蔬菜中15种氨基甲酸酯农药检测方案(液质联用仪)

「应用纪要WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 「应用纪要] 黄德凤章晴 应用优势 使用ACQUITYQDa质谱检测器无需柱后衍生，可以同时检测15种氨基甲酸酯农药，检出限低于化合物限量要求。 ACQUITY QDa质谱检测器基质效应小，抗干扰能力更强，可以实现更简单的样品前处理方案。 通过方法学验证，获得非常好的样品添加回收率和重现性。 沃特世解决方案 ACQUITYARc系统 ACQUITY QDa质谱检测器CORTECST3色谱柱 DisQuE分散式固相萃取 关键词 ACQUITYQDa质谱检测器，氨基甲酸酯，蔬菜， DisQuE， CORTECST3色谱柱 简介 氨基甲酸酯农药源于氨基甲酸，杀虫机理与有机磷杀虫剂相似。其广泛应用于农业生产，残留物转移到食品中，危害人类健康。，o氨基甲酸酯的结构通式如下，"R"表示烷基或芳香基团。 图1.氨基甲酸酯结构通式。 目前，很多实验室依据《NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》方法中的第三法，即液相色谱-柱后衍生法检测氨基甲酸酯农药。液相色谱方法容易受到复杂基质的挑战，比如基质干扰目标物色谱峰的问题。质谱检测方法可提供更好的选择性，有助于目标化合物和基质的确认。质谱尤其是串联四极杆质谱用于解决基质干扰问题，但受限于成本，许多常规分析实验室无法大量装备整套的高档质谱系统。常规的氨基甲酸酯农药检测仅需满足10pg/kg的法规限量值，不需要高端质谱系统的灵敏度水平。此外，培训员工的困难是由液相色谱方法转为质谱检测的又一个很大的挑战。 "ACQUITYQDa是沃特世(Waters)最新的质谱检测器，不同于复杂的质谱仪系统， ACQUITYQDa质谱检测器的使用和维护和通常的液相色谱检测器――如紫外检测器一样简单。如此一来，常规液相色谱实验室可以方便的获得质谱检测能力。使用ACQUITYQDa质谱检测器无需柱后衍生，可以同时检测15种氨基甲酸酯农药，检出限低于化合物限量要求。同时，质谱检测器的抗干扰能力也使更简单的样品前处理方案成为可能。 本应用纪要中，我们介绍了一种使用Waters ACQUITY QDa 质谱检测器结合ACQUITY Arc 系统定量分析氨基甲酸酯农药的分析方法。图2是15种氨基甲酸酯的结构式。 Propamocarb Aldicarb-sulfoxide Aldicarb-sulfone Oxamyl MethomylCarbofuran-3-hydroxy Pirimicarb Aldicarb Metolcarb PropoxurCarbofuran Carbaryl Isoprocarb Methiocarb Fenobucarb 实验 LC条件 系统： ACQUITY Arc 色谱柱： CORTECST3， 3.0X150 mm，2.7 um 进样量： 5uL 温度： 40°C 流动相： A：2mM甲酸铵水溶液， 含0.1%甲酸 B：2mM甲酸铵甲醇溶液， 含0.1%甲酸 流速： 1.0mL/min 梯度： 流动相B初始值为5%并保 持1分钟，5分钟时线性梯 度增至90%B，保持至8分 钟，然后立即降回5%B，保 持并再平衡至12分钟。 MS条件 仪器： ACQUITYQDa 系统 电离模式： 电喷雾模式(ES+) 毛细管电压： 0.5kV 离子源温度： 120°C 探针温度： 600°C 采样频率： 10 Hz 本实验中所用的MS锥孔电压和监测离子如表1所示. 分析物名称 SIR监测离子 锥孔电压V 监测离子 霜霉威 189.2 10 母离子 涕灭威亚砜 132.0 20 碎片离子 涕灭威砜 148.0 20 母离子 杀线威 237.06 5 母离子 灭多威 163.1 5 母离子 3-羟基克百威 163.0 20 碎片离子 抗蚜威 239.2 10 母离子 涕灭威 116.0 10 碎片离子 速灭威 166.1 10 母离子 残杀威 210.08 5 母离子 克百威 222.3 10 母离子 甲萘威 144.9 20 碎片离子 异丙威 194.1 10 母离子 灭虫威 169 20 母离子 仲丁威 208.3 10 母离子 仲丁威表1.分析物的质谱参数。样品制备样品提取 称取15g样品至50mL离心管内，加入10mL水(加水量取决于样品含水量，如样品含水量大于80%则无需加水)和15 mL 含1%乙酸的乙腈溶液，振摇1分钟。加入DisQuE 试剂袋(186006812)，剧烈振摇1分钟，然后在3000rcf转速条件下离心10分钟，移取1mL上清液至DisQuE净化管(186008071)。涡旋1分钟，再以3000rcf转速条件离心10分钟，上清液加水稀释4倍，稀释液过滤后转移至样品瓶，待分析。 使用空白基质匹配的校正曲线进行定量，方法验证的添加浓度应低于化合物限量要求以验证法规依从性。每个化合物的校正曲线浓度范围是1-100 ug/L。线性方程如表2所示。 结果与讨论 仪器条件优化 样品分析前，需要先优化离子源条件。氨基甲酸酯类农药容易在源内裂解，因此选择监测离子的时候可以根据实际情况加以优化。比如：在优化涕灭威砜的监测离子时，可以观测到3个主要离子，最终选择m/z148的碎片作为监测离子是因为在实际样品分析中发现，这个监测离子受到的基质干扰更小，并且灵敏度也比较好。如图3所示。 方法中对每种化合物的监测离子都进行了优化，最终结果列于表1中。 图3.涕灭威砜监测离子优化选择。 基质效应和线性 基质效应是食品安全分析中影响结果准确性的最主要因素，同时业可以用来评价分析方法的稳定性和可靠性。本应用纪要测试了每种氨基甲酸酯类农药的基质效应。结果表明，使用ACQUITY QDa质谱检测器分析蔬菜基质中氨基甲酸酯类农药，各化合物的基质效应应全能够满足外标法准确定量的要求。结果见表2。 基质效应 基质效应 基质效应 标准曲线 玉米粉 大白菜 番茄 R² (%) (%) (%) 涕灭威 (0.0) 3.3 (2.7) 0.9995 涕灭威亚砜 6.3 (2.3) (0.4) 0.9996 甲萘威 9.0 2.2 (3.8) 0.9992 涕灭威砜 3.5 12.7 1.0 0.9994 3-羟基克百威 6.1 5.1 (26.2) 0.9993 灭多威 3.5 7.6 0.3 0.9995 速灭威 1.5 5.9 (0.1) 0.9994 灭虫威 3.6 4.5 (2.4) 0.9995 霜霉威 9.2 5.2 (31.7) 0.9996 异丙威 6.4 (0.5) (73.9) 0.9995 仲丁威 (0.9) 4.1 (5.9) 0.9996 残杀威 18.5 6.6 5.9 0.9982 克百威 1.2 7.4 (22.8) 0.9990 杀线威 5.9 11.0 (2.3) 0.9994 抗蚜威 (1.3) 13.5 1.9 0.9995 表2.3种基质的基质效应。 分析物回收率和重现性 实验通过在空白基质中添加标准品来测定准收率。添加浓度分别是5.0 pg/kg、10.0 ug/kg和20.0 pg/kg，每个添加水平做3个平行样品。。所有样品采用上述方法处理，以基质匹配标准曲线计算目标物浓度。三水平的平均回收率和精密度结果见表3。 106.2 5.5 玉米粉 回收率(%) 大白菜 回收率(%) 番茄 回收率(%) 5ug/kg 10 ug/ kg 20ug/ kg RSD (%) 5 ug/kg 10ug/ kg 20ug/ kg RSD(%) 5 ug/kg 10 pg/ kg 20ug/ kg RSD(%) 涕灭威 92.1 94.5 1.4 107.9 105.3 102.6 2.5 90.9 93.7 95.3 2.4 涕灭威亚砜 91.1 5.2 86.9 88.1 92.8 3.4 88.1 90.5 91.5 1.9 甲萘威 96.6 3.1 108.5 103.0 104.3 2.8 88.9 95.3 97.9 4.9 涕灭威砜 72.5 81.6 91.6 11.7 99.1 94.4 89.8 5.0 83.3 91.3 91.5 5.3 3-羟基克百威 87.0 93.3 95.3 4.7 83.3 96.2 102.1 10.2 a 80.3 91.5 9.2 灭多威 93.1 9.3 100.0 97.1 100.1 1.7 83.5 89.7 94.0 5.9 速灭威 93.8 12.6 101.1 103.0 1.1 85.6 93.9 96.2 6.1 灭虫威 88.7 95.6 96.4 4.5 100.7 106.2 2.6 89.5 92.2 97.5 4.4 霜霉威 73.1 73.8 91.4 93.7 88.5 92.6 76.4 2.4 79.8 8.3 85.2 75.6 78.7 6.1 异丙威 98.1 3.6 112.2 106.8 2.5 b b b b 仲丁威 96.6 4.4 107.5 0.5 98.0 99.4 100.9 1.4 残杀威 94.7 95.7 96.2 0.8 104.5 94.1 3.1 克百威 98.8 8.5 95.4 84.7 94.8 14.1 杀线威 4.3 95.6 96.8 0.9 抗蚜威 88.6 95.4 4.3 124.5 97.2 97.4 1.7 表3.回收率和再现性。 注：a和c表示该添加水平下基质干扰过大，无法计算回收率。 b表示所选用的番茄空白基质中有较高含量的异丙威，导致无法计算回收率。 典型色谱图 图4是玉米样品中添加浓度为5.0 ug/kg的典型色谱图，该浓度已经低于化合物法规限量要求。该结果进一步表明15种氨基甲酸酯类农药完全可以适用ACQUITY QDa 质谱检测器检测，并且灵敏度结果令人满意。 图4.符合法规限量值的5 ug/kg加标样品的典型色谱图。 ( 结论 ) 本方法使用DisQuE分散固相萃取方法进行样品制备， ACQUITYQDa质谱检测器检测，无需衍生化处理，适用于氨基甲酸酯类农药的快速筛查定量分析。 通过方法学验证，表明本应用纪要推荐的方法准确可靠，适合用来替换《NY/T761-2008》方法中的柱后衍生氨基甲酸酯农药检测方法。 扫一扫，关注沃特世微信 沃特斯中国有限公司 沃特世科技(上海)有限公司 北京：010-52093866 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. 上海：021-61562666 广州：020-28296555 成都：028-67653588 香港：852-29641800 免费售后服务热线：800(400)8202676WWw.waters.com 使用DISQUE净化方法和ACQUITYQDa质谱检测器快速定量分析蔬菜中氨基甲酸酯农药 氨基甲酸酯农药源于氨基甲酸，杀虫机理与有机磷杀虫剂相似。其广泛应用于农业生产，残留物转移到食品中，危害人类健康。本应用文献介绍了一种使用Waters ACQUITY QDa 质谱检测器结合ACQUITY Arc 系统定量分析氨基甲酸酯农药的分析方法。