其他检测

干细胞移植对于白血病等多种疾病的治疗具有重要意义，而准确的干细胞绝对计数对于干细胞移植的成败又十分重要。流式细胞仪结合荧光单抗计数为干细胞绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法。 细胞表型是细胞基本生物学性质之一。在细胞生物学的研究中，细胞表型反应出细胞群均质程度、细胞生物学功能、细胞分化程度、细胞衰老程度，是细胞产品的最为重要的质量标准。流式细胞术是检测细胞表型的通用技术。

蛋白质的稳定性取决于配体的相互作用、缓冲液条件或构象变化，传统上是通过麻烦费时的圆二色光谱（CD）来研究的。 其实有一种更为简单的检测方法，即基于温度诱导蛋白变性的热漂移分析，通过检测荧光染料SYPRO® Orange的信号强度变化来进行。

NR/R双向电泳的基本原理是根据LaemmLi的SDS电泳原理设计的，NR指的是非还原相，R指的是还原相。 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可将不同相对分子质量的蛋白质按相对分子质量大小分离开来。NR/R双向对角线电泳的第一向是在非还原条件下的SDS电泳，电泳结束后将胶条切下，置于含 2-硫基乙醇的样品处理液中处理，使其-S-S-键被还原断裂，将处理后的胶条置于第二向SDS电泳槽的夹层中凝胶上方，然后进行第二向电泳。 电泳结果中凡是即无链内二硫键又无链间二硫键的蛋白质均处于对角线上，凡含有链间二硫键的蛋白质，因二硫键断裂，使两条或两条以上的肽链分开，相对分子质量变小，迁移率加大，而出现在对角线的下方，凡含有链内二硫键的蛋白质，因二硫键断裂，而使肽链松散，迁移率降低，而出现在对角线的上方。

本文详细向您介绍如何使用日立荧光分光光度计F-7100分析检测皮肤中的胶原蛋白含量。通过测量不同生物样品（包括：三文鱼皮，男性皮肤和女性皮肤），利用三维立体的激发发射光谱，可以清晰辨别出各生物样品种类，并检测其中的胶原蛋白含量。F-7100拥有全球最快扫描、驱动速度和最高灵敏度，三维光谱分析更加方便、快捷，提供追踪监控化学反应过程。超高信噪比的优异功能，可以检测出低至1*10-12mol/L的荧光素，同时，更有利于痕量样品的测量。实验中，搭配主机使用的光纤附件使得样品种类与形状更具灵活性，将光源能量导出并无损伤直接检测肌肤变成可能。

本纪要基于ACQUITY Arc的GPC水相系统，应用Waters Ultrahydrogel色谱柱，对市售普鲁兰多糖的分子量分布进行测定，并使用Empower软件进行相对平均分子量的计算。

Cellarium（A Live-Cell Microarray for High-Throughput Observation of Metabolic Biosignatures） 技术是以NIH NHGRI（National Human Genome Research Institute）CEGS（Center of Excellence in Genomic Sciences）Microscale Life Sciences Center开发的技术衍生出来的，隶属于上述NIH LINCS项目的一部分。这种技术通过单细胞代谢分析，致力于开发单细胞水平的药物特性的代谢图谱。The LINCS Tech U01 可以支持新一代高通量系统的发展并将数据储存到LINCS数据库中。利用ImageXpress? Micro 高内涵分析系统可实现快速的高分辨率图像采集，以得到单细胞水平上反应细胞各种生物特征的数据分析和处理。 在美国NIH LINCS项目中，利用高内涵成像分析技术平台可获得单个细胞水平的各种生物学特征，如固定细胞中蛋白的免疫检测、活细胞凋亡图像分析、蛋白激酶生化分析以及细胞活力相关的生理参数，为研究者和临床诊断医生探测单细胞个体分析和如何用药提供了一个独特的工具。 特点： ? 得到单细胞水平上反映细胞生理功能的各种细胞内特征的海量数据。 ? 采用免洗一步染料标记法，操作简单、实时检测、 结果准确。 ? 使用高通量/高内涵检测的方法，获得海量数据，进行大数据比对分析，建立网络集成式细胞内特征的公共数据库，为人类对疾病的了解、新药研发及个性化治疗提供有力的数据支撑和手段。

Zooplankton feed in either of three ways: they generate a feeding current, cruise through the water, or they are ambush feeders. Each mode generates different hydrodynamic disturbances and hence exposes the grazers differently to mechanosensory predators. Ambush feeders sink slowly and therefore perform occasional upward repositioning jumps. We quantified the fluid disturbance generated by repositioning jumps in a mm-sized copepod (Re ~ 40). The kick of the swimming legs generates a viscous vortex ring in the wake; another ring of similar intensity but opposite rotation is formed around the decelerating copepod. A simple analytical model, that of an impulsive point force, properly describes the observed flow field as a function of the momentum of the copepod, including the translation of the vortex and its spatial extension and temporal decay. We show that the time-averaged fluid signal and the consequent predation risk is much less for an ambush feeding than a cruising or hovering copepod for small individuals, while the reverse is true for individuals larger than about 1 mm. This makes inefficient ambush feeding feasible in small copepods and is consistent with the observation that ambush feeding copepods in the ocean are all small, while larger species invariably use hovering or cruising feeding strategies.

通过对常规生物样品前处理方式处理过的复杂样品进行检测，以及证明ionKey/MS系统分析稳定性良好。

本文讨论了EVOQ LC-TQ在反复进样马血浆样品条件下可维持的高灵敏度。含有克仑特罗的马血浆样品，去除蛋白后，未通过分流阀直接注射到系统中（稀释并进样）。对四条标准曲线进行了分析：开始时一条，每隔100个样品做一条。结果显示，使用EVOQ LC-TQ测试，在连续两天时间分布在400个马血浆样品中的四条标准曲线，响应因子的相对标准偏差（%RSD）成功达到<10%的评判标准，响应因子的%RSD<5%。

对这两种典型切尼-特纳光路结构进行理论计算和对比试验后，可得出：交叉型光路结构宽光谱范围内的分辨率呈“V”型，即中心波长处分辨率最高，边缘波长处分辨率最低，而M型光路结构在全光谱范围内变化较小，近似呈“一”型，即后者宽光谱范围内的分辨率一致性远好于前者。

使用Molecular Devices可进行多种实验，无标记细胞计数、ScanLaterTM 蛋白质免疫印迹检测技术、心肌细胞跳动和细胞毒性检测、细胞毒性检测、标记物表达、细胞计数与细胞形态观察、细胞增殖/细胞毒性、使用诱导多功能干细胞分化的细胞进行、细胞毒性试验、使用SpectraMax. i3多功能微孔板平台 检测内源性色氨酸含量、SpectraMax. i3多功能检测平台兼容均 相时间分辨荧光检测技术

Metabolomics allows researchers to interrogate thousands of potential biomarkers simultaneously, without a priori knowledge of the underlying biology or pathophysiology. Due to the complexity of the samples, people need outstanding mass resolution, mass accuracy, and sensitivity as well as sophisticated data analysis software. Agilent 6545 Q - TOF LC/MS system and Agilent MassHunter software are the perfect combination to fulfill the requirements. In this application, serum extracts from healthy subjects and samples with chronic kidney disease (CKD) at stage 3 and stage 5 are analyzed with 6545 LC/Q - TOF and 1290 Infinity LC system. The mass s pectrometer is tuned using the novel Swarm Autotune for optimal performance in the m/z range of the metabolites. Data was acquired in both positive and negative ionization modes with reference mass correction. The typical metabolomics workflow is ill ustrated here. Big sensitivity gains improve results The improved sensitivity of the 6545 Q - TOF LC/MS enables us to extract 5,817 features as opposed to 2,102 features on the previous generation of Q - TOF under the same column load in positive ionization mode. Even with a five - fold reduction of column load, we are still able to extract 2,489 features.

Histo-clearⅡ是一种脂肪族碳氢化合物和精油的混合物，具有淡淡的柠檬香味。Histo-clearⅡ作为组织切片脱蜡和透明的常用试剂，无毒、完全生物可降解，浸蚀性相对二甲苯来说较低，实验过程中对应的incubation time适当延长一点。价格适宜，更适合用量大的仪器使用。 Histo-clearⅡ作为脱蜡剂和透明剂，在湿封片时注意要选择能兼容的封片剂，推荐使用的封片剂有Omnimont、DPX、DEPEX,Histomount等等

众所周知，单克隆抗体在科研、疾病诊断以及治疗等方面具有非常重要的作用。单克隆抗体药物具有靶向性明确、低毒性和 不良反应少等优点，在肿瘤的生物治疗及靶向治疗中发挥重要作用。目前，抗体药物市场前景广阔，已成为制药行业中发展最 快、活力最强和技术含量最高的领域。为了获得具有特异性的抗体，首先需要筛选能够表达分泌特异性抗体的杂交瘤细胞系。实 验室常规的方法就是通过小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞的融合，获得杂交瘤细胞。通过在培养基里加入筛选压力，只有脾细胞和瘤细 胞成功融合的杂交瘤能够存活。筛选杂交瘤的主要挑战在于如何快速、高效地从成千上万的杂交瘤细胞里面找到生长良好、能够 分泌特异性抗体的克隆，并且尽可能确保为单克隆。 Molecular Devices为杂交瘤的筛选提供了全方位的高通量解决方案，能够最大化提高筛选特异性杂交瘤的效率，并且节省 筛选时间。ClonePix2是一个哺乳动物细胞筛选系统，通过在培养基中加入荧光标记检测试剂，能够通过荧光筛选并自动化挑取 表达分泌特异性抗体的杂交瘤克隆。CloneSelect Imager是一个无标记活细胞成像系统，能够客观、快速检测细胞在孔板里的生 长情况，并提供克隆单细胞来源证明，确保筛选稳定的单克隆用于下游进一步研究。此外，为了优化细胞的生长，Molecular Devices提供了CloneMedia和CloneMatrix两种型号半固体培养基用于支持杂交瘤细胞生长形成独立单个的克隆。

数据非依赖性的扫描模式（data-independent acquisition, DIA）是 近几年来发展的一种新的质谱数据采集方式。它的理念是用二级碎片离子进行蛋白相对/绝对定量。DIA 扫描模式中，超高分辨质谱对特定质量范围内的所有母离子进行碎裂，采集所有母离子的碎片离子，并快速地依次扫描相邻的母离子宽口内的所有碎片离子。DIA 的数据中包含了所有碎片离子的保留时间和强度信息。用非常小的质量偏差宽口（如 10 ppm）目标性地抽提同一肽段的多个子离子，计算子离子的强度，就能对该肽段进行鉴定和定量。DIA 定量相比传统的基于母离子强度的 DDA 定量有选择性好，定量准确等优点，所以 DIA 成为定量蛋白组学新的发展方向。

Thermo Fisher可提供： 1. 安全、灵活的临床样本前处理 2. 高灵敏的自动核酸提取方案 3. 自动化解决方案

抗体和蛋白生产的细胞系开发，特别是用于治疗性目的，确保细胞系起源于单个细胞或者单细胞繁殖是非常关键的。传统的克隆方法，例如有限稀释法和FACS，都是用统计分析方法确定单克隆性的可信度。本文重点介绍了CloneSelect Imager成像系统基于客观的成像图片更直观、准确地证实细胞系的单克隆性。

大鼠及小鼠麻醉剂量参考 IM:肌肉注射 IV:静脉注射 SC:皮下注射 IP:腹腔注射 药 物 剂量 途径 麻醉前给药 Atropine 0.002-0.005 mg/100 gBW 0.12 mg/100 gBW IM, IV,SC* IP* 镇静剂 Acepromazine Diazepam Ketamine 0.075 mg/100 gBW 0.5 mg/100 gBW 2.0 mg/100 gBW IM IP IM 注射麻醉剂 Ketamine Pentobarbital Thiopental Thiamylal 2.2-4.4 mg/100 gBW 10 mg/100 gBW 2.5 mg/100 gBW 1.5 mg/100 gBW 6.0 mg/100 gBW 2.5 mg/100 gBW 5.0 mg/100 gBW 2.5-5.0 mg/100 gBW IM IP IV IV

毛细管电泳法能够根据蛋白质的分子量快速分离蛋白质并在含有蛋白质的样品中进行蛋白质定量。该法是基于SDS蛋白复合物在一个狭窄的熔融石英毛细管填充低粘度凝胶，在施加电场的作用下进行差分迁移，对其在220 nm波长处的吸光度进行检测。由于低粘度凝胶的存在，SDS蛋白复合物仅根据它们的分子量大小进行分离，因此它也能够确定未知蛋白质的分子量。 与SDS-PAGE分离蛋白质相比，毛细管电泳具有几个重要的优点：1.完全自动化；2.直接蛋白质定量；3.无需染色；4.低分析成本；5.分析时间短。

通过在线测量来监控溶解氧、CO2 和浊度，这对于提高产量、质量和确保工艺过程安全至关重要。Ingold 与 Thornton 在线传感器广泛应用于制药、化工及食品和饮料行业，为过程控制提供精确、实时的信息。领先的光学技术确保测量能精确至痕量级。此外，智能传感器管理 (ISM) 最大限度减少了维护需求并提供诊断功能，以持续监控传感器耗损情况，同时确保在传感器的性能受影响之前将其更换。对于溶解氧而言，我们还提供便携式分析仪，以便需要的时候快速进行样品测量。

细胞的迁移运动不仅是细胞进行很多重要生理活动的基础，同时也是炎症反应和肿瘤发生等病理过程中的重要步骤和关键环 节。细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而 产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基 本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反 应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。 目前人们对恶性肿瘤的研究是多方面的，从癌症的产生到转移，血管供给以及分裂增殖都一直是医学和生物学研究的热点。 恶性肿瘤与良性肿瘤的最大区别就在于是否可以对周遭组织进行浸润，结果是形成边界不分明的癌组织，或是进入血管转移到远 端（见远端转移）。根据观察可将癌症浸润分为四步。首先癌细胞表面的粘附分子会减少，与周围的细胞彼此分离，被“解除束 缚”。同时癌细胞与基底膜的粘附却会增加，这是癌细胞通过增加自身基底面层粘连蛋白（laminin）受体实现的。然后癌细胞会 释放蛋白酶，用以降解细胞外基质成分，如Ⅳ型胶原酶，使基底膜受损，产生缝隙。最后是癌细胞阿米巴运动样的迁移，钻过基 底膜的缝隙，到达底下的间质组织。癌细胞此后会继续用蛋白酶为自己在间质组织开路，直到血管，然后它会以同样方式进入血 管，经血到转移后，又以同样方式出管。因此，癌症的形成与肿瘤细胞的迁移能力密不可分，这也成为了一个诊断和治疗癌症的 一个靶点。 研究细胞迁移的方法有很多，比如划痕法、实时细胞追踪、Transwell和细胞芯片等，本文将一一介绍现今比较主流的与细 胞迁移相关的实验方法。

Molecular Devices公司基于SpectraMax ®Paradigm® 多功能微孔板检测平台的基础上推出了一款使用滤光片作为其单色器，但又可随意调节其检测波长的Tune卡盒，这种最新的检测技术融合了滤光片的高灵敏度和波长扫描的高灵活性等特点。Tune检测卡盒克服了传统光栅型单色器的缺陷，可以方便研究人员在更广的波长范围内优化各种试验所需的最佳波长，且检测灵敏度也较光栅型系统提高了10倍以上。

众所周知MAGPIX多重磁珠检测系统具有高通量多通路的检测特点，可以在一小时内得出4800个分析结果。为了确保得到最佳试验结果，试验优化的关键步骤是如何在清洗过程中最大程度的减少微孔板中磁珠损失，从而提高MAGPIX磁珠的清洗效率。Molecular Devices公司推出的AquaMax2000/4000微孔板洗板机，能够有效的降低微孔板中磁珠的损失率，按照本文所示针对该仪器进行优化设置后，其微孔板中磁珠的损失率将小于5%

蛋白检测在制药和临床研究领域是一项非常重要的项目，而 Western Blot(WB)检测则是众多蛋白检测方法中最常见的一种。 目前，检测转印到WB膜上蛋白的技术众多，包括荧光标记、银染 和化学发光法等。可是，每一种技术都有其局限，人们一直致力 于寻找提高WBs定量准确度和动态检测范围的技术方法。这里， 介绍一种最新的在SpectraMax i3或Paradigm多功能酶标仪上检 测WBs膜的蛋白分析方法。膜上使用铕元素-螯合物或链霉素标 记二抗特异结合被研究的蛋白。铕元素标记具有长荧光寿命周 期，可至1ms级别，所以荧光的检测采用时间分辨的模式，从而 可以减少来自于自发荧光和其他短寿命周期的杂光的背景。WBs 膜被置于酶标仪内，然后使用TRF卡盒进行WBs膜优化扫描。此 方法不涉及酶的检测，加之铕元素-螯合物标记物具有很强的光漂 白抗性，因而信号十分稳定能至几周到几个月，这就允许对膜进 行重复扫描以及可能进行不同条带的强度对比以及根据标品进行 更精确的定量。TRF检测方式采用单光子计数模式，所以理论的 动态检测范围为>105。实际应用中，动态检测范围则受限于高含 量条带的荧光饱和以及非特异性结合造成的背景因素。由于不使 用CCD不会出现高光溢出现象，而这却是化学发光和普通荧光检 测的常见问题，所以此方法能够提供非常锐利的条带和出色的图 像质量。这一新颖的多功能酶标仪检测平台上的Sc a n l a t e r Western Blot检测系统以其操作简便、检测灵敏和信号的超高稳 定性，提供了出色的WBs检测性能表现，必将给多功能酶标仪在 实验室应用方面带来又一重大突破！

数字PCR是继普通PCR和qPCR(real time PCR，实时荧光定量PCR)之后的第三代PCR技术，与qPCR相比，数字PCR具有更高的灵敏度，且无需标准品，采用终点信号扫描计数，不依赖Ct值，能有效克服PCR抑制剂的影响，能灵敏地验出ASFV病毒，深蓝云生物科技开发非洲猪瘟病毒的数字PCR检测方法，尽早发现，有效防控。

本文将比较使用无标记细胞分析技术进行细胞计数与使用传统的荧光染料标记细胞核和整个细胞进行计数的区别。同样展示出如何通过无标记细胞分析技术来替代荧光染料标记的方法来获得化合物处理细胞后的IC50曲线。

赛默飞世尔科技是世界唯一能够提供涵盖样本库所需设备、耗材、软件、服务的厂商。 赛默飞世尔科技自建有第三方样本保存库，为样本库行业持续服务三十年，并获全球样本库行业 最佳实践奖。

Eppendorf epMotion 5075 VAC是新一代的全自动分子生物学工作站，能够实现高通量核酸分离纯化的无人操作，同时也是高通量操作实验室最佳的移液操作平台。本文详细描述了epMotion 5075 VAC工作站在提取96个样品的质粒DNA、BAC DNA以及PCR产物的纯化三个高通量实验的应用，对抽提和纯化的核酸得率、质量和操作方式做了详细的评测。

蛋白质作为所有生命周期的直接参与者，是生命现象和生物规律变化的标志物，在生命科学的大环节中占据着举足轻重的地位。从蛋白质的角度去描述生物的变化，业已成为研究生命科学的主要手段。处于不同时期、不同条件下的功能性蛋白质，其表现形式及丰度水平千变万化、生理功能模块和介导信号通路纷繁复杂，因此，深入研究蛋白质乃至对生物标志物监测充满着艰辛与挑战。与早期关注蛋白质的发现过程不一样，目前生物化学家越来越重视功能性蛋白质在表达量上的变化，蛋白丰度的变化更能体现出生命变化的多样性。 生化实验室最根本的分析任务之一就是蛋白的定量分析，但以往的抗体免疫化学法 (Western Blot) 表现出较差的特异性和较高的测量误差 (CV > 20 - 40%)。串联质谱多反应监测 (MRM/SRM)定量方法，一直以来就是定量的黄金标准，在小分子定量上早已成熟使用，随着液相色谱和串联质谱技术的提高，越来越多的生蛋白（肽段）定量的意义及出现 MRM 质谱技术平台的缘由化实验室开始大量采用串联质谱技术为基础的蛋白（肽段）定量流程。MRM 肽段定量方法的优点很多，它利用蛋白专属的肽段序列完成定量分析，一次运行可同时分析几十到几百种的蛋白，具备高通量的定量分析能力。特别是 2012 年，方法论领域的权威期刊《Nature Methods》将基于三重四极杆质谱 (QQQ) 平台的 MRM/SRM 定量思路的靶向蛋白质组学 (Targeted proteomics) 技术列为当年的年度方法，确立了目标蛋白定量分析的权威策略。近年来该杂志陆续发表了多篇论文，对 QQQ-MRM/SRM 思路成功应用于目标蛋白定量分析进行了持续报道。随着质谱灵敏度的大幅提高，以大流速常规液相色谱 (LC) 取代纳流液相色谱 (Nano-LC) 所组成的 MRM 肽段定量方法，代表着蛋白定量分析的最高技术标准，极大地促进生物化学及各种新应用快速向前发展，广泛应用在蛋白质组学、生物制药等研究领域，并迅速朝着诸如食品、环境、临床等更宽的应用范围发展。

The vertebrate limb bud arises from lateral plate mesoderm and its overlying ectoderm. Despite progress regarding the genetic requirements for limb development, morphogenetic mechanisms that generate early outgrowth remain relatively undefined. We show by live imaging and lineage tracing in different vertebrate models that the lateral plate contributes mesoderm to the early limb bud through directional cell movement. The direction of cell motion, longitudinal cell axes and bias in cell division planes lie largely parallel to one another along the rostrocaudal (head-tail) axis in lateral plate mesoderm. Transition of these parameters from a rostrocaudal to a mediolateral (outward from the body wall) orientation accompanies early limb bud outgrowth. Furthermore, we provide evidence that Wnt5a acts as a chemoattractant in the emerging limb bud where it contributes to the establishment of cell polarity that is likely to underlie the oriented cell behaviours.