蔬菜中农药残留检测

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关，正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷和氨基甲酸脂类农药存在。

GPC-GCMS是GPC提纯系统与 GC/MS在线连接而成的装置。从试样的提纯到农药的分析完全自动化。本系统是应用食品中残留农药快速筛选的“食品中残留农药快速分析法”（1997年，厚生省通知）开发的装置。更进一步加快了分析速度，简化了操作，实现了农药残留的多组分的同时分析。

《岛津分析通讯》是由日本岛津制作所为中国分析测试界人士提供的免费赠阅刊物。创建本刊的目的是向中国分析界同仁介绍岛津推出的新产品和先进的应用技术。本刊的主要内容包括：岛津新产品的介绍、应用报告、学术讨论以及分析测试技术经验交流等。我们希望《岛津分析通讯》能在中国的分析测试研究事业中发挥作用，同时也期待着通通过本刊更进一步实现岛津与各用户在业务和感情上的沟通。 作者:林竹光1 范玉兰1 马玉1 金珍1 谭君1 陈美瑜1 陈招斌1 涂逢樟2 刘勇3 1 厦门大学化学化工学院化学系,现代分析科学教育部重点实验室 2 龙岩学院化学与材料工程系 3 广州市疾病预防控制中心 摘要：将气相色谱-负化学离子源-质谱法（GC-NCI-MS）应用于蔬菜水果中九种有机玻璃磷农药残留的分析，初步解析了这些农药的NCI-MS阴离子结构和断裂机理，并且初步控计了GC-NCI-MS法分析蔬菜水果中有机磷农药残留时基体效应的影响问题，采用空白试样基体匹配校准曲线（MC）法定量分析，有效地降低了试样基本效应的影响。

《岛津分析通讯》是由日本岛津制作所为中国分析测试界人士提供的免费赠阅刊物。创建本刊的目的是向中国分析界同仁介绍岛津推出的新产品和先进的应用技术。本刊的主要内容包括：岛津新产品的介绍、应用报告、学术讨论以及分析测试技术经验交流等。我们希望《岛津分析通讯》能在中国的分析测试研究事业中发挥作用，同时也期待着通通过本刊更进一步实现岛津与各用户在业务和感情上的沟通。 《GC/MS内标法同时测定食品中31种有机磷农残的实验方法研究》 作者：李永香1 黄勇2 李发生3 房其美1 王玉红4 明佳佳1 1.郑州市疾控中心 2.河南省公安刑事科学技术研究所 3.河南省疾控中心 4.郑州市农产品质量检验中心 摘要:本文研究了31种有机磷农药的色谱和质谱行为，并根据大量实验结果制定出了GC/MS内标法同时测定该31种农药残留的GC/MS方法，不仅克服了气相色谱测定农药残留的缺点，也克服了GC/MS外标法在测定前处理过程、进样过程、仪器状态变化、试剂变化等过程中引进的保留时间漂移等各种无法克服的干扰和误差，在实际样品含量的测定范围内（0—5.0mg/kg）线性良好（相关系数在0.9936-0.9999之间）；全扫描模式仪器定性检出下限(S/N=3,n=5)：1.59×10ˉ 3～1.22×10ˉ1ng之间；仪器定量检出下限(S/N=10,n=5)：5.28×10ˉ3～4.08×10ˉ1ng之间；全扫描模式方法定性检出下限(S/N=3,n=5)：1.99×10ˉ3mg/kg～1.37×10ˉ2mg/kg之间；方法定量检出下限(S/N=10,n=5)在：6.61×10ˉ3mg/kg～4.78×10ˉ2mg/kg之间；对加混标终浓度为0.5mg/kg样品重复性条件下测定两次，测定结果的绝对误差小于各算术平均值的5.2%-13.5%，内标回收率指示物回收率在72.70%--97.58%之间；不同样品基质中，目标化合物平均回收率在93.76～108.9%之间。

春节前，武汉查出3596.9公斤海南豇豆含禁用农药水胺硫磷，随即全部销毁。为防有毒豇豆再次流入，今年5月6日前，海南豇豆将不能出现在武汉市场。对此，海南农业厅质量处处长称，问题豇豆是由于检测设备的误差导致。而继武汉之后，合肥、杭州、广州均发现了问题豇豆。农业部已下发紧急通知，要求加强农产品生产环节的监管。 水胺硫磷(isocarbophos)为一种速效广谱杀虫杀螨剂，又称作羧胺磷，在农业害虫防治方面担当着重要的角色。但各种资料中均明文规定不可以用于蔬菜。在海南的蔬菜中发现水胺硫磷，明显是在蔬菜种植过程中滥用了此类农药，从而造成了带毒蔬菜。 实验前处理主要参照NY/T761-2004 （蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法）及GB/T 5009.218-2008（水果和蔬菜中多种农药残留量的测定）方法，使用凝胶净化（GPC）方法除去大部分的干扰物质，将处理好的样品用HPLC进行检测。

氨基甲酸酯农药源于氨基甲酸，杀虫机理与有机磷杀虫剂相似。其广泛应用于农业生产，残留物转移到食品中，危害人类健康。本应用文献介绍了一种使用Waters ACQUITY QDa 质谱检测器结合ACQUITY Arc 系统定量分析氨基甲酸酯农药的分析方法。

有机锡类农药是用于杀菌和杀螨的含锡有机化合物农药，包括三唑锡、三苯基羟基锡、苯丁锡等这类化合物常用做杀螨剂类农药。常用检测的方法有气相色谱法、气质联用法，但由于蔬菜水果基质比较复杂，用气相和气质的方法干扰大，三重四极杆气质联用仪具有抗干扰能力强、准确、灵敏度高等优点，能够有效的检测蔬菜水果中有机锡类农药残留。

本文采用QuEChERS前处理方法，结合岛津程序升温进样-三重四级杆气相色谱质谱仪（PTV-GC-MS/MS）建立了快速检测蔬菜中54种农药残留同时检测的分析方法。其中程序升温(PTV)进样口的溶剂消除不分流进样模式可以在进样时低温去除乙腈，以提高色谱柱耐用性。另外，与单级质谱相比，三重四极杆串联质谱具有抗干扰能力强、灵敏度高和高通量离子传输效率等特点，这使其在复杂基质背景下仍能完成目标化合物的准确鉴定。

采用赛默飞世尔新型的气相色谱仪检测果蔬中的农药残留，准确定量目标物，RSD 值小，灵敏度高，无杂质峰干扰。石墨碳/ 氨基复合固相萃取小柱能够去除果蔬中的基质干扰，方法简单，自动化程度高，净化效果理想。

本方法采用CSR 大体积进样技术结合GC-NPD 测定了含硫基体中有机磷农药的含量，采用大体积进样技术提高仪器检测灵敏度，GCNPD 检测器降低含硫化合物的干扰，两种技术的结合大大提高了两种技术的有机结合大大提高了方法的选择性和灵敏度。17 种有机磷农药的检出限在1.0~4.0 μg/kg 范围之间，可远远满足国内外各种法规的限量要求。用空白样品加标方法进行回收率和精密度实验。当添加水平在 5 μg/kg 和10 μg/kg 时，17 种有机磷农药回收率在72.8%～105.2% 之间，相对标准偏差 3.6%～9.5%。该方法测定准确度高，重复性好，灵敏度高，适合含硫复杂基体中有机磷农药残留量的检测，值得推广应用。

目前通用的农残分析流程是用QuEChERS样品前处理方法对样品进行除杂和富集，前处理最后一步通常是以强极性溶剂如乙腈作为富集溶剂，离心过滤后进样。然而由于溶剂效应的影响，普通液相色谱进样体积一般小于等于20 μL，超高效液相色谱进样量一般为1~5 uL。使用岛津大体积进样分析系统，可在普通岛津UHPLC系统上改装完成，借助岛津独有混合器实现柱头聚焦，富集、分离同步完成；可直接进样200 μL强溶剂样品，且不影响峰型与分离效果，较大程度提高方法灵敏度。

有机氯农药(Organochlorine Pesticides)是一种广谱、高效、廉价的农药，曾在世界范围内广泛使用。但是，有机氯农药稳定性好，且容易在食物链中蓄积，最终进入人体并对人体产生慢性毒害。由于此类农药的理化性质稳定，半衰期较长，容易形成残留，因此有机氯农药超标现象时有发生。 本文参照NY761-2008采用固相萃取对白菜样品进行前处理，再用GC-ECD进行检测，建立了一套白菜中有机氯农药残留的检测方法。先采用QHS-66多样品快速均质系统进行均质提取，再利用Labtech Sepaths UP-6V 柱膜通用全自动固相萃取系统对白菜中的六六六、滴滴涕进行固相萃取净化。方法中由于使用了Labtech Sepaths UP-6V全自动固相萃取系统简化了固相萃取净化步骤，同时具备在线浓缩省去了很多人工操作，不仅提高效率而且减少人为误差。**方法的回收率及平行性良好，适合蔬菜中有机氯的检测。

本文采用岛津GCMS-TQ8050结合SHIMADZU-GL WondaPak QuEChERS前处理包建立了黄瓜中的217种农残同时检测的方法。该方法简单方便，分析速度快，抗干扰能力强，检出限低，重现性好，回收率高，能够有效的监测蔬菜水果中217种农残的含量。

岛津公司GCMS-TQ8040三重四极杆气质联用仪的多反应监测模式（MRM）能有效降低背景干扰，具有更高的选择性和分析灵敏度。结合岛津Smart MRM数据库农残版，在无需标准品的情况下，可快速建立GC-MS/MS法同时筛查蔬菜中246种农残。

在农残标准数量方面，我国仍处于起步阶段。据报道，中国的农残限量指标分别是CAC 的7.0%、欧盟的9.9%，涉及到的农药种类分别是CAC 的35.6%，欧盟的68.4%。2014年颁布实施的GB 2763《食品中最大农药残留量》规定了387 种农药在284 种( 类) 食品中3650 项限量指标；而2014 年正式实施的香港规例则对584 种( 类) 食品农产品中的360 种农药，制定了7083 项残留限量标准。未来，我国政府仍将保持较快的农药标准制修订的速度，逐步缩小同发达国家的差距。这无疑对农药残留等食品安全的检测工作带来了巨大挑战。

本研究利用气相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（Thermo Scientific TM Q Exactive-GC）建立了 435 种农药化合物精确质量数据库，并结合相应的数据处理软件，在此基础上建立了农药多残留快速筛查流程。实验对检索中所需的各项参数进行了优化，用以提高筛查准确度，避免假阳性和假阴性结果的产生。实验结果表明，在实际样品检 测中，分辨率 60,000 FWHM（200 m/z ）及以上， 质量准确度 < 2.0 ppm，筛查准确度会有大大改善。同时仍然可以保持高灵敏度，完全满足食品中农药残留检测要求。筛查方法同时使用了精确质量数和偏差，保留时间窗口，同位素分布与同位素丰度信息等参数，进而获得快速、准确的结果。

蔬菜中的农药残留问题一直是人们重视的食品安全问题之一。随着人们对蔬菜日益增加的需求，为保证蔬菜的产量，很多生产者都使用农药。而有机氯和菊酯类农药是被广泛使用的农药种类之一，是大部分检测所需要经常检测的项目。有机氯和菊酯类农药的常规检测项目包括六六六、百菌清、三唑酮、联苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、氟氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等的检测。 本文使用 Agilent MEGA BOND ELUT Florisil 固相萃取小柱和气相色谱系统，建立了仅通过一次前处理即可同时测定蔬菜中 13 种有机氯和菊酯类农药残留量的分析方法。

本文在 NY/T 761-2008 标准方法的基础上，考察了 Agilent Poroshell 120 液相色谱柱在农药残留检测中的应用效果，建立了蔬菜水果中 7 种氨基甲酸酯类农药的快速、高通量分析方法。采用 Poroshell 120 色谱柱可以显著节省分离时间并降低溶剂消耗，满足当今液相色谱及液质联用快速高通量分析氨基甲酸酯农药的要求。

本文采用含有 PSA 的 Agilent Bond Elut QuEChERS 对样品进行分散固相萃取净化，并结合高效快速液相色谱柱、LC/QQQ 实现对苦瓜样品中农药残留的快速分析。该方法简单、快速、灵敏、准确、环境污染少，可有效简化前处理步骤，在短时间内即可完成38 种农药残留的定性与定量检测，且所用的 RRHD SB-C18 色谱柱耐用性强，分离效果好，能大幅度降低检测成本。

本文采用乙腈提取，使用配置了 Agilent DB-1701P 色谱柱的气相色谱 - 火焰光度检测器系统对蔬菜中 10 种有机磷农药进行有效分离及残留量分析，线性相关系数 (R2) 为0.99917 ~ 0.99988，最低检出限可达 0.001 ~ 0.02 mg/kg，完全满足我国农残限量标准要求中蔬菜农残检测的需要。文中所述方法具有操作简便、灵敏度高、选择性强以及分离效果好等特点。

该方案包含LC-MS/MS分离分析条件、MRM参数、校准曲线信息、方法检出限和定量限、仪器精密度及MRM触发产物离子扫描并使用谱库搜索进行定性等相关数据。

使用PrepElite-GVS全自动凝胶净化定量浓缩固相萃取系统，参考《NY/ T761-2008》方法，对白菜中的克百威进行回收率测定

赛默飞推出针对香港《食物内除害剂残余规例》的基于TSQ 8000 evo串接气质的整体解决方案及方法包应用，通过采用先进的Thermo Scientific? TSQ 8000 Evo三重四级杆串接气质，帮助客户尽快得建立简便的操作流程，进一步加快实验室分析效率。

本研究利用气相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（Thermo Scientific Q Exactive-GC）建立了 435 种农药化合物精确质量数据库，并结合相应的数据处理软件，在此基础上建立了农药多残留快速筛查流程。实验对检索中所需的各项参数进行了优化，用以提高筛查准确度，避免假阳性和假阴性结果的产生。实验结果表明，在实际样品检测中，分辨率 60,000 FWHM（200 m/z）及以上， 质量准确度 < 2.0 ppm，筛查准确度会有大大改善。同时仍然可以保持高灵敏度，完全满足食品中农药残留检测要求。筛查方法同时使用了精确质量数和偏差，保留时间窗口，同位素分布与同位素丰度信息等参数，进而获得快速、准确的结果。

本研究基于 Thermo Scientific 最新气质高分辨产品 Q Exactive-GC，探索了精确质量数据库建立以及结合数据库进行筛查的相关流程。

在本研究中，我们评估了 Thermo Scientific Q Exactive GC 组合四极杆-Orbitrap 质谱仪（MS） 在准确筛查适合 GC 分析的农药时的表现。Q Exactive GC Orbitrap MS 能够提供的质量分辨率高达 120,000（m/z 200，峰高一半处的全峰宽，FWHM） ，因而能够实现高准确度的质量测定，从而有效地在复杂基质中将被分析物与共流出的等质量数干扰物等杂质分离开。高扫速和单次目标分析物扫描内的高动态范围（> 5000）也都有助于从复杂基质中检出痕量化合物。

稳定易用的ionKey/MSTM系统大大促进了micro-LC在高通量食品安全实验室中的应用。相对现有的2.1 mm内径色谱方法，溶剂消耗至少降低10倍。样品和内标物消耗达到微升级，进一步节约实验室成本。提高农药信噪比，相比常规的2.1 mm内径色谱方法，灵敏度平均提高8倍。

赛默飞 TSQ Endura LC-MS/MS是基于主动离子管控技术（Active Ion Management, AIMTM）开发的全新一代液质联用系统，以其领先的灵敏度、超高的扫描速度与出色的稳健性，全面满足复杂基质中多农残高通量检测的各种技术挑战，在食品安全领域中展示出了巨大使用价值与广阔应用空间。pQuan数据库和方法包本着源自中国、服务中国的宗旨，以中国食品安全领域中的农残检测需求为导向，以GB 2763-2014、GB/T 20769-2008等标准中收载的常见农残与化学品为列表蓝本，目前收录了近500余种化学品的LC-MS/MS 检测方法，包括SRM 离子对、色谱保留时间、CAS 编号、分子式与基本用途等完备信息。用户可根据项目需求，拿来即用，在TraceFinder 软件下灵活地定制、创建各种农残检测方法。本文展示了基于此pQuan数据库开发的一站式农残检测解决方案，并将其用于菜椒基质中440种农残同时定量的高通量检测分析。

Q Exactive 具高分辨率、高质量精度、高灵敏度和宽动态范围等特点，是兼具定性和定量功能的质谱分析平台，适合食品安全领域非目标化合物大规模筛查、确证和定量分析。本文采用Q Exactive 和筛查软件TraceFinder，建立了6 种蔬菜瓜果基质中555 种农药残留同时筛查和确证的方法，该方法简单、快速、准确、灵敏度高，能同时完成对多农残的定性定量分析。并且建立了该555 种化合物含化合物名称、分子式、精确质量数、保留时间和碎片离子等信息的数据库。本文的实验条件和数据库具有较好的重现性，不同仪器、不同实验室和不同的分析人员均能得到高匹配的筛查结果，节省了方法开发、数据库建立的时间和大量标样购买的成本，便于方法的大规模推广和应用。

采用micro-LC技术进行操作对于最大程度降低实验室溶剂消耗有多方面的好处。对于农药筛查应用，Waters ionKey/MS系统采用降低的2.3 μL/min流速，这可以大大降低溶剂消耗并减少有害废液的处理，显著节约实验室成本。 本应用纪要中，一种农药混合物被加标至多种复杂程度不同的食品基质中。通过初始工作对iKey分离设备和传统2.1 mm内径ACQUITY UPLC色谱柱进行比较，对50种农药的单独评估结果表明，前者灵敏度相对2.1 mm方法平均提升了8倍。ionKey/MS系统的稳定性和性能也通过一系列基质得到进一步测试。