大黄中大黄素的含量检测方案

CAMAL大黄中大黄素的含量测定 讨论 中药分析应用报告 大黄中大黄素的含量测定 原理 “大黄”为《中国药典》1995年版一部收载品种。大黄根茎含蒽醌衍生物的总量为1.01~5.19%，其中以结合状态的为主，游离状态仅占小部分，二者之比为2~10：1(“中药志”第一册P27)。本实验是用薄层色谱法测定酸水解后的五种主要游离蒽醌甙元之一——·大黄素的含量。 样品、试剂及仪器 样品： 香港市场商品 对照品： 大黄素(emodin) 中国药品生物制品检定所提供 试剂： 甲醇、乙醚，乙酸乙酯，石油醚， 甲酸乙酯，日甲酸，盐酸等(均为分析纯) 硅胶60F254预制板(Merck) (20×10cm) 仪器：CAMAG全自动点样器(Automatic TLC Sampler ⅢII) CAMAG双槽展开箱 CAMAG 薄层扫描仪(SCANNER3) CAMAG薄层色谱摄像仪 (REPROSTAR II) 供试液制备 取本品粉末约0.5g， 精密称定，加甲醇超声提取3次，每次 50ml， 20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水100ml溶解，加盐酸10ml，置水浴上用蒸气回流30分钟，放冷，用乙醚抽提3次，每次50ml， 合并乙醚液，用水50ml洗涤，弃去水液，乙醚液小心蒸干，残渣用乙酸乙酯溶解移至 10ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 对照品溶液制备 取大黄素对照品，加乙酸乙酯制成每 1ml 含 0.2mg的溶液，作为对照品溶液。 色谱条件 薄层板： 硅胶60F254 预制板(Merck) (20×10cm) 点样： CAMAG全自动点样器(Automatic TLC Sampler III) 条带状点木点样顺序： S1 S2aaabbbS1 S2aaabbb (S1：对照液低浓度 S2：对照液高浓度 a：供共液1#b：供试液2#) 展开： 石油醚(30~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：：1)的上层溶液 为展开剂，展开约8cm，取出，晾干。 测定 光源：钨灯扫描用计算机软件：CAMAG CATS 4.04扫描方式：反射法吸收扫描，波长： As=440nm。扫描速度：20mm/秒扫描时间：3分钟(16个扫描道)积分时间：1分钟(计算机自动积分)计算：直线回归，外标法两点校正。 测定结果 日期：1997年3月24日文件自动编号(ID)： 7CD03181208335F： 样品取样量(g) 样品点样量(ul) 测定值(ng) RSD (%) n 含量(%) 1# 0.5116 5 671.140 1.7 6 0.2624 2# 0.5140 5 692.791 2.3 6 0.2696 样品取样量(g) 样品点样量(ul) 测定值(ng) RSD (%) n 含量(%) 本试验的关键是层析条件的控制，详见《中国药典中药薄层色谱彩色图集》第22页。 365nm荧光色谱 氨熏后可见光色谱 试验者：林巧玲 第页共页 CAMAG第页共页