FaVEx系列脂肪去除柱符合GB 31613.4-2022标准要求 除脂柱 牛 吡利霉素

关于《GB 31613.4-2022 食品安全国家标准 牛可食性组织中吡利霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》，本篇从前处理净化技术的角度进行创新性分析。（1） 基质：《GB 31613.4-2022》验证了牛可食性组织，之前的标准方法验证的基质如牛奶、猪肉、虾、蜂蜜、蜂王浆、鸡肉、猪肝、牛肝、鸡蛋等。《40兽药残留检测标准操作规程-2008 牛奶中吡利霉素残留检测方法 高效液相色谱-串联质谱法》《SN/T 3155-2012 出口猪肉、虾、蜂蜜中多类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》《SN/T 2576-2010 进出口蜂王浆中林可酰胺类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》《SN/T 2218-2008 进出口动物源性食品中林可酰胺类药物残留量的检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》十多年来，前处理净化技术和仪器分析方法都发生了很大的进步，下面我们从“前处理净化技术”的角度进行分析比较。（2） 前处理方法的对比《GB 31613.4-2022》的检测原理是用酸化乙腈萃取目标物后，通过固相萃取柱进行净化除杂，然后使用外标定量法进行LC-MS/MS分析。（1） 前处理步骤使用的耗材更加节约：只需基质增强脂肪去除柱（300mg/3mL或相当者）（2）前处理步骤更加简单，更加容易操作：提取步骤：称取试料-萃取-剧烈震荡-加无水硫酸钠和氯化钠-剧烈震荡-离心-取上清液-加水-备用净化步骤：采用“一步通过法”通过固相萃取柱，收集全部滤液，过滤膜后，上机分析。(3)对比《SN/T 3155-2012 出口猪肉、虾、蜂蜜中多类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》的前处理步骤：猪肉、虾样品经乙腈提取，正己烷脱脂，再用C18固相萃取小柱净化，LC-MS/MS法测定，内标法或外标法定量分析，其操作步骤如下：可以看出，不管是提取还是净化步骤，《GB 31613.4-2022》与十年前的标准方法相比，都进行了很大程度的简化，体现了前处理技术进步的方向：更简单、更节约，更环保。（3） 创新点分析《GB 31613.4-2022》采用的固相萃取柱净化法不需要活化、平衡，净化过程不需要淋洗、洗脱，进而避免了“大体积溶液的浓缩步骤”，这种技术革新大大简化了操作步骤，提高效率，并且节约溶剂，绿色环保。FaVEx-NM多兽药残留分析用基质增强脂肪去除柱，符合此标准的要求，采用“一步通过净化法”完成去除脂肪等杂质的净化步骤，检测定量限符合国标要求。另外，FaVEx-NM摸索出一次净化分析多种（91种）兽药残留的操作步骤，应用方案中其回收率和RSD结果符合国标要求。操作步骤如下：（1） 提取称取试料-加无水硫酸钠-剧烈震荡-加酸化乙腈萃取-剧烈震荡-离心-取上清液-备用（2） 净化采用“一步通过法”通过固相萃取柱，收集全部滤液，过滤膜后，上机分析。应用方案：FaVEx-NM应用方案已经验证91种兽药残留（包括但不限于91种兽药残留），《GB 31613.4-2022》的pdf文档，欢迎联络我索取应用方案！产品信息：基质增强脂肪去除柱品牌货号名称规格GeTECHFaVEx-NM91种中低极性兽药残留基质增强脂肪去除柱50支/盒GeTECHFaVEx-HP33种中高极性残留基质增强脂肪去除柱50支/盒GeTECHFaVEx-AG29种瘦肉精类基质增强脂肪去除柱50支/盒以GETech FaVEx-Hp快速萃取净化套组分析牛奶产品中高极性多重兽药残留量 应用批注 食品 绪论 作者 古宜加、华宏达巨研科技股份有限公司 高雄市左营区裕诚路392号 14楼 巨研科技公司致力推广多重动物用药一次检验分析·先前已研发成功FaVEx-Nm kit对于102项动物用药一次提取及净化·一个步骤过净化管进行高效能除干扰物·惟每类药项适用之提取溶剂有所差异·本方法针对较高极性33药项·同样进行一次提取及净化·均可成功达到一次分析之目标·相较普遍的固相萃取法·处理一批16个样品可在1小时内完成前处理·溶剂使用也仅10 mL/样品；结合FaVEx-Nm 102项及FaVEx-Ag 29项共可检测150项动物用药·对于动物用药一次检验分析其涵盖范围更完整。 以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内疏类及巨环类(表一)，这些药项在一般萃取及固相萃流程均有很大限制及步骤繁杂之缺点·本应用方法同时把三类药项一次同时提取净化·因操作简单只要一步净化·使得人员操作易上手·有机溶剂的使用减少。以Agilent 6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪分析·可以同时检测牛奶中四环素等33项兽药药剂项目·分别添加20ng/g及5ng/g·添加20ng/g的回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%，，添加5ng/g的回收率除了Minocycline，Josamycin 及Virginiamycin M1较低外其余回收率均50%以上(图二)·于LOQ部分·Cloxacillin定量极限0.005 ug/g·其他均可到0.001ug/g(表二)。 4°C， 4000 rpm离心5分钟 以高速震荡机震荡1分钟 取5mL上清液加入FaVEx-Hp萃取套组以每秒1滴流速加压净化收集 取2.5mL澄清液以40度，氮气吸干以20%乙腈水(1%甲酸)1mL回溶 以LC-MS/MS分析 以LC-MS/MS分析 移动相流速：0.4 mL/min。 层析管柱： ZORBAX RRHD Eclipse Plus C18 内径3.0×100mm 1.8-Micron 流动相溶液-A液：水+0.1%甲酸 流动相溶液-B液：甲醇+0.1%甲酸 流动相溶液：A液与B液以下列条件进行梯度分析。 分析仪器： 1290/6470液相色谱-三重四极杆质谱联用仪(Agilent) 时间(min) A(%) B(%) 0.0 98 2 4.0 70 30 6.0 65 35 6.0 50 50 8.0 40 60 12.0 1 99 15.0 10 90 15.1 99 1 post time： 2.0min 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数 Compound Name PrecursorIon Production Ret Time(min) Fragmentor CollisionEnergy Cell Accelerator Voltage Polarity 4-Epichlortetracycline 479.1 443.9 6.75 114 17 7 Positive 479.1 462.1 6.75 114 9 7 Positive 4-Epioxytetracycline 461.1 201.1 5.70 119 41 7 Positive 461.1 426.1 5.70 119 13 7 Positive 4-Epitetracycline 445.1 410.1 5.26 104 13 7 Positive 445.1 427.1 5.26 104 5 7 Positive Amoxicillin 366.1 349.0 3.90 87 2 4 Positive 366.1 208.1 3.90 87 5 4 Positive 366.1 114.1 3.90 87 17 4 Positive Ampicillin 350.1 106.0 6.39 102 13 4 Positive 350.1 160.0 6.39 102 6 4 Positive 350.1 114.0 6.39 102 29 4 Positive Cefapirin 424.2 292.1 4.52 112 9 7 Positive 424.2 152.1 4.52 112 21 7 Positive Ceftiofur 524.0 241.0 7.96 110 13 7 Positive 524.0 95.0 7.96 110 45 7 Positive Cefuroxime 423.0 318.0 6.39 92 2 4 Negative 423.0 207.0 6.39 92 5 4 Negative Cephalexin 348.1 158.1 5.96 92 6 / Positive 348.1 106.1 5.96 92 29 7 Positive Chlortetracycline 479.1 443.9 7.27 114 17 7 Positive 479.1 462.1 7.27 114 9 7 Positive Clarithromycin 748.5 158.1 10.32 164 29 7 Positive 748.5 116.1 10.32 164 49 7 Positive Clindamycin 425.2 377.1 8.19 149 17 7 Positive 425.2 126.1 8.19 149 29 7 Positive Cloxacillin 436.1 277.1 10.41 186 13 7 Positive 436.1 160.1 10.41 186 13 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数(续) Compound Name Precursorion Production Ret Time(min) Fragmentor Collision energy Cell AcceleratorVoltage Polarity Demeclocycline 465.0 448.0 6.66 106 21 7 Positive 465.0 430.0 6.66 106 17 7 Positive Dicloxacillin 470.0 211.9 10.77 179 29 7 Positive 470.0 452.0 10.77 179 17 7 Positive Doxycycline 445.1 428.1 8.00 155 13 7 Positive 445.1 153.9 8.00 155 29 7 Positive Erythromycin 734.5 158.1 9.52 164 33 7 Positive 734.5 576.1 9.52 164 17 7 Positive Josamycin 828.5 109.1 10.25 206 49 7 Positive 828.5 174.1 10.25 206 37 / Positive Kitasamycin 772.6 109.1 9.54 206 45 7 Positive 772.6 174.1 9.54 206 33 7 Positive Lincomycin 407.2 126.1 5.22 149 29 7 Positive 407.2 359.1 5.22 149 17 7 Positive Mecillinam 326.2 167.1 6.64 144 21 / Positive 326.2 139.1 6.64 144 33 7 Positive Methacycline 443.0 426.0 7.71 121 13 7 Positive 443.0 381.0 7.71 121 25 7 Positive 443.0 201.0 7.71 121 33 7 Positive Minocycline 458.0 441.0 5.43 155 27 7 Positive 458.0 352.0 5.43 155 45 7 Positive Neospiramycin1 699.5 174.1 6.94 176 29 7 Positive 699.5 142.1 6.94 176 29 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 表一、兽药33项药剂之多重反应侦测模式参数(续) Compound Name Precursorion Production Ret Time(min) Fragmentor CollisionEnergy Cell AcceleratorVoltage Polarity Oleandomycin 772.0 158.0 9.62 158 28 7 Positive 772.0 586.2 9.62 158 16 Positive Orbifloxacin 396.2 295.1 6.46 144 25 / Positive 396.2 267.0 6.46 144 41 7 Positive Oxacillin 402.1 160.1 10.08 100 11 7 Positive 402.1 243.1 10.08 100 8 7 Positive Oxytetracycline 461.1 426.1 6.06 119 13 7 Positive 461.1 443.1 6.06 119 5 7 Positive SpiramycinI 843.5 174.1 7.22 233 41 Positive 843.5 101.1 7.22 233 45 Positive Tetracycline 445.1 410.1 5.98 114 13 7 Positive 445.1 427.1 5.98 114 5 7 Positive Tilmicosin 869.6 174.1 7.84 285 49 / Positive 869.6 132.1 7.84 285 53 Positive Tylosin 916.5 174.1 9.48 223 45 / Positive 916.5 101.1 9.48 223 53 / Positive Virginiamycin M1 526.3 355.2 10.53 129 13 Positive 526.3 337.1 10.53 129 21 7 Positive *为定量离子对·定性离子对可视基质情况选择适合之离子对 品 浩诫ww丹ww回汗一 乙乙诫乙网乙一N0 表二、鲜牛奶中兽药33项药剂之线性平方及 LOQ Compound Name 中文名称 CF R2 LOQ，ng/g 4-Epichlortetracycline 差向金霉素 0.9971 0.001 4-Epioxytetracycline 差向土霉素 0.9986 0.001 4-Epitetracycline 差向四环素 0.9973 0.001 Amoxicillin 阿莫西林 0.9974 0.001 Ampicillin 氨苄青霉素 0.9986 0.001 Cefapirin 头孢匹林 0.9975 0.001 Ceftiofur 头孢噻呋 0.9924 0.001 Cefuroxime 呋肟头孢菌素 0.9928 0.001 Cephalexin 头孢氨苄 0.9967 0.001 Chlortetracycline 金霉素 0.9996 0.001 Clarithromycin 克拉霉素 0.998 0.001 Clindamycin 克林霉素 0.9986 0.001 Cloxacillin 氯唑西林 0.9922 0.005 Demeclocycline 脱甲金霉素 0.9938 0.001 Dicloxacillin 双氯青霉素 0.9966 0.001 Doxycycline 强力霉素 0.9981 0.001 Erythromycin 红霉素 0.9881 0.001 Josamycin 交沙霉素 0.9972 0.001 Kitasamycin 吉它霉素 0.9965 0.001 Lincomycin 林可霉素 0.9985 0.001 Mecillinam 甲亚胺青霉素 0.9968 0.001 Methacycline 甲烯土霉素 0.9964 0.001 Minocycline 二甲胺四环素 0.9989 0.001 NeospiramycinI 新螺旋霉素Ⅰ 0.9967 0.001 Oleandomycin 夹竹桃霉素 0.9973 0.001 Orbifloxacin 奥比沙星 0.9971 0.001 Oxacillin 苯唑青霉素 0.9966 0.001 Oxytetracycline 氧四环素 0.9982 0.001 SpiramycinI 螺旋霉素I 0.9964 0.001 Tetracycline 四环素 0.9953 0.001 Tilmicosin 替米考星 0.9977 0.001 Tylosin 泰乐菌素 0.9941 0.001 Virginiamycin M1 维吉尼霉素M1 0.9978 0.001 结论 1，以FaVEx-Hp分析牛鲜奶中高极性多重兽药，四环素类、β-内疏类及巨环类共33项。 2，添加20ng/g之回收率除了Minocycline及 Cloxacillin低于50%外其余均高于50%%。 3，定量极限部分· Cloxacillin定量极限0.005 ug/g·其他均可到0.001 ug/g。 4，此方法与FaVEx-Nm互补·巨环类在两种方法均可分析惟在Nm kit 回收不佳时在Hp kit则有很好回收率·例如Lincomycin在Hp kit即好回收率。 详细信息 有矣本公司产品与服务的其他信息· 请造访本公司网站：www.getech.com.tw 上海分公司：绿巨研科贸易(上海)有限公司 联系电话：021-34612930/13248260650 邮箱： ada@getc.com.cn www.getech.com.tw 本文内容如有任何错误·或是因为提供、实行或使用本数据造成附带或衍生损害·巨研科技恕不负责。 本文件中的信息、说明和规格可能随时变更·恕不另行通知。 巨研科技股份公司·2019年2019年12月12日GET-AN2019004CN