顺丁烯二酸的含量，重复性良好，该方法在0.1~20.0 ug/mL浓度范围内线性关系良好，回收率在90.5%~94.1%之间，该方法样品前处理过程简单，仪器操作简便易懂。 测定淀粉中顺丁烯二酸实验系统配置(高效液相色谱) LC5510 或 LC5500(单泵)(或升级为双泵，组成高压梯度系统)DM-100 在线脱气机(选配) AS-401自动进样器(选配) 溶剂过滤器(配备真空泵) 超声波清洗器 分类 名称 规格 数量 试剂 甲醇 色谱纯(4L/瓶) 1瓶 磷酸 分析纯 (500g/瓶) 1瓶 基本器具 纯净水(有条件可 购纯水机) HPLC 使用纯净水 1桶 电子天平 精确至 0.0001g 1台 PH计 带控温，精确至 0.01 1台 漩涡混合器 1台 离心机 大于 5000r/min 1台 0.45um 有机系 滤膜 100p/盒 1盒 0.22um(或 0.45um)有机系过 配套一次性注射器使 用 1包 基 本 器 具 滤头 一次性注射器 1mL 10支 移液管 1mL 5支 移液管 2mL 5支 移液管 10mL 5支 具塞离心管 10mL 10 个 容量瓶 1000mL 1个 容量瓶 100mL 1个 容量瓶 50 mL 5个 容量瓶 25mL 1个 容量瓶 10mL 10个 洗耳球 1个 移液器(选配) 1mL 1支 移液器(选配) 5mL 1支 标品 顺丁烯二酸标品 0.25g/瓶 1瓶 色谱柱 C18柱 250 mmx4.6mm 5um 1根