普鲁兰多糖中分子量检测方案(液相色谱仪)

技术简报」WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. [技术简报」 使用凝胶渗透色谱 (GPC) 系统对普鲁兰多糖进行分子量测定 应用优势 可用于普鲁兰多糖的质量控制方法 Empower的GPC选自自动进行结果计算 沃特世解决方案 ACQUITY Arc GPC系统 Waters 2414示差折光检测器(RI) Waters Ultrahydrogel 色谱柱 带GPC选项的Empower3色谱数据软件 关键词普鲁兰多糖、GPC、药用辅料 简介 普鲁兰多糖(pullulan)是一种由出芽短梗霉作为生产菌株，在发酵过程中利用生物糖发酵所产生的类似葡聚糖、黄原胶的胞外水溶性粘质多糖，其分子结构是以麦芽三糖为单体的直链多糖，这些单体之间以α-1，6-糖苷键连接而成，并且麦芽三糖是由葡萄糖以α-1，4-糖苷键连接而成的，分子量2万-200万。 由于上述的结构特点，该多糖有两个重要的特性：结构上富有弹性，溶解度比较大。普鲁兰多糖的成膜性、阻气性、可塑性、粘性均较强，并且具有易溶于水、无毒无害、无色无味等优良特性，已广泛应用于医药、食品、轻工、化工和石油等领域。 本纪要基于ACQUITYArc的GPC水相系统，应用Waters Ultrahydrogel色谱柱，对市售普鲁兰多糖的分子量分布进行测定，并使用Empower软件进行相对平均分子量的计算。 实验实验仪器 实验实验仪器 2414示差折光检测器 ACQUITY Arc系统 ACQUITY Arc系统为具有四元溶剂管理器的UHPLC系统，用以填补HPLC和UPLC之间的性能差距，双流路设计，可以通过软件进行HPLC和UHPLC的快速切换，有效地进行任何LC平台的方法转换。Arc系统在用于水相GPC时，可直接使用。 实验条件 RI流通池温度： 30C 流动相： 100 mM 的硝酸钠水溶液 流速： 0.45 mL/min 色谱柱： Waters Ultrahydrogel 1000柱，7.8×300 mm 柱温： 30°C 样品稀释剂： 100 mM 的硝酸钠水溶液 进样量： 30 pL 数据处理软件 Empower 3色谱数据软件 样品 1mg/mL的普鲁兰多糖 普鲁兰多糖标样：分子量6，000、21，000、47，000、194，000、708，000 结果与讨论 普鲁兰多糖的标样的标准曲线， Empower 3自动根据标样保留时间等信息，计算标准曲线，如图1所示。 图1.普鲁兰多糖的标准曲线信息。 普鲁兰多糖样品的色谱图如图2所示，利用Empower 3中GPC选项的功能，根据标准曲线来计算普鲁兰多糖样品的分子量分布，软件会自动计算出对应的重均分子量(Mw)、数均分子量(Mn)、多分散性等相关参数。 连续5针进样的重复性谱图如下，通过计算Mw的RSD小于0.5%，说明此方法重复性良好。 图3.普鲁兰多糖样品连续进样5针重复性色谱图。 使用ACQUITY Arc连接2414示差折光系统，结合Ultrahydrogel水相柱可以对普鲁兰多糖进行分析，同时结合Empower及其GPC选项可自动进行分子量的快速计算，此方案可作为药用辅料普鲁兰多糖的质量控制方法。。 扫一扫，关注沃特世微信 沃特斯中国有限公司 沃特世科技(上海)有限公司 北京：010-52093866 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 上海：021-61562666 广州：020-2829 6555 成都：028-67653588 香港：852-29641800 免费售后服务热线：800(400)820 2676www.waters.com 使用凝胶渗透色谱(GPC)系统对壳聚糖进行分子量测定 Waters和The Science of What’s Possible是沃特世公司的注册商标。所有其他的商标属于各自的所有者。◎特世公司 本纪要基于ACQUITY Arc的GPC水相系统，应用Waters Ultrahydrogel色谱柱，对市售普鲁兰多糖的分子量分布进行测定，并使用Empower软件进行相对平均分子量的计算。