气相离子迁移谱，快速鉴定水产品产地！

核污水排海，海鲜还能吃吗？核污水排海引发消费者对水产品食品安全的担忧。国家加强水产品质量安全管控态度坚定，各部门联合，共同健全海洋生态监测体系。水产品产地、品质把控等在当下变得愈发重要。气相色谱-离子迁移谱技术广泛应用于食品风味分析领域，具有快速、便捷、可视化等优势，可为水产品新鲜度、货架期、品种品质、等级区分、加工工艺优化以及产地鉴别等提供重要数据支撑。以快速鉴定盐渍海参品质及产地为例，采用气相色谱-离子迁移谱联用仪检测，建立不同产地、不同存储时间下，盐渍海参挥发性有机物数据库，对盐渍海参采用气相色谱-离子迁移谱联用仪检测挥发性有机物，并与建立的数据库进行比对，确定盐渍海参的产地及品质。权利要求书CN 108387648 A1/2页 权利要求书CN 108387648 A2/2页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 口 D (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 108387648 A (43)申请公布日 2018.08.10 (21)申请号 201810721166.0 (22)申请日 2018.07.04 (71)申请人 山东省海洋资源与环境研究院 地址 264006山东省烟台市开发区长江路 216号 (72)发明人 张健井月欣王茂剑赵云苹 王共明刘芳 (74)专利代理机构 北京中济纬天专利代理有限 公司 11429 代理人 马国冉 (51)Int.Cl. G01N 30/00(2006.01) G01N 30/02(2006.01) 权利要求书2页 说明书6页 附图5页 (54)发明名称 一种快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法 (57)摘要 本发明涉及一种快速鉴定盐渍海参品质及 产地的方法。所述方法包括如下步骤：采用 FlavourSpec ®气相色谱-离子迁移联用仪检测，建立不同产地盐渍海参挥发性有机物数据库；采 用FlavourSpec ®气相色谱-离子迁移联用仪检 测，建立不同存储时间下盐渍海参挥发性有机物 数据库；对待测盐渍海参采用FlavourSpec ®气相 色谱-离子迁移联用仪检测挥发性有机物，并与 建立的数据库进行比对，确定待测盐渍海参的产 地及品质。有益效果：该方法通过检测盐渍海参 样品在存储过程中挥发性有机物质的变化，实现 对盐渍海参的产地和存储时间的快速判定，检测 速度快，准确度高，样品无需前处理。 1.一种快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： A．建立不同产地盐渍海参挥发性有机物数据库：采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁 移联用仪检测，得到不同产地盐渍海参样品的气相离子迁移谱图和指纹图谱； B.建立不同存储时间下盐渍海参挥发性有机物数据库：将盐渍海参样品放入冷库中 冷冻存储一定时间后，采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪检测，得到贮藏不同时 间盐渍海参样品的指纹图谱； C．对待测盐渍海参采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪检测得到挥发性有机 物的指纹图谱，并与步骤A和B建立的数据库进行比对，确定待测盐渍海参的产地及品质。 2.如权利要求1所述的快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法，其特征在于，所述的盐渍 海参样品的处理是：将鲜活海参剖开，去除内脏和泥沙，清洗干净，沸水预煮15-25min，置于 干盐中搅拌均匀，在0-4℃下盐渍7-14天。 3.如权利要求2所述的快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法，其特征在于，所述步骤A 中，采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪检测，具体为：分别称取不同产地的盐渍 海参样品8-15g于20mL顶空进样瓶中；FlavourSpec ®系统条件如下： 时间 载气 漂移气 记录 00:00,000 一 2毫升/分 记录 02:00.000 一 2毫升/分 10:00.000 一 80-120童升/分 一 20:00.000 一 80-120毫升/分 停止 20:00.020 一 自动进样器条件如下： 程序 自动顶空进样器 进样针 1.0毫升顶空进样针 样品体积 500微升 孵化温度 70-85包 孵化时间 00:15:00 震荡速度 500转分 震荡运行时间 5秒 震荡停止时间 2秒 进样温度 80-85℃ 取样速度 100微升秒 进样 离子迁移色谱 进样速度 500微升秒 进样前延迟 0毫秒 进样后延迟 0毫秒 进样针清洗时间 00-05:00 运行时间 00:21:00 。 4.如权利要求3所述的快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法，其特征在于，所述步骤B 中，将盐渍海参样品放入冷库中冷冻存储一定时间，具体条件为：盐渍海参放在 -25~-18℃的冷库中存储0-2年后，采用步骤A中的检测条件，建立存储不同时间盐渍海参挥发性物质 的指纹图谱。 一种快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法 技术领域 [0001]本发明涉及一种快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法，属于海参的品质及产地鉴 定技术领域。 背景技术 [0002]海参具有极强的自溶能力，在外界环境及化学因子的刺激下，海参首先发生 “吐 肠 ”，体壁部分会发生 “溶解 ”，甚至溶为液态，这种独特的生理现象使鲜活海参不易贮藏和 运输，故绝大多数鲜海参都被加工成盐渍海参，进而再加工成各种海参深加工制品。盐渍海 参俗称拉缸盐海参，是北方沿海居民最常用的加工方式，通过加入大量盐抑制微生物生长 繁殖，从而达到较长时间存放的目的。与干海参相比，盐渍海参在更大程度上保持了鲜活海 参质量品质，同时也在一定程度上延长了其贮藏期。正是基于以上特点，大多数海参加工企 业通常采用将鲜海参加工成盐渍海参，并以此作为后续一系列的海参深加工的中间产品形 式。目前，有70%左右的南方海参加工成盐渍海参销往全国各地。但盐渍海参品质会随着贮 藏期的延长而下降，同时随着存储时间的延长会有一些风味物质减少，一些新的风味物质 生成；另外不同产地的环境对海参风味物质的积累会有差异，盐渍海参品质也有差别，不法 商家为了追求高额利润存在以次充好的现象，而消费者难以判断其品质和价格间的差异。现有的海参品质鉴别主要通过营养成分、质构特性、微观结构等，这些鉴别方法均对样品具 有一定的破坏性，且耗时长，涉及到的检测仪器复杂。因此，有必要提出有效的技术方案，解 决上述问题。 发明内容 [0003]本发明针对上述现有技术的不足，提供一种快速鉴定盐渍海参品质及产地的方 法。该方法实现对盐渍海参的产地和存储时间的快速判定，检测速度快，准确度高，样品无 需前处理。 [0004]本发明解决上述技术问题的技术方案如下： 一种快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法，包括如下步骤： A．建立不同产地盐渍海参挥发性有机物数据库：采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁 移联用仪检测，得到不同产地盐渍海参样品的气相离子迁移谱图和指纹图谱； B.建立不同存储时间下盐渍海参挥发性有机物数据库：将盐渍海参样品放入冷库中 冷冻存储一定时间后，采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪检测，得到贮藏不同时 间盐渍海参样品的指纹图谱； C．对待测盐渍海参采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪检测得到挥发性有机 物指纹图谱，并与步骤A和B建立的数据库进行比对，确定待测盐渍海参的产地及品质。[0005]进一步地，所述的盐渍海参样品的处理是：将鲜活海参剖开，去除内脏和泥沙，清 洗干净，沸水预煮15-25min，置于干盐中搅拌均匀，在0-4℃下盐渍7-14天。 [0006]进一步地，所述步骤A中，采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪检测，具体 为：分别称取不同产地的盐渍海参样品8-15g于20mL顶空进样瓶中；FlavourSpec ®系统条件 如下： 时间 载气 漂移气 记录 00:00.000 一 2毫升/分 记录 02:00.000 一 2毫升/分 一 10:00,000 飞 80-120毫升/分 一 20:00.000 一 80-120毫升/分 停止 20:00.020 自动进样器条件如下： 程序 自动顶空进样器 进样针 1.0毫升顶空进样针 样品体积 500微升 孵化温度 70-85℃ 孵化时间 00:15:00 震荡速度 500转/分 震荡运行时间 5秒 震荡停止时间 2秒 进样温度 80-85℃ 取样速度 100微升/秒 进样 离子迁移色谱 进样速度 500微升秒 进样前延迟 0毫秒 进样后延迟 0童秒 进样针清洗时间 00:05:00 运行时间 00:21:00 进一步地，所述步骤B中，将盐渍海参样品放入冷库中冷冻存储一定时间，具体条件为：盐渍海参放在 -25~-18℃的冷库中存储0-2年后，采用步骤A中的检测条件，建立存储不同时间盐渍海参挥发性物质的数据图谱。 [0007]有益效果：本发明利用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用技术鉴别盐渍海参 产地和品质，该方法通过监控盐渍海参样品在存储过程中挥发性有机物质的变化，实现对 盐渍海参的产地和存储时间的快速判定，检测速度快，准确度高，样品无需前处理。 附图说明 [0008]图1为福建盐渍海参的气相离子迁移谱图； 图2为威海盐渍海参的气相离子迁移谱图； 其中纵坐标为气相保留时间（measurment run），横坐标为离子迁移时间（drift time）；整个图背景为黑色，左侧白色竖线为反应离子峰（RIP峰，drift time = 7.95ms）；反 应离子峰右侧的每一个点代表一种挥发性有机物； 图3为福建和威海盐渍海参待选分析区域指纹图谱； 其中每一行代表一个样品所选择的所有区域，每一列是不同样品间同一区域的对比，由于挥发性成分太多，故将图分为了三个部分；具体的，17NF -1代表福建盐渍海参待选分析 区域指纹图谱，17WH -1代表威海盐渍海参待选分析区域指纹图谱； 图4为存储不同时间盐渍海参待选分析区域指纹图谱； 图5为存储不同时间盐渍海参样品的主成分分析图； 图6为试验例1中商品海参W产地的气相离子迁移谱图； 图7为试验例1中商品海参W存储时间品质的气相离子迁移谱图。 具体实施方式 [0009]本申请涉及一种快速鉴定盐渍海参品质及产地的方法，该方法包括以下步骤： A.不同产地盐渍海参挥发性有机物数据库的建立： 分别将不同产地的鲜活海参剖开，去除内脏和泥沙，清洗干净，预煮后进行盐渍，采用 FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪检测，得到不同产地盐渍海参样品的气相离子迁 移谱图和指纹图谱； 具体为：分别取福建和威海鲜活海参，去除内脏和泥沙，清洗干净，沸水预煮15min，置 于干盐中，在0-4℃下盐渍7天。分别取两产地盐渍海参10g，去除表面盐分，置于20mL顶空进 样瓶中。FlavourSpec ®系统条件设置如表1，其中10:00,000后，漂移气流速为80mL/min，自 动进样器条件设置如表2，其中孵化温度为80℃，进样温度为80℃，在此条件下进行检测，福 建和威海盐渍海参样品的气相离子色谱图如图1，从图1中可以看出福建和威海的盐渍海参 的挥发性有机物存在明显的差异。并对图1中所选分析区域进行比对，并利用LAV软件的 Gallery Plot插件，自动生成指纹图谱结果如图2，根据目前已经定性出的挥发性有机物 数据库，福建海参中含有较多的2-乙基己醇（2-ethylhexyl alcohol）、1-辛烯 -3-醇（1-octen -3-ol）、苯甲醛（benzaldehyde）、2-己烯 -1-醇（2-hexen -1-ol）等物质，而威海海参含 有较多香茅醇（citronellol）、1-壬醇（1-nonanol）、1-辛醇（1-octanol）、1-己醇（1-hexanol）等物质。 [0010] B.不同存储时间下盐渍海参挥发性有机物数据库的建立： 盐渍海参放入冷库中冷冻存储一定时间后，采用FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联 用仪检测，得到贮藏时间盐渍海参样品的指纹图谱； 具体为：分别取北方鲜活海参，去除内脏和泥沙，清洗干净，沸水预煮15min，置于干盐 中，在0-4℃下盐渍7天。去除表面盐分，放入冷库 -25—-18℃冷冻存储0年（样品标号17WH -1、样品标号17WH -2)、半年（样品标号1610-1、样品标号1610-2)、1年半（样品标号151208-1、样品标号151208-2)、2年（样品标号15DLC -1、样品标号15DLC -2)、3年（样品标号14DLC -1、样 品标号14DLC -2）、4年（样品标号13DLC -1、样品标号13DLC -2）。分别取盐渍海参10g，置于 20mL顶空进样瓶中。FlavourSpec ®系统条件设置如表1，其中10:00,000后，漂移气流速为80 毫升/分，自动进样器条件设置如表2，经试验优化得到本发明的最佳测试条件，在此条件下 采集不同产地盐渍海参的气相离子迁移谱图，其中孵化温度为80℃，进样温度为80℃，在 此条件下进行检测，并对气相离子迁移谱图中差异较大的区域进行选定分析，利用LAV软 件的Gallery Plot插件，自动生成指纹图谱结果如图3，结果显示盐渍海参经过贮藏后某 些的挥发性有机物会随着存储时间的增加而减少，而有些的挥发性有机物会随着存储时间 的增加而增多此外，在存储过程中，有些物质消失，又产生一些新的物质。并通过系统软件 可以进行不同存储时间主成分分析（PCA），结果如图4，从图4中可以看出，随着存储时间的 增加，样品在主成分分析图中的位置右移，因此可对盐渍海参进行不同存储时间的判定。 [0011] C.待测盐渍海参挥发性有机物的测定： 对待测盐渍海参进行挥发性有机物检测，得到有机物挥发的指纹图谱，并与步骤A和B 建立的数据库进行比对，确定待测盐渍海参的产地及品质。 [0012]表1 FlavourSpec ®系统条件 时间 载气 漂移气 记录 00:00,000 2童升/分 记录 02:00,000 2童升/分 二 10:00,000 一 80-120毫升/分 一 20:00,000 一 80-120毫升/分 停止 20:00,020 表2自动进样器条件 程序 自动顶空进样器 进样针 1.0毫升顶空进样针 样品体积 500微升 孵化温度 70-85℃ 孵化时间 00:15:00 震荡速度 500转/分 震荡运行时间 5秒 震荡停止时间 2秒 进样温度 80-85℃ 取样速度 100微升秒 进样 离子迁移色谱 进样速度 500微升/秒 进样前延迟 0毫秒 进样后延迟 0毫秒 进样针清洗时间. 00:05:00 运行时间 00:21:00 试验例1 试验产品：市售商品海参W。 [0013]试验方法：将商品海参W进行挥发性有机物检测，在相同的检测条件下进行操作，产地的分析点的选择与不同产地盐渍海参挥发性有机物数据库分析点相同，检测得到海参 W产地的气相离子迁移谱图，如图5所示；存储时间的分析点的选择与不同存储时间下盐渍 海参挥发性有机物数据库分析点相同，检测得到海参W存储时间品质的气相离子迁移谱图，如图6所示；结果与两数据库进行比对，确定待测盐渍海参的产地及品质。 [0014]试验结果：商品海参W中挥发性有机物与不同产地盐渍海参挥发性有机物数据库 通过匹配，如表3所示，发现与17WH -1有83%的相似度，商品海参W产地为威海产地的海参；如 表4所示，通过与不同存储时间下盐渍海参挥发性有机物数据库匹配，发现与存储0年 （17WH -1、17WH -2）的匹配度大于90%，商品海参W是新鲜盐渍海参。 [0015]表3商品海参W样品产地的气相离子迁移谱图与数据库匹配结果 产地 福建产地 威海产地 相似度(%) 54 83 表4商品海参W样品存储过程中气相离子迁移谱图与数据库匹配结果 诸存时 间 17WH-1 17W H-2 1610 -1 1610-2 151208-1 151208-1 15DL C-1 15DLC-2 14ILC-1 14DLC-2 13DL C-1 13JL C-2 相似度(%) 90 95 74 72 65 64 58 55 50 52 42 45 注：17WH -1和17WH -2表示贮藏时间为0年；1610-1和1610-2表示贮藏时间为半年；151208-1和151208-2表示贮藏时间为1.5年；15DLC -1和15DLC -2表示贮藏时间为2年； 14DLC -1和14DLC -2表示贮藏时间为3年；13DLC -1和13DLC -2表示贮藏时间为4年。[0016] FlavourSpec ®气相色谱 -离子迁移联用仪将气相色谱（GC）的高分离度与离子迁 移谱（IMS）的高灵敏度完美结合，能够在固体和液体样本的顶部空间检测挥发性有机化合 物，利用GC突出的分离特点，对复杂混合物进行预先分离，以单个组分的形式进入到IMS反 应区与电离区电离产生的试剂离子反应生成产物离子，产物离子在离子门脉冲作用进入迁 移区进行二维的分离，分离后离子最终被检测。本发明认识到FlavourSpec ®气相色谱 -离子 迁移联用在风味物质分析上的优势，并应用于盐渍海参品质与产地鉴别，通过顶空进样分 析风味化合物，对单一化合物/标记物进行定性定量分析，方法无需复杂的样品前处理，简 单快捷，灵敏度高。 [0017]本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。因此，无 论从哪一点来看，本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不能限制本发 明，权利要求书指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本 发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在本发明的权利要求 书的范围内。 LM 图1 图2 图3 ·工工 117N F-100.0.17WH -1 booo o o o goboo · 一二口M寸二自怕二冷内的的 一一内花鞋铅一鞋一鞋靴一 -6a.a oo600o00o0060ooo 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