白酒中甜蜜素检测方案

离子色谱法电导检测白酒中的甜蜜素 魏超，焦霞²，盖学武2 (1.桂林理工大学，广西桂林541002；2.青岛盛瀚色谱技术有限公司，山东青岛266001) 摘要：建立了离子色谱-电导检测白酒中的甜蜜素。选用SH-Anion-2阴离子交换色谱柱，以碳酸钠 (NazCOs)作淋洗液，样品经过处理后进入离子色谱，运用电导检测。该法在 0.05-10.0 mg/L范围内线性关系良好， R²>0.9998，检测限为10.0 ug/L， 加标回收率在 89.0~105.0%之间。方法简便易行，灵敏度高，结果准确。 关键词：离子色谱，电导检测，白酒，甜蜜素 甜蜜素，学名为环己基氨基磺酸钠，是我国目前广泛使用的一种甜味剂。其甜度是蔗糖的300~500倍。少数白酒生产企业为改善白酒口感，添加了这种甜味剂。在我国强制性标准中，不允许向白酒产品中添加甜味剂。然而由于缺少使用于白酒中甜味剂的检测方法，各级检验部门对于白酒中微量甜味剂的检测往往无能为力，特别是遇到阳性样品时，现行方法存在无法确证的困难。GB/T5009.97-2003甜味剂的检测方法已被卫生部监督司列入不适合白酒检测范围。文献中报道的对白酒中甜蜜素的检测有分光光度间接法2，液相色谱法3和HPLC-MS4。虽然分光光度间接法定性方便，但是检测灵每度不理想；而液相色谱法采用衍生手段后进行检测，操作过程较复杂； HPLC-MS方法的检测灵敏度高，但是仪器成本高；本文运用离子色谱对白酒中的甜蜜素进行检测，仪器运行成本低，检测灵敏度高，定量准确。 1材料与方法 1.1仪器与试剂 离子色谱仪： CIC-200(青岛盛瀚色谱技术有限公司)； HW2000色谱工作站(上海千谱软件有限公司)；色谱柱： SH-Anion-2 型阴离子色谱柱(日本)； SHY 自再生抑制器(青岛盛瀚色谱技术有限公司)；；二氧化碳抑制器(青岛盛瀚色谱技术有限公司)；纯水机(UPT-I-5，优普纯水仪器设备有限公司，上海)。ODS-SPE 柱 (Cleanert IC-ODS 500mg， 青岛盛瀚) 碳酸钠为基准试剂(国药集团化学试剂有限公司)；；白酒样品为市售某品牌牛奶；日甲醇为色谱纯(迪马，美国)；环己基氨基磺酸钠标准物质(国家标准物质中心) 1.2色谱条件 SH-Anion-2型阴离子色谱柱，采用 2 mmol/L NazCO3淋洗液等度淋洗，电导检测，淋洗液流速为 0.8 ml/min， 100uL定量环，峰面积定量。 1.3溶液的配制 淋洗液的配制：移取4.20 ml 0.24 mol/L MSA 储备液于500 mL容量瓶中，定容至所需要的刻度，得到4.20nmmol/L NazCO3淋洗液。 标准溶液(1000 mg/L)的配制：精确称取 0.1g 环己基氨基磺酸钠标准品，于25mL烧杯中，用玻璃棒不时搅拌，待溶解完全后，移至100 mL容量瓶中，并定容至刻度。 其它浓度的标准溶液，均在1000 mg/L 标准溶液的基础上，逐级稀释得到。 1.4日白酒样品的制备 白酒样品用二次去离子水稀释100倍后， 过ODS柱除去大分子的有机物。 2结果与分析 2.1色谱条件的优化 2.1.1检测器的选用 环己基氨基磺酸结构本身不具有光谱吸收的基团，因此不能运用紫外检测器进行直接检测；而环己基氨基磺酸钠在水溶液中完全电离，产生环己基氨基磺酸阴离子，且 pka 远远小于7，满足电导检测的条件。通过试验证明，运用电导检测器检测甜蜜素，其电导响应高。 2.1.2色谱柱的选择 由于酒中含有较多的小分子有机酸，而环己基氨基磺酸的保留特点很特殊，因此需要高容量的亲水性色谱柱，才能保证环己基氨基磺酸与其它阴离子和有机酸的分离。选用SH-Anion-2 型阴离子色谱柱，有机酸和常规阴离子不会对环己基氨基磺酸浐生干扰。图1为白酒样品中甜蜜素加标色谱图。 图1白酒样品中甜蜜素加标色谱图 Fig. Chromatogram of cylamate added in liquor sample 色谱峰：1，甜蜜素 2.1.3淋洗液浓度的优化 在固定流速的情况下，改变淋洗液的浓度分别为， 1.0mmol/L NazCO3 ， 2.0mmol/L NazCO3和 5mmol/L NazCO3，观察色谱峰与其它离子的分离情况。因此以 2.0 mmol/LNa2CO3为淋洗条件，可以实现甜蜜素与其它离子的基线分离。 2.2线性范围和检测限 在选定的色谱条件下，配制一系列标准溶液液进行分析测试，结果表明：在(0.05~10)mg/L范围内，其浓度与峰面积有良好的线性关系，以峰面积Y对甜蜜素的浓度X(mg/L)的线性方程为：：Y=5E+005X-6+2E+004，线性相关系数为r=0.9999.以3倍的信噪比计算方法的检出限为10ug/L. 2.3回收率和精密度 在市售白酒样品中加入已知浓度的甜蜜素标准溶液，在选定实验条件下进行加标回收试验，平行测定6次，回收试验结果列于表1。由表1可以看出，该方法的平均回收率为89.0%~105.0%。由此可见，该方法的准确度较高。 表1：回收率和精密度(n=6) Table1 ：Recovery and relative standard deviation 待测离子 白酒 本底均值 (mg/L) 加标 (mg/L) 测得均值 (mg/L) 回收率 (%) RSD (%) 甜蜜素 A 3.0 2.98 99.83 1.05 B 1.0 1.05 96.00 0.90 3 结论 本文将白酒样品稀释100倍，然后经过 ODS 柱， 直接进样以达到离子色谱的进样要求。 方法简便实用，快速，灵敏度高，准确度高，对实际检测有重大的意义。白酒样品中甜蜜素的检测，结果令人满意。同时，本法使用的国产仪器具有成本低、操作简单、维护方便等优点，可以满足白酒制造企业的内检。 ( 参考文献 ) [1] GB/T 5009.97-2003.食品中环己基氨基磺酸钠的测定[S] ( [2]黄会秋.分光光度法间接测定白酒中甜蜜素.中国卫生检验杂志 2006， 16 6 (9) ： 1073~1074 ) ( [3]吕国良.高效液相色谱法测定白酒中甜蜜素.酿酒科技，2008，3：96~99 ) ( [4] 王骏.HPLC/MS 测定白酒中的微量甜味剂.食品与发酵工业，2007，33(10)：152~153 )