气相色谱测定植物油中反式脂肪酸

反式不饱和脂肪酸（划重点）难以被人体消化代谢，不仅易增加肥胖几率，更有研究表明反式脂肪酸可增加心血管疾病、糖尿病等患病几率，甚至会抑制婴幼儿生长发育。《中国居民膳食营养素参考摄入量》提出“我国2岁以上儿童和成人膳食中来源于食品工业加工产生的反式脂肪酸的最高限量为膳食总能量的1%，大致相当于2g。为保障食品安全，呵护人体健康，采用气相色谱法可准确测定牛奶中反式脂肪酸含量。植物油是日常生活中常选的油脂食品，本方案选用某品牌调和油和h花生油，采用气相色谱法测定其中反式脂肪酸含量：（1）标准样品典型谱图：50 种脂肪酸甲酯（顺式+反式）标样的典型谱图18 种脂肪酸甲酯（2 种顺式+16 种反式）标样的典型分离谱图（2）植物油样品测定谱图：调和油样品测定谱图结果分析：调和油样品中检测出反式脂肪酸含量0.4444%；花生油样品测定谱图结果分析：花生油中检出反式脂肪酸含量0.0549%印FUL文件号： FLYQ-AD-FA-01浙江福立分析仪器股份有限公司应用中心 食品中反式脂肪酸的测定 气相色谱法 一、检测方法 参考标准 GB 5009.257-2016《食品安全国家标准食品中反式脂肪酸的测定》 二、方法提要 样品经气相色谱仪分离， FID检测器检测，以保留时间定性，，面积归一化法定量。 三、试剂和材料 3.1试剂 3.1.1脂肪酸甲酯标准品： 亚麻酸(10000mg/L)， 亚油酸(10000mg/L)，6种反式脂肪酸(100mg/L) 3.1.2盐酸：纯度 37%~38% 3.1.3乙醚：分析纯 3.1.4石油醚：分析纯 3.1.5异辛烷：分析纯 3.1.6氢氧化钠-甲醇溶液： 2mol/L 3.1.73.2仪器设备 3.2.1 GC9720Plus 气相色谱仪，附宽量程氢火焰检测器 (FID) 3.2.2色谱柱： RBX-FAME 100m/0.25mm/0.25um 3.2.3一般实验常用仪器。 四、溶液配制 4.1标准溶液配制 准确量取 4pL 亚麻酸(3.1.1)， 7 pL亚油酸(3.1.1)，89pL6种反式脂肪酸甲酯标样(3.1.1)于样品瓶中，得到 400mg/L 亚麻酸， 700mg/L亚油酸， 100mg/L6 种反式脂肪酸的混合标样，摇匀待测。 4.2试样配制 4.2.1动植物油脂 4.2.1.1调和油样品处理 准确称取 0.0778g 调和油于样品瓶中，加入4mL异辛烷充分溶解，加入 0.2mL氢氧化钠-甲醇溶液，涡旋混匀 1min， 水洗除去碱性，，于 4000r/min 下离心5min，上清液经0.45um滤膜过滤，得到滤液待测。 4.2.1.2花生油样品处理 准确称取 0.0696g 花生油于样品瓶中，加入4mL异辛烷充分溶解，，加入0.2mL氢氧化钠-甲醇溶液，涡旋混匀1min， 水洗除去碱性，，于 4000r/min 下离心5min， 上清液经0.45um滤膜过滤，得到滤液待测。 五、测定 5.150种脂肪酸甲酯((顺式+反式)标样的典型谱图 6 5.2 18种脂肪酸甲酯旨(2种顺式+16种反式))标样的典型分离谱图 5.318种脂肪酸甲酯标样的3针重复性谱图及结果 5500 峰序 组分名 平均时间 时间 平均面积 面积 RSD% 平均峰高[fA] 峰高 RSD% 1 C16：1 9t 40.054 0.099 47933.9 0.9801 9288.6 1.2585 2 C18：1 6t 45.566 0.128 49129.9 1.0539 6649.9 1.1375 3 C18：1 9t 45.705 0.128 47476.3 0.7477 6918.5 1.1209 4 C18：1 11t 45.903 0.128 48133.1 1.0987 7152.7 1.4506 5 C18：2 9t，12t 47.936 0.138 222284.5 0.5790 28705.9 0.7766 6 C18：2 9c，12t 48.930 0.141 82679.8 0.4691 10835.9 0.5802 7 C18：2 9t，12c 49.244 0.144 83676.0 0.4836 11244.6 0.2929 8 C18：2 9c，12c 49.924 0.145 40656.6 0.5926 5299.9 0.4132 9 C18：3 50.758 0.154 76174.5 0.5400 9612.7 0.2830 10 C18：3 52.032 0.160 31765.9 1.9564 3853.0 1.5365 11 C18：3 52.200 0.158 34003.2 3.1555 4109.4 1.9797 12 C18：3 52.518 0.161 28614.8 0.7393 3401.9 0.8715 13 C18：3 52.969 0.159 13984.3 0.7774 1625.4 0.6651 14 C20：1 11t 53.495 0.165 49175.6 1.1754 5280.9 1.4750 15 C18：3 53.720 0.164 11851.5 0.5362 1384.6 0.7179 16 C18：3 53.941 0.166 12336.4 0.2383 1359.6 0.3895 17 C18：3 54.843 0.167 7380.3 0.5062 789.7 0.8899 18 C22：1 13t 61.994 0.123 49003.5 1.1806 5872.5 3.3599 5.4检出限 5.4.1标准溶液3针重复性谱图(Ⅱ级混合标准溶液) 5.4.2检出限结果 峰序 组分名 含量 基线噪声 平均峰高/fA 检出限 定量限/mg/L 1 C16：1 9t 5 0.0174 469.8 0.5556 2.2224 2 C18：1 6t 5 377.5 0.6914 2.7656 3 C18：1 9t 5 386.0 0.6762 2.7048 4 C18：1 11t 5 367.5 0.7102 2.8408 5 C18：2 9t，12t 2.5581 5808.4 0.0230 0.092 6 C18：2 9c，12t 0.9565 2118.4 0.0236 0.0944 7 C18：2 9t，12c 1.0028 2121.6 0.0247 0.0988 8 C18：2 9c，12c 0.4827 1015.9 0.0248 0.0992 9 C18：3 1.7559 1116.6 0.0821 0.3284 10 C18：3 0.7586 464.8 0.0852 0.3408 11 C18：3 0.7845 487.6 0.0840 0.336 12 C18：3 0.6677 396.3 0.0879 0.3516 13 C18：3 0.2766 191.5 0.0754 0.3016 14 C20：1 11t 5 260.6 1.0015 4.006 15 C18：3 0.2800 167.0 0.0875 0.35 16 C18：3 0.2859 161.2 0.0926 0.3704 17 C18：3 0.1712 95.6 0.0935 0.374 18 C22：1 13t 5 289.8 0.9006 3.6024 5.5样品谱图及结果 5.5.1调和油样品谱图及结果 地址：浙江温岭城东街道百丈南路95号 邮编： 317500 峰序 组分名 保留时间[min] 半峰宽[min] 峰高[fA] 峰面积[fA*s] 1 C16：19t 39.739 0.076 42.7 198.3 2 C18：3 9c，12t，15t 51.914 0.127 314.6 2619.7 3C C20：1 11t 52.665 0.133 5397.6 46026.3 4 C18：3 9t，12c，15c 53.414 0.134 841.1 6586.7 5 C22：1 13t 61.586 0.115 170.4 1254.6 总计： 6766.4 56685.7 序号 组分名 峰面积含量% 矫正因子fx 反式脂肪酸总含量% 1 C16：1 9t 0.0016 0.99 0.4444 2 C18：3 9c， 12t，15t 0.0212 0.96 3 C20：1 11t 0.3768 0.96 4 C18：3 9t， 12c，15c 0.0533 0.96 5 C22：1 13t 0.0101 0.95 5.5.2花生油样品谱图及结果 峰序 组分名 保留时间[min] 半峰宽[min] 峰高[fA] 峰面积[fA*s] 1 C16：19t 39.757 0.171 30.7 138.1 62.8 454.1 2 C18：2 9t，12t 47.737 3 C18：2 9c，12t 48.789 0.149 459.5 4409.5 总计： 553.1 5001.7 峰序 组分名 峰面积含量% 矫正因子 fx 油脂中反式脂 1 C16：1 9t 0.01 0.99 0.0549 2 C18：2 9t， 12t 0.0047 0.97 3 C18：2 9c， 12t 0.0417 0.97